位点特异性HER2抗体药物缀合物制造技术

本发明专利技术提供了位点特异性HER2抗体药物缀合物以及其制备方法和其应用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】位点特异性HER2抗体药物缀合物
本专利技术系关于位点特异性HER2抗体药物缀合物。本专利技术另关于将该抗体药物缀合物用于治疗癌之方法。先前技术跨膜受体酪氨酸激酶ErbB家族成员为细胞生长、细胞分化、细胞迁移、与细胞凋亡的重要介质。该受体家族包括四个不同成员，其包括表皮生长因子受体(EGFR或ErbB1)、HER2(ErbB2或p185)、HER3(ErbB3)及HER4(ErbB4或tyro2)。HER2起初被认定是来自经化学治疗的大鼠之神经胚细胞瘤的转型基因产物。HER2过度表达被证实在体外(DiFioreetal.,1987,Science237(4811):178-82；Hudziaketal.,1987,PNAS84(20):7159-63；Chazinetal.,1992,Oncogene7(9):1859-66)及在动物模型中(Guyetal.,1992,PNAS89(22):10578-82)都是致瘤的。引起受体过度表达之编码HER2的基因扩增出现于乳癌与卵巢癌且与预后不良有关联(Slamonetal.,1987,Science235(4785):177-82；Slamonetal.,1989,Science244:707-12；Anbazhaganetal.,1991,AnnalsOncology2(1):47-53；Andrulisetal.,1998,JClinicalOncology16(4):1340-9)。HER2过度表达(通常但不一定是由于基因扩增)也在其它癌型观测到，该其它癌型包括胃癌、子宫内膜癌、非小细胞肺癌、结肠癌、胰腺癌、膀胱癌、肾癌、前列腺癌及子宫颈癌(Scholletal.,2001,AnnalsOncology12(Suppl.1):S81-7；Menardetal.,2001,AnnOncol12(Suppl.1):S15-9；Martinetal.,2014,FutureOncology10:1469-86)。(曲妥单抗(trastuzumab))为结合至HER2的胞外功能域之人源化单克隆抗体(Carteretal.1992,PNAS89:4285-9及美国专利第5,821,337号)。用于治疗肿瘤过度表达HER2蛋白质的转移性乳癌患者在1998年9月25日得到食品药物管理局的上市许可。尽管是治疗接受过大规模先前抗癌疗法之HER2过度表达性乳癌患者的一个突破性进展，然而有部分患者对治疗没反应、反应很小或变成有抗性。(曲妥单抗-DM1或T-DM1)为由通过稳定的硫醚连接子MCC(4-[N-顺丁烯二酰亚胺甲基]环己烷-1-羧酸酯)缀合至类美登素药剂(maytansinoidagent)DM1之曲妥单抗组成的抗体药物缀合物(Lewisetal.,2008,CancerRes.68:9280-90；Kropetal.,2010,JClinOncol.28:2698-2704；美国专利第8,337,856号)。用于治疗先前经与紫杉烷药剂治疗过且变成难治之患者中HER2阳性转移性乳癌在2013年2月22日得到食品药物管理局的上市许可。类似长期疗法对一部分HER2过度表达性乳癌患者并没成功。因此，临床上很需要针对对与/或治疗没反应、反应很小或变成有抗性的患HER2过度表达性肿瘤或其它与HER2过度表达有关连之疾病的患者发展另外的HER2导向癌疗法。
技术实现思路
本专利技术提供位点特异性HER2抗体药物缀合物及其在治疗HER2过度表达性癌的用途。ADC使疗法能靶向递输给癌细胞且能提供更具选择性之疗法而减少已知的脱靶效应造成的毒性。本专利技术之位点特异性HER2ADC一般如式Ab-(L-D)所示，其中Ab为结合至HER2的抗体或其抗原结合片段；及L-D是连接子-药物部分，其中L是连接子，及D是药物。本专利技术之ADC的抗体(Ab)可为任何HER2结合抗体。在本专利技术之某些实施方式中，该Ab结合至和曲妥单抗相同的HER2上的表位。在本专利技术之其它实施方式中，该Ab具有和曲妥单抗相同的重链与轻链CDR。在本专利技术之具体实施方式中，该Ab具有和曲妥单抗相同的重链可变区(VH)与轻链可变区(VL)。本专利技术之HER2ADC以位点特异方式缀合至药物。为了符合此类型的缀合，必须将抗体衍生化以提供工程化在一或多个特异位点的反应性半胱氨酸残基或酰基供体谷氨酰胺残基(工程化在一或多个特异位点或附接肽标签)。该修饰应是在不瓦解抗体之抗原结合力的位点上。在较佳实施方式中，在抗体之重链恒定区与/或轻链恒定区进行一或多个修饰。在本专利技术之某些实施方式中，位点特异性HER2ADC可以使用包含曲妥单抗的重链可变区CDR与轻链可变区CDR及表1中揭示之重链恒定区与轻链恒定区的任何组合之抗体，条件是当该重链恒定区是SEQIDNo:5时，则该轻链恒定区不是SEQIDNo:11。在这样的实施方式中，该重链恒定区可选自SEQIDNo:17、5、13、21、23、25、27、29、31、33、35、37或39中任一者，而该轻链恒定区可选自SEQIDNo:41、11或43中任一者，条件是该组合不是SEQIDNo:5与SEQIDNo:11。在一个具体实施方式中，被用来构成该位点特异性HER2ADC之抗体包含附接至SEQIDNo:17的重链恒定区及SEQIDNo:41的轻链恒定区之具有SEQIDNo:2至4的CDR之VH区及具有SEQIDNo:8至10的CDR之VL区。在另一个具体实施方式中，被用来构成该位点特异性HER2ADC的抗体包含附接至SEQIDNo:13的重链恒定区及SEQIDNo:43的轻链恒定区之具有SEQIDNo:2至4的CDR之VH区及具有SEQIDNo:8至10的CDR之VL区。