丝氨酸蛋白酶抑制蛋白融合多肽及其使用方法技术

本发明专利技术涉及包括丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白的氨基酸序列和包含以下至少一个的第二多肽的分子，具体地说是多肽，更具体地说是融合蛋白：Fc多肽或来源于Fc多肽的氨基酸序列、细胞因子靶向多肽或来源于细胞因子靶向多肽的序列、含有WAP结构域的多肽或来源于含有WAP的多肽的序列和白蛋白多肽或来源于血清白蛋白多肽的氨基酸序列。本发明专利技术还涉及在各种治疗和诊断适应症中使用所述分子的方法，以及生产所述分子的方法。

Fusion peptide of serine protease inhibitor and its application

The invention relates to an amino acid sequence including a serine protease inhibitor protein polypeptide or an amino acid sequence derived from a serine protease inhibitor protein and a molecule comprising at least one of the following second polypeptides, in particular a polypeptide, more particularly a fusion protein: an FC polypeptide or an amino acid sequence derived from an FC polypeptide, a cytokine targeted polypeptide or a cytokine targeted polypeptide Peptides containing WAP domain or sequences from peptides containing WAP and albumin peptides or amino acid sequences from serum albumin peptides. The invention also relates to a method for using the molecule in various therapeutic and diagnostic indications and a method for producing the molecule.

