一种联合检测EGFR基因突变的试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种联合检测人类EGFR基因突变检测试剂盒，本发明专利技术包括的引物和探针包括SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:32；可以对EGFR1基因上T790M、L858R、19del、G719X，S768I和L861Q突变进行检测，可以在一个反应管中同时检测出多种突变；灵敏度较高，可以检测出3‑10拷贝数；高特异性，10ng/ul野生型质粒不会产生非特异性信号；检测快速高效，操作简单，费用低廉。

A kit and method for detecting EGFR gene mutation

【技术实现步骤摘要】
一种联合检测EGFR基因突变的试剂盒及方法本申请主张中国在先申请，申请号201910238686.0申请日：2019年3月27日的优先权。
本专利技术涉及生物技术和医学领域，具体涉及基于荧光探针和聚合酶链式反应(PCR)的EGFR基因突变检测试剂盒及方法。
技术介绍
目前，肺癌已成为全球癌症死亡的首要原因，全球每年新发病例150万，严重威胁人类健康。在肺癌患者中，非小细胞肺癌(NSCLC)约占85％，且就诊时80％已失去手术或放射治疗最佳机会，致使其长期生存率低，疗效令人堪忧。ⅢB/Ⅳ期非小细胞肺癌2年生存率仅10.20％，中位生存时间仅10-12月。因此，人们需要不断研究新的治疗方法以提高肺癌治疗的有效率，其中以分子靶向治疗为代表的新治疗方法，为晚期NSCLC的治疗带来了新的希望和曙光。表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor，EGFR)是目前NSCLC治疗最重要的分子靶点，其是原癌基因C-erbB-1(HER-1)的表达产物，基因定位于第7号染色体短臂(7p12)，全长200Kb，由28个外显子组成。C-ErbB-1的编码产物EGFR为含有12本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种联合检测人类EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于，包括TaqMan探针，PNA探针，阻断剂Blocker，引物对，阳性质控和阴性质控。

【技术特征摘要】
2019.03.27 CN 20191023868601.一种联合检测人类EGFR基因突变检测试剂盒，其特征在于，包括TaqMan探针，PNA探针，阻断剂Blocker，引物对，阳性质控和阴性质控。2.如权利要求1所述的TaqMan探针，其特征在于，其探针序列为SEQIDNO:3、SEQIDNO:6、SEQIDNO:9、SEQIDNO:14、SEQIDNO:17、SEQIDNO:20的至少15个连续核苷酸。探针5’端被荧光报告基团FAM和VIC等修饰，3’端被荧光淬灭基团MGB，BHQ1等修饰。3.如权利要求1所述的PNA探针，其特征在于，其探针序列为SEQIDNO:10的至少15个连续核苷酸，探针无任何修饰，与包含突变位点野生型EGFR序列完全互补配对。4.如权利要求1所述的21外显子阻断剂Blocker，其特征在于，其序列为SEQIDNO:11的至少15个连续核苷酸。5.如权利要求1所述的引物对具体包括：(1)针对20号外显子T790M替代突变的引物对序列分别包括SEQIDNO:1和SEQIDNO:2的至少连续15个核苷酸；(2)针对21号外显子L858R替代突变的引物对序列分别包括SEQIDNO:4和SEQIDNO:5的至少连续15个核苷酸；(3)针对19号外显子缺失的引物对序列分别包括SEQIDNO:7和SEQIDNO:8的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭兴中，
申请(专利权)人：杭州丹威生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33