在其它具体实施方式中，本专利技术之ADC可以使用包含表1中揭示之重链与轻链的任何组合之抗体，条件是若该重链是SEQIDNo:6，则该轻链恒定区不是SEQIDNo:12。在这样的实施方式中，该重链可选自SEQIDNo:18、6、14、22、24、26、28、30、32、34、36、38或40中任一者，而该轻链可选自SEQIDNo:42、12或44中任一者，条件是该组合不是SEQIDNo:6与SEQIDNo:12。在一个具体实施方式中，本专利技术之ADC可以使用包含SEQIDNo:18的重链与SEQIDNo:42的轻链。在另一个具体实施方式中，本专利技术之ADC可以使用包含SEQIDNo:14的重链与SEQIDNo:44的轻链。本专利技术中所揭示之位点特异性HER2ADC中任一者可以用可用于治疗癌的治疗剂－药物(D)制得。在一个具体实施方式中，该治疗剂是抗有丝分裂剂。在另一个具体实施方式中，本专利技术之ADC中的抗有丝分裂剂药物成分是耳抑素(auristatin)(例如0101、8261、6121、8254、6780与0131)。在一个更具体实施方式中，本专利技术之ADC中的耳抑素药物成分是2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-{[(1S)-2-苯基-1-(1,3-噻唑-2-基)乙基]氨基}丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺(va本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种如下式的抗体药物缀合物：Ab‑(L‑D)，其中：(a)Ab是结合至HER2的抗体及包含(1)重链可变区，其包括含SEQ ID No:2、3和4的三个CDR；(2)SEQ ID No:17、5、13、21、23、25、27、29、31、33、35、37或39中任一者的重链恒定区；(3)轻链可变区，其包括含SEQ ID No:8、9和10的三个CDR；(4)SEQ ID No:41、11或43中任一者的轻链恒定区；及(b)L‑D是连接子‑药物部分，其中L是连接子，及D是药物，条件是当所述重链恒定区是SEQ ID No:5时，所述轻链恒定区不是SEQ ID No:11。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.30 US 62/260,854;2016.02.01 US 62/289,744;1.一种如下式的抗体药物缀合物：Ab-(L-D)，其中：(a)Ab是结合至HER2的抗体及包含(1)重链可变区，其包括含SEQIDNo:2、3和4的三个CDR；(2)SEQIDNo:17、5、13、21、23、25、27、29、31、33、35、37或39中任一者的重链恒定区；(3)轻链可变区，其包括含SEQIDNo:8、9和10的三个CDR；(4)SEQIDNo:41、11或43中任一者的轻链恒定区；及(b)L-D是连接子-药物部分，其中L是连接子，及D是药物，条件是当所述重链恒定区是SEQIDNo:5时，所述轻链恒定区不是SEQIDNo:11。2.如权利要求第1项的抗体药物缀合物，其中(a)所述重链恒定区是SEQIDNo:17及所述轻链恒定区是SEQIDNo:41；(b)所述重链恒定区是SEQIDNo:5及所述轻链恒定区是SEQIDNo:41；(c)所述重链恒定区是SEQIDNo:17及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(d)所述重链恒定区是SEQIDNo:21及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(e)所述重链恒定区是SEQIDNo:23及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(f)所述重链恒定区是SEQIDNo:25及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(g)所述重链恒定区是SEQIDNo:27及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(h)所述重链恒定区是SEQIDNo:23及所述轻链恒定区是SEQIDNo:41；(i)所述重链恒定区是SEQIDNo:25及所述轻链恒定区是SEQIDNo:41；(j)所述重链恒定区是SEQIDNo:27及所述轻链恒定区是SEQIDNo:41；(k)所述重链恒定区是SEQIDNo:29及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(l)所述重链恒定区是SEQIDNo:31及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(m)所述重链恒定区是SEQIDNo:33及所述轻链恒定区是SEQIDNo:43；(n)所述重链恒定区是SEQIDNo:35及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(o)所述重链恒定区是SEQIDNo:37及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；(p)所述重链恒定区是SEQIDNo:39及所述轻链恒定区是SEQIDNo:11；或(q)所述重链恒定区是SEQIDNo:13及所述轻链恒定区是SEQIDNo:43。3.如权利要求第1项的抗体药物缀合物，其中(a)所述重链包含SEQIDNo:18、6、14、22、24、26、28、30、32、34、36、38或40中任一者；及(b)所述轻链包含SEQIDNo:42、12或44中任一者，条件是当所述重链是SEQIDNo:6时，所述轻链不是SEQIDNo:12。