HER2/neu‑特异性抗体和其使用方法技术

本发明专利技术涉及特异性结合HER2/neu的抗体，并且尤其是HER2/neu的嵌合4D5抗体，所述4D5抗体与已知的4D5抗体相比具有减少的糖基化。本发明专利技术还涉及4D5抗体和包含它们的组合物用于下列疾病的诊断、预后和治疗的方法：例如，癌症、自身免疫疾病、炎性病患和传染病。

HER2/neu specific antibodies and methods of use thereof

The present invention relates to antibodies that specifically bind to HER2/neu, and, in particular, chimeric 4D5 antibodies of 4D5, which have reduced glycosylation compared to known 4D5 antibodies, HER2/neu. The present invention also relates to 4D5 antibodies and compositions comprising them for the diagnosis, prognosis and treatment of the following diseases: for example, cancer, autoimmune diseases, inflammatory diseases and infectious diseases.

【技术实现步骤摘要】
本申请是PCT申请号为PCT/US2009/038201，专利技术名称为“HER2/neu-特异性抗体和其使用方法”的PCT申请进入中国国家阶段后申请号为200980119403.5的中国国家阶段申请的分案申请。相关申请的交叉引用本申请要求2008年4月2日提交的美国专利申请系列第61/041,649号(待决)的优先权，通过引用将其整体并入本文。序列表的引用：根据37C.F.R.1.821以及其下列，本申请包含一个或多个序列表，它们已在纸件和计算机可读介质中公开，并且所述纸件和计算机可读公开内容通过引用整体并入本文。专利技术背景专利
本申请涉及特异性结合HER2/neu的新颖4D5抗体，尤其是HER2/neu的新颖嵌合4D5抗体，所述新颖4D5抗体与已知的4D5抗体相比具有减少的糖基化和改变的效应子功能。本专利技术还涉及抗体和包含它们的组合物用于下列疾病的诊断、预后和治疗的方法：例如，癌症、自身免疫疾病、炎性疾患和传染病。相关技术说明HER2/neu和HER2/neu受体细胞生长和分化过程涉及生长因子，生长因子通过特异性受体如酪氨酸激酶发挥它们的作用。配体与酪氨酸激酶受体的结合触发最终导致细胞增殖和分化的事件级联。(Carpenter等人(1979)Biochem.48:193-216；Sachs等人(1987)CancerRes.47:1981-8196)。酪氨酸激酶受体根据它们的序列相似性和不同特征可以分为几组。一种这类家族是ErbB或表皮生长因子受体家族，该家族包括多种受体，它们称为HER-1(也称为erbB-1或EGFR)、HER-2或HER2/neu(也称为erbB-2、c-neu或p185)、HER-3(也称为erbB-3)和HER-4(也称为erbB-4)。(参见，例如，Carpenter等人,如上；Semba等人(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)82:6497-6501；Coussens等人(1985)Science,230:1130-1139,Bargmann等人(1986)Cell45:649-657；Kraus等人(1989)PNAS86:9193-9197；Carraway等人(1994)J.Biol.Chem.269:14303-14306；和Plowman等人(1993)Nature366:473-475；Tzahar等人(1994)Biol.Chem.269:25226-25233)。在正常发育过程和人肿瘤发生二者中ErbB受体在传播调节细胞增殖、分化、迁移和凋亡的信号中起重要作用。(Slamon等人(1989)Science244:707-712)。例如，erbB受体的激活偶联并刺激下游MAPK-Erk1/2和磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT生长和存活途径。在癌症中这些途径的失调与疾病进展和治疗不应性相联系。(Fukazawa等人(1996)J.Biol.Chem.271:14554-14559；Tzahar等人(1996)Mol.Cell.Biol.16:5276-5287；Lange等人(1998)J.Biol.Chem.273:31308-31316；Olayioye等人(1998)Mol.Cell.Biol.18:5042-5051；Hackel等人(1999)Curr.Opin.CellBiol.11:184-189)。PI3K/AKT的激活促进细胞存活和肿瘤侵袭性增强，并且据报道在过表达HER2/neu的乳癌中AKT2被激活并过表达。