【技术实现步骤摘要】
丝氨酸蛋白酶抑制蛋白融合多肽及其使用方法本申请是原案申请日为2012年6月28日、申请号为201280041956.5(国际申请号为PCT/US2012/044730)、专利技术名称为“丝氨酸蛋白酶抑制蛋白融合多肽及其使用方法”的专利申请的分案申请。相关申请本申请要求2011年6月28日提交的美国临时申请号61/502055、2011年12月14日提交的美国临时申请号61/570394、2011年12月19日提交的美国临时申请号61/577204和2012年4月25日提交的美国临时申请号61/638168的权益。这些申请每一个的内容均通过引用以其整体结合到本文中。专利
本专利技术涉及包括丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽的氨基酸序列和第二多肽的分子，具体地说是多肽，更具体地说是融合蛋白。另外，本专利技术涉及包括丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽的氨基酸序列、第二多肽和第三多肽的融合蛋白。准确地讲，本专利技术涉及包括至少一个丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽和第二多肽的融合蛋白或包括至少一个丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽、第二多肽和第三多肽的融合蛋白，其中本专利技术融合蛋白的第二多肽和第三多肽可以是以下的至少一个：Fc多肽或来源于Fc多肽的氨基酸序列；细胞因子靶向多肽或来源于细胞因子靶向多肽的序列；含有WAP结构域的多肽或来源于含有WAP的多肽的序列；或白蛋白多肽或来源于血清白蛋白多肽的氨基酸序列。本专利技术还涉及在各种治疗和诊断适应症中使用所述分子的方法以及生产所述分子的方法。专利技术背景丝氨酸蛋白酶活性异常或蛋白酶对蛋白酶抑制剂失衡可导致蛋白酶介导的组织破坏和炎性反应。因此，存在对靶向丝氨酸蛋白酶活性异常和/或蛋白酶对蛋白酶抑制剂失衡的治疗剂和疗法的需要。此外，可通过减少异常细胞因子信号转导和丝氨酸蛋白酶活性获得增强的治疗效果。另外，丝氨酸蛋白酶抑制蛋白蛋白质显示抗感染活性，而靶向炎性细胞因子显示增加感染风险。本专利技术的融合蛋白具有减少炎性细胞因子活性和限制感染风险的潜力。专利技术概述本文所述融合蛋白包括至少丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽的氨基酸序列(多肽1)和第二多肽(多肽2)。另外，本文所述融合蛋白包括丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽的氨基酸序列(多肽1)、第二多肽(多肽2)和第三多肽(多肽3)。本文可互换使用的术语“融合蛋白”和“融合多肽”是指与至少第二多肽或来源于至少第二多肽的氨基酸序列有效连接的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽或来源于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽的氨基酸序列。融合蛋白的个别元素可以多种方式的任一种连接，包括例如直接连接、使用中间体或间隔肽、使用接头区、使用铰链区或使用接头区和铰链区两者。在一些实施方案中，接头区可落入铰链区的序列内，或者，铰链区可落入接头区的序列内。优选接头区是肽序列。例如，接头肽约包括0-40个氨基酸，例如0-35个氨基酸、0-30个氨基酸、0-25个氨基酸或0-20个氨基酸。优选铰链区为肽序列。例如，铰链肽约包括0-75个氨基酸，例如0-70个氨基酸、0-65个氨基酸或0-62个氨基酸。在融合蛋白包括接头区和铰链区两者的实施方案中，优选接头区和铰链区各自为肽序列。在这些实施方案中，铰链肽和接头肽合起来约包括0-90个氨基酸，例如0-85个氨基酸或0-82个氨基酸。在一些实施方案中，丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽和第二多肽可通过中间体结合蛋白连接。在一些实施方案中，融合蛋白的基于丝氨酸蛋白酶抑制蛋白的部分和第二多肽部分可为非共价连接的。在一些实施方案中，本专利技术的融合蛋白可具有自N端至C端方向或自C端至N端方向的下式之一：多肽1(a)–铰链m–多肽2(b)多肽1(a)–接头n–多肽2(b)多肽1(a)–接头n–铰链m–多肽2(b)多肽1(a)–铰链m–接头n–多肽2(b)多肽1(a)–多肽2(b)–多肽3(c)多肽1(a)–铰链m–多肽2(b)–铰链m–多肽3(c)多肽1(a)–接头n–多肽2(b)–接头n–多肽3(c)多肽1(a)–铰链m–接头n–多肽2(b)–铰链m–接头n–多肽3(c)多肽1(a)–接头n–铰链m–多肽2(b)–接头n–铰链m–多肽3(c)其中n为0-20的整数，其中m为1-62的整数，其中a、b和c为至少1的整数。这些实施方案包括上式及其任何变化或组合。例如，式中多肽的顺序还包括多肽3(c)–多肽1(a)–多肽2(b)、多肽2(b)–多肽3(c)–多肽1(a)或其任何变化或组合。在一些实施方案中，多肽1序列包括丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽。丝氨酸蛋白酶抑制蛋白是一类具有类似结构的蛋白质，最初被鉴定为一组能够抑制蛋白酶的蛋白质。以非限制性实例的方式，适用于本文提供的融合蛋白的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白蛋白质包括α-1抗胰蛋白酶(AAT)、抗胰蛋白酶相关蛋白(SERPINA2)、α1-抗胰凝乳蛋白酶(SERPINA3)、kallistatin(SERPINA4)、单核细胞嗜中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂(SERPINB1)、PI-6(SERPINB6)、抗凝血酶(SERPINC1)、纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)、α2-抗纤溶酶(SERPINF2)、补体1-抑制剂(SERPING1)和神经丝抑蛋白(SERPINI1)。在一些实施方案中，多肽1序列包括α-1抗胰蛋白酶(AAT)多肽序列或来源于AAT的氨基酸序列。在一些实施方案中，多肽1序列包括AAT蛋白的一部分。在一些实施方案中，多肽1序列至少包括AAT蛋白的反应部位环部分。在一些实施方案中，AAT蛋白的反应部位环部分至少包括氨基酸序列：GTEAAGAMFLEAIPMSIPPEVKFNK(SEQIDNO:1)。在一个优选的实施方案中，AAT多肽序列或来源于AAT的氨基酸序列是或来源于人AAT多肽序列。在一些实施方案中，融合蛋白包括具有下列氨基酸序列的全长人AAT多肽序列：在一些实施方案中，融合蛋白包括与SEQIDNO:2的氨基酸序列有至少50%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的人AAT多肽序列。在一些实施方案中，AAT多肽序列是以下GenBank登录号所示的一个或多个人AAT多肽序列，或者来源于AAT多肽的氨基酸序列源自于以下GenBank登录号所示的一个或多个人AAT多肽序列：AAB59495.1、CAJ15161.1、P01009.3、AAB59375.1、AAA51546.1、CAA25838.1、NP_001002235.1、CAA34982.1、NP_001002236.1、NP_000286.3、NP_001121179.1、NP_001121178.1、NP_001121177.1、NP_001121176.16、NP_001121175.1、NP_001121174.1、NP_001121172.本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的融合蛋白，其包含与第二多肽有效连接的至少一个人丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽，其中所述第二多肽包含以下的至少一种：/n免疫球蛋白Fc多肽或来源于免疫球蛋白Fc多肽的氨基酸序列；/n细胞因子靶向多肽或来源于细胞因子靶向多肽的序列；/n含有WAP结构域的多肽或来源于含有WAP结构域的多肽的序列；或/n白蛋白多肽或来源于血清白蛋白多肽的氨基酸序列。/n

【技术特征摘要】
20110628 US 61/502055;20111214 US 61/570394;2011121.一种分离的融合蛋白，其包含与第二多肽有效连接的至少一个人丝氨酸蛋白酶抑制蛋白多肽，其中所述第二多肽包含以下的至少一种：
免疫球蛋白Fc多肽或来源于免疫球蛋白Fc多肽的氨基酸序列；
细胞因子靶向多肽或来源于细胞因子靶向多肽的序列；
含有WAP结构域的多肽或来源于含有WAP结构域的多肽的序列；或
白蛋白多肽或来源于血清白蛋白多肽的氨基酸序列。


2.一种分离的融合蛋白，其包含与以下的至少一种的第二多肽有效连接的至少一个α-1抗胰蛋白酶(AAT)多肽：
免疫球蛋白Fc多肽；
细胞因子靶向肽；
人分泌白细胞蛋白酶抑制剂(SLPI)多肽；和
免疫球蛋白Fc多肽和人SLPI多肽，其中SLPI多肽包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：BP埃克尔曼，JC蒂默，PL恩盖，GB京瑟，Q德弗劳瓦，
申请(专利权)人：英伊布里克斯有限合伙公司，
类型：发明
国别省市：美国;US