“一管法”乙肝病毒核酸提取与扩增-荧光PCR定量技术制造技术

本发明专利技术采用申请人发明专利技术的微量核酸释放剂，实现在同一管中直接进行乙肝病毒核酸提取和荧光扩增，从根本上解决了多步骤核酸提取法带来的核酸丢失和污染问题，并首次适用于全血标本的荧光ＰＣＲ检测；采用已定量的原病毒血清作为定量标准品，实现标准品对标本的全程监控；采用双对正反向引物和正反向两条荧光修饰的探针进行荧光ＰＣＲ扩增，进一步提升其敏感性和扩增效率；引入蓝色的促荧光剂，使配制后的ＰＣＲ工作液呈浅蓝色，在不影响荧光检测的同时，具有稳定荧光信号、增强扩增效率等作用；设定两段温度梯度程序，采用后段荧光采集法，方便分析并提高仪器的使用寿命；以上技术较传统方法具有革命性创新。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
采用带有指示和变色功能的“微量核酸释放剂”，实现在同一管内直接进行核酸提取与荧光ＰＣＲ扩增：微量血清与蓝色微量核酸释放剂在荧光ＰＣＲ内混匀，蓝色微量核酸释放剂即变成无色，覆盖灭菌液体石蜡油经“８５℃，３０ｓ→９９℃，７ｍｉｎ→５℃，３０ｓ”温处理后，直接加入荧光ＰＣＲ工作液，即可进行荧光ＰＣＲ扩增和分析结果。操作简捷、快速、无污染。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：
申请(专利权)人：王海滨，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]