(Shak(1999)Semin.Oncol.Suppl12:71-77；Huang等人(2000)ClinicalCancerRes.7:2166-2174；Bacus等人(2002)Oncogene21:3532-3540)。受体ErbB家族的信号传导由配体结合启动，配体结合触发同源或异源受体二聚化、胞质尾部的相互酪氨酸磷酸化和胞内信号转导途径的激活。(Citri等人(2003)Exp.CellRes.284:54)。结合并激活ErbB受体的配体的有效性是由多种金属蛋白酶介导的，如催化特异性蛋白的细胞表面胞外域脱落的ADAM(解联蛋白和金属蛋白酶)家族的锌依赖性金属蛋白酶。(参见Chang和Werb(2001)TrendsinCellBiology11:537-543；Moss和Lambert(2002)EssaysinBiochemistry38:141-153；Seals和Courtneidge(2003)GenesandDevelopment17:7-30)。具体地，据显示ADAM家族切割负责激活ErbB受体的配体，例如APP和Notch。(Blobel(2005)Nat.Rev.Mol.Cell.Biol.6:32-43)。ErbB家族的一个重要成员HER2/neu是185kDa的受体蛋白，它最初是作为来自化学处理的大鼠的神经母细胞瘤的转化基因的产物鉴定的。HER2/neu由于其在几种人的癌中和在哺乳动物发育中的作用而被广泛地研究。(Hynes和Stern(1994)Biochim.etBiophys.Acta1198:165-184；和Dougall等人(1994)Oncogene9:2109-2123；Lee等人(1995)Nature378:394-398)。人HER2/neu基因和HER2/neu蛋白描述于Semba等人(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)82:6497-6501和Yamamoto等人(1986)Nature319:230-234中并且其序列可以在GenBank中以登录号X03363获得。HER2/neu包含四个结构域：配体结合的胞外结构域；亲脂的跨膜结构域；保守的胞内酪氨酸激酶结构域；和羧基端信号传导结构域，该结构域具有可以被磷酸化的几个酪氨酸残基。(Plowman等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)90:1746-1750)。HER2/neu胞外(ECD)结构域的序列由Franklin等人(2004)CancerCell.5(4):317-328描述，并且可以在蛋白数据库记录(ProteinDataBankRecord)1S78(2004)中获得。HER2/neu充当生长因子受体并且通常由诸如乳癌、卵巢癌和肺癌等肿瘤表达。HER2/neu在25-30％的人乳癌和卵巢癌中过表达，并且与这些患者中的侵袭性临床进展或弱的预后相关。(Slamon等人(1987)Science235；177-182；Slamon等人(1989)Science244:707-712)。已在其他癌中观察到HER2/neu的过表达，所述其他癌症包括：胃癌、子宫内膜癌、唾液腺癌、肺癌、肾癌、结肠癌、甲状腺癌、胰腺癌和膀胱癌。(参见，例如King等人(1985)Science229:974；McCann等人(1990)Cancer65:88-92；Yonemura等人(1991)CancerResearch51:1034)。HER2/neu的激活与在乳癌患者中对激素治疗的临本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种免疫球蛋白，所述免疫球蛋白包含：(A)包含嵌合4D5免疫球蛋白轻链可变结构域的多肽，所述链可变结构域包含SEQ ID NO:4的氨基酸序列；和(B)包含变异的4D5免疫球蛋白重链的多肽，所述重链包含SEQ ID NO:11的氨基酸序列；其中所述轻链可变结构域和所述重链的可变结构域形成免疫特异性结合至HER2/neu的表位的表位结合位点。

【技术特征摘要】
2008.04.02 US 61/041,6491.一种免疫球蛋白，所述免疫球蛋白包含：(A)包含嵌合4D5免疫球蛋白轻链可变结构域的多肽，所述链可变结构域包含SEQIDNO:4的氨基酸序列；和(B)包含变异的4D5免疫球蛋白重链的多肽，所述重链包含SEQIDNO:11的氨基酸序列；其中所述轻链可变结构域和所述重链的可变结构域形成免疫特异性结合至HER2/neu的表位的表位结合位点。2.如权利要求1所述的免疫球蛋白，其中包含所述轻链可变结构域的所述多肽具有SEQIDNO:2的氨基酸序列。3.如权利要求1所述的免疫球蛋白，其中所述重链包含变异的Fc结构域，所述变异的Fc结构域与野生型Fc结构域相比表现出：(A)增强的抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)；(B)与FcγRIIA或与FcγRIIIA增加的结合；(C)与FcγRIIB降低的结合；或(D)与F...

【专利技术属性】
技术研发人员：莱斯利·S·约翰逊，菱·黄，纳丁·泰朗，埃兹奥·泊韦尼，
申请(专利权)人：宏观基因有限公司，
类型：发明
国别省市：美国;US