一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用，属于生物技术和基因治疗技术领域。本发明专利技术经实验发现：SENP1蛋白能促进心肌细胞的增殖和迁移，抑制铁死亡诱导剂erastin诱导的心肌细胞死亡、ROS聚集及形态学改变，促进HIF‑1α和ACSL4在mRNA和蛋白质水平的表达，促进VEGF的表达。SENP1蛋白具有调控心肌细胞铁死亡的作用，对于多种病因引起的心肌细胞铁死亡的保护具有重要意义。

Application of a SENP1 Gene and/or SENP1 Protein in the Preparation of Drugs for Cardiovascular Diseases

The invention provides an application of SENP1 gene and/or SENP1 protein in the preparation of drugs for treating cardiovascular diseases, belonging to the field of biotechnology and gene therapy technology. It is found that SENP1 protein can promote the proliferation and migration of cardiac myocytes, inhibit iron death inducer erastin-induced cardiac myocyte death, ROS aggregation and morphological changes, promote the expression of HIF_1a and ACSL4 at the level of mRNA and protein, and promote the expression of vascular endothelial growth factor. SENP1 protein can regulate iron death of cardiac myocytes, which is of great significance for the protection of iron death of cardiac myocytes caused by various causes.

【技术实现步骤摘要】
一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用
本专利技术属于生物技术和基因治疗
，具体涉及一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。
技术介绍
各种心血管疾病均可导致机体发生缺氧，低氧可进一步影响心肌细胞的增殖、分化和死亡，在心肌细胞中产生很多严重的负作用并导致细胞进行性丢失进而加重心血管疾病最终引起心力衰竭。心肌细胞的死亡可导致心肌细胞丢失，是导致各种心血管疾病的重要病理学特征。心肌细胞的死亡方式包括细胞凋亡、坏死和自噬等不同形式，它们共同调控程序性细胞死亡，不仅在心脏的稳态中起关键作用，而且在心血管疾病的发病机制中也发挥重要作用。在非致死性应激或损伤的条件下，程序性心肌细胞死亡是影响心脏细胞命运和病理变化的主要因素。其中坏死被认为是在严重的心肌损伤和应激反应中发生的偶然的、未调节的、不可逆的过程，表现为细胞肿胀、细胞膜和细胞器破坏、细胞裂解。程序性坏死在肿瘤、神经退行性疾病、病原体感染和心脏病在内的多种细胞死亡和炎性疾病中发挥重要作用。目前，已报道的程序性坏死主要包括坏死性凋亡、焦亡、MPT-依赖性坏死、铁死亡、PARP-1依赖性细胞死亡和NETosis等。其中铁死亡是一种铁依赖的、氧化反应驱动的新的程序性坏死，不同于凋亡、自噬等其他形式的细胞死亡。铁死亡可发生在缺血的心肌细胞中导致心肌细胞丢失，并被证实与急性心肌梗死、缺血再灌注损伤、心力衰竭等心血管疾病密切相关。类泛素(SmallUbiquitin-likeModifier，SUMO)化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后的修饰过程，参与调控多种生物学过程。类泛素特异性蛋白酶1(SUMO-specificcysteineproteases，SENP1)是一种主要的去SUMO化酶，可以将SUMO蛋白从其靶蛋白上去除。研究证实SENP1可增加低氧诱导因子1α(hypoxia-induciblefactor1alpha，HIF-1α)的转录活性和稳定性，在低氧应答反应中扮演关键的角色，同时SENP1/HIF-1α反馈还被证实在低氧诱导的肿瘤细胞增殖、侵袭、上皮间质转化中具有调节作用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种SENP1基因和/或SENP1蛋白的新用途，探索缺血性心脏病治疗的新靶点。本专利技术提供了一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本专利技术还提供了包括所述SENP1基因的病毒载体、质粒、重组细胞或组合物在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本专利技术还提供了包括所述SENP1蛋白的重组细胞和/或组合物在制备治疗心血管疾病药物中的应用。优选的，所述心血管疾病包括急性心肌梗死、心肌缺血再灌注损伤和心力衰竭中的一种或者多种。有益效果：本专利技术提供了一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。本专利技术通过研究SENP1对心肌细胞增殖和迁移的影响以及对铁死亡诱导剂erastin诱导的心肌细胞铁死亡的调控作用，最终发现：SENP1能促进心肌细胞增殖和迁移，部分抑制erastin导致的心肌细胞死亡、形态变化和ROS聚集，促进HIF-1α、ACSL4和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)的表达；干涉HIF-1α可下调SENP1的表达。SENP1抑制erastin诱导的心肌细胞发生铁死亡的过程可能是通过SENP1调控HIF-1α、ACSL4的去SUMO化修饰来实现的。附图说明图1为本专利技术实施例2所述SENP1对H9c2细胞增殖的影响结果图。其中，Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图2为本专利技术实施例2所述SENP1对H9c2细胞迁移的影响(划痕实验)结果图。其中，图2-A为代表性图；图2-B为统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图3为本专利技术实施例2所述SENP1对H9c2细胞迁移的影响(迁移小室实验)结果图。其中，图3-A为代表性图；图3-B为统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图4为本专利技术实施例3所述SENP1对erastin诱导H9c2细胞铁死亡的影响结果图。其中，Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图5为本专利技术实施例3所述SENP1对erastin诱导H9c2细胞脂质ROS聚集的影响结果图。其中，图5-A为代表性流式图；图5-B为统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图6为本专利技术实施例3所述SENP1对erastin诱导H9c2细胞铁死亡形态的影响结果图。其中，Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图7为本专利技术实施例3所述SENP1对给予erastin后H9c2细胞铁死亡相关蛋白ACSL4表达的影响结果图。其中，图7-A为免疫印迹图；图7-B为统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞；DMSO为加入DMSO处理的心肌细胞；erastin为加入铁死亡诱导剂erastin处理的心肌细胞。图8为本专利技术实施例4所述SENP1对H9c2细胞HIF-1表达的影响结果图。其中，图8-A为利用实时定量PCR法进行mRNA水平的表达检测；图8-B为利用免疫印迹法进行蛋白水平的检测；图8-C为蛋白水平表达的统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图9为本专利技术实施例4所述SENP1对H9c2细胞ACSL4表达的影响结果图。其中，图9-A为利用实时定量PCR法进行mRNA水平的表达检测；图9-B为利用免疫印迹法进行蛋白水平的检测；图9-C为蛋白水平表达的统计图。Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图10为本专利技术实施例4所述SENP1对H9c2细胞VEGF表达的影响结果图。其中，Ad5/F11p.Null代表Ad5/F11p.Null感染的心肌细胞；Ad5/F11p.SENP1代表Ad5/F11p.SENP1感染的心肌细胞。图11为本专利技术实施例4所述SENP1对HIF-1α和ACSL4的SUMO化修饰结果图。其中，图11-A为利用免疫共沉淀法(IP)和免疫印迹法验证SENP1和HIF-1α的相互作本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.一种SENP1基因和/或SENP1蛋白在制备治疗心血管疾病药物中的应用。2.包括权利要求1所述SENP1基因的病毒载体、质粒、重组细胞或组合物在制备治疗心血管疾病药物中的应用。3.包括权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王华，王立生，白玉婷，格日力，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，青海大学，
类型：发明
国别省市：北京,11