柑桔黄龙病菌实时荧光PCR检测引物、探针、固相化试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及用于柑桔黄龙病菌检测的寡核苷酸引物、柑桔黄龙病菌实时荧光ＰＣＲ检测探针、固相化试剂盒及其检测方法，它是专门针对柑桔黄龙病亚洲韧皮部杆菌而建立的一种快速检测方法，从制样到检出时间仅需３小时，而且监测灵敏度高、特异性强、稳定可靠。该方法不仅克服了现有的依据症状学的常规诊断方法时有误判、电镜观察法因菌体分布不均容易漏诊、单克隆抗体法因抗体制备难度大，且有非特异反应等不足；而且可以避免常规ＰＣＲ的假阴性和假阳性。固相化试剂盒操作方便，使用简单；检测方法灵敏度高、特异性强、稳定可靠；适合于进出口柑桔鲜果的口岸检疫；柑桔种苗、接穗等无症带菌材料的调运检疫检验以及非疫区柑桔黄龙病的早期预警监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生物技术，具体涉及一种对柑桔黄龙病菌(CandidatusLiberibacter asiaticus)的简单、快速、特异、灵敏的固相化分子检测试剂盒，适合于口岸检疫、农业生产、植物保护等部门使用。
技术介绍
柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing Disease，HLB)是一种毁灭性植物病害，被列入国内外重要检疫性病害。该病主要发生于亚洲，非洲40多个国家，国外主要分布于东南亚、南非、东非、阿拉伯半岛及留尼旺岛、印度洋的毛里求斯、马达加斯和南美等地；2004年4月巴西圣保罗、2005年9月美国佛罗里达相继发现HLB。90年代末期我国生产柑桔的17省、市中，有11个省市受黄龙病侵染。柑桔黄龙病由人工培养的韧皮部杆菌所引起，目前已报道CandidatusLiberibacter asiaticus，Ca.L.africanus和Ca.L.americanus三个暂定种。该病由柑桔木虱(Diaphorina citri)取食新梢以及嫁接带菌接穗在田间传播，随带病(虫)种苗的调运而远距离传播。柑桔发病后轻者影响产量和品质，重者则造成柑桔树的枯死，对于严重本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于柑桔黄龙病菌检测的寡核苷酸引物，包括：　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＧＡＡＧＣＴＧＧＴＧＧＡＧＧＴＧ－３’　　　　５’－ＧＡＣＴＧＣＣＣＡＡＣＧＡＡＡＡ－３’　　（序号：ＮＯ．１）；　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＴＴＴＣＧＴＴＧＧＧＣＡＧＴＣＴ－３’　　　　５’－ＡＴＣＧＧＧＴＡＡＡＧＡＡＧＣＡ－３’　　（序号：ＮＯ．２）；　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＴＧＧＡＧＧＴＧＴＡＡＡＡＧＴＴＧＣＣＡＡＡ－３’　　　　５’－ＡＣＧＡＡＡＡＧＡＴＣＡＧＡＴＡＴＴＣＣＴＣＴＡ－３　　（序号：ＮＯ．３）；　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＧＡＧＧＴＧＴＡＡＡＡＧＴＴＧＣＣＡＡＡ－３’　　　　５’－ＣＧＡ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：殷幼平，王中康，夏玉先，袁青，彭国雄，曾德玉，胡浩，曹月青，
申请(专利权)人：重庆大学，重庆重大生物技术发展有限公司，四川渝高科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]