4.如权利要求第3项的抗体药物缀合物，其中(a)所述重链是SEQIDNo:18及所述轻链是SEQIDNo:42；(b)所述重链是SEQIDNo:6及所述轻链是SEQIDNo:42；(c)所述重链是SEQIDNo:18及所述轻链是SEQIDNo:12；(d)所述重链是SEQIDNo:22及所述轻链是SEQIDNo:12；(e)所述重链是SEQIDNo:24及所述轻链是SEQIDNo:12；(f)所述重链是SEQIDNo:26及所述轻链是SEQIDNo:12；(g)所述重链是SEQIDNo:28及所述轻链是SEQIDNo:12；(h)所述重链是SEQIDNo:24及所述轻链是SEQIDNo:42；(i)所述重链是SEQIDNo:26及所述轻链是SEQIDNo:42；(j)所述重链是SEQIDNo:28及所述轻链是SEQIDNo:42；(k)所述重链是SEQIDNo:30及所述轻链是SEQIDNo:12；(l)所述重链是SEQIDNo:32及所述轻链是SEQIDNo:12；(m)所述重链是SEQIDNo:34及所述轻链是SEQIDNo:44；(n)所述重链是SEQIDNo:36及所述轻链是SEQIDNo:12；(o)所述重链是SEQIDNo:38及所述轻链是SEQIDNo:12；(p)所述重链是SEQIDNo:40及所述轻链是SEQIDNo:12；或(q)所述重链是SEQIDNo:14及所述轻链是SEQIDNo:44。5.如权利要求第1至4项中任一项的抗体药物缀合物，其中所述连接子系选自由下列所组成的群组：vc、AcLysvc、mc、MalPeg6、m(H20)c及m(H20)cvc。6.如权利要求第5项的抗体药物缀合物，其中所述连接子是可切割的。7.如权利要求第6项的抗体药物缀合物，其中所述连接子是vc或AcLysvc。8.如权利要求第1至7项中任一项的抗体药物缀合物，其中所述药物是可透膜的。9.如权利要求第1至8项中任一项的抗体药物缀合物，其中所述药物是耳抑素。10.如权利要求第1至9项中任一项的抗体药物缀合物，其中所述耳抑素选自由下列所组成的群组：2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-{[(1S)-2-苯基-1-(1,3-噻唑-2-基)乙基]氨基}丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯基乙基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；2-甲基-L-脯氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-3-{[(2S)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基]氨基}-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺，三氟乙酸盐；2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-3-{[(2S)-1-甲氧基-1-氧代-3-苯基丙-2-基]氨基}-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-羟基-1-苯基丙-2-基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；2-甲基-L-脯氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯基乙基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺，三氟乙酸盐；N-甲基-L-缬氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-{[(1S)-2-苯基-1-(1,3-噻唑-2-基)乙基]氨基}丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；N-甲基-L-缬氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S,2R)-1-羟基-1-苯基丙-2-基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺；及N-甲基-L-缬氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-3-{[(1S)-1-羧基-2-苯基乙基]氨基}-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基]吡咯烷-1-基}-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。11.如权利要求第10项的抗体药物缀合物，其中所述耳抑素是2-甲基丙氨酰基-N-[(3R,4S,5S)-3-甲氧基-1-{(2S)-2-[(1R,2R)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-{[(1S)-2-苯基-1-(1,3-噻唑-2-基)乙基]氨基}丙基]吡咯烷-1-基}-5-甲基-1-氧代庚-4-基]-N-甲基-L-缬氨酰胺或其药学上可接受的盐或溶剂化物。12.一种如下式的抗体药物缀合物：Ab-(L-D)，其中：(a)Ab是结合至HER2...

【专利技术属性】
技术研发人员：D·马，F·小洛甘佐，K·A·马凯特，E·I·格拉西亚尼，P·萨普拉，P·施特罗普，
申请(专利权)人：辉瑞公司，
类型：发明
国别省市：美国,US