数字定量PCR的核酸样品测量方法技术

本发明专利技术提供一种数字定量PCR(digital and quantitative PCR，dqPCR)的核酸样品测量方法，包括以下步骤。提供具有多个反应孔的测试载具，以对核酸样品进行数字定量PCR。特别是针对具有多个浓度范围差异较广的核酸标靶的待测核酸样品，可以同时以数字PCR及定量PCR测量，以定量核酸标靶的拷贝数。

The measurement of nucleic acid samples by digital quantitative PCR

【技术实现步骤摘要】
数字定量PCR的核酸样品测量方法
本专利技术涉及一种数字定量PCR的核酸样品测量方法，尤其涉及一种适于具有多个浓度范围差异较广的核酸标靶的待测核酸样品的测量方法。
技术介绍
现有数字PCR(digitalPCR)的优点是实验检测时不需要做检量线，即可直接测得样品浓度，但在实际应用上存在使用不便的缺点，原因在于，数字PCR主要利用卜瓦松分布(PoissonDistribution)来估算样品浓度，样品不可过浓而使全部的检测反应孔(well)都有阳性反应。亦即，若欲顺利通过数字PCR测量样品浓度，则必须使样品浓度低至某一程度，不可让全部的检测反应孔都分配到样品。如此一来，当面对未知浓度的样品时，需要先利用其他方式初步定量及稀释，使样品浓度落入数字PCR适用的浓度区间，才能够顺利的通过数字PCR测量样品浓度，因此，检测动态范围(dynamicrange)以及操作方便性皆会受限。一般而言，待测的核酸样品中，核酸标靶可能具有相距甚广的浓度范围，此现象在临床样品中尤其常见，其中若同时存在浓度较高及浓度较低的核酸标靶且以数字PCR测量时，则需针对核酸样品进行稀释，使浓度较高的核酸标靶落入数字PCR本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸样品测量方法，同时进行数字PCR及定量PCR，以一次性检测具高浓度核酸标靶及低浓度核酸标靶的核酸样品，所述高浓度核酸标靶在所述核酸样品中的拷贝数为大于10000，所述低浓度核酸标靶在所述核酸样品中的拷贝数为10000以下。

【技术特征摘要】
2018.04.12 US 62/656,9681.一种核酸样品测量方法，同时进行数字PCR及定量PCR，以一次性检测具高浓度核酸标靶及低浓度核酸标靶的核酸样品，所述高浓度核酸标靶在所述核酸样品中的拷贝数为大于10000，所述低浓度核酸标靶在所述核酸样品中的拷贝数为10000以下。2.根据权利要求1所述的核酸样品测量方法，包括：提供具有多个反应孔的测试载具，以对所述核酸样品进行数字定量PCR；以及所述低浓度核酸标靶以数字PCR直接定量拷贝数，所述高浓度核酸标靶以qPCR检测其Cq值后，进行调整步骤，以得到所述高浓度核酸标靶在所述核酸样品中的拷贝数。3.根据权利要求2所述的核酸样品测量方法，其中通过qPCR反应曲线得到PCR效率，再进行所述调整步骤，所述调整步骤包括：将PCR效率加上1，作为底数；将所述低浓度核酸标靶的Cq值减去所述高浓度核酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：味正唯，黄章维，
申请(专利权)人：奎克生技光电股份有限公司，
类型：发明
国别省市：中国台湾,71