柑桔溃疡病菌实时荧光PCR检测引物、探针、固相化试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术涉及用于柑桔溃疡病菌检测的寡核苷酸引物、柑桔溃疡病菌实时荧光ＰＣＲ检测探针、固相化试剂盒及其检测方法，它是专门针对柑桔溃疡病而建立的一种快速检测方法，从制样到检出时间仅需３小时，而且检测灵敏度高、特异性强、稳定可靠。该方法不仅克服了现有的依据症状学的常规诊断方法时有误判、电镜观察法因菌体分布不均容易漏诊、单克隆抗体法因抗体制备难度大，且有非特异反应等不足；而且可以避免常规ＰＣＲ的假阴性和假阳性。固相化试剂盒操作方便，使用简单；检测方法灵敏度高、特异性强、稳定可靠；适合于进出口柑桔鲜果的口岸检疫；柑桔种苗、接穗等无症带菌材料的调运检疫检验以及非疫区柑桔黄龙病的早期预警监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重大疫害生物柑桔溃疡病病原细菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri)的实时荧光PCR固相化试剂盒及其检疫检验技术；适合于口岸检疫、农业生产、植物保护等部门使用。属于生物工程

技术介绍
柑桔溃疡病是影响全球柑桔产业发展的重大细菌性病害，也是国内外重点检疫性病害。柑桔溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri)是国内外重要的检疫性有害生物；它为害数十种芸香科植物，包括柑桔属中的绝大多数商品化栽培品种，主要侵害柑桔的地上部分(叶片、枝条、皮刺、树干和果实)，虽然很少会直接杀死树木，但会导致落叶、落果、树势衰弱和果实溃疡性病斑。病害主要通过带菌种苗、接穗、果实等柑桔材料的调运进行远距离传播；田间病害主要靠病菌随风夹雨扩散。带菌衣物、包装箱及采收工具也具一定的传播可能性。据报导，美国科学家已证实，通过车辆等农用运输工具能够传播溃疡病菌，不寻常的暴风雨如热带风暴等也可引起病害的远距离传播。对于柑橘溃疡病菌的检验法有典型症状目测法、组织病理切片法、组织分离培养、致病性测定法等常规检测方法。其优点在于直观、简便易行。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于柑桔溃疡病菌检测的寡核苷酸引物，包括：　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＣＧＧ　　ＣＡＧ　　ＡＴＴ　　ＧＧＡ　　ＡＧＴ　　ＣＡ－３’　　　　５’－ＴＣＣ　　ＡＧＣ　　ＡＣＡ　　ＴＡＣ　　ＧＧＧ　　ＴＣ－３’　　（序列号：ＮＯ．１）；　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＧＴＴ　　ＣＧＧ　　ＣＧＴ　　ＣＡＡ　　ＣＡＡ　　Ｃ－３’　　　　５’－ＣＧＧ　　ＴＡＧ　　ＧＣＧ　　ＡＣＴ　　ＣＡＴ　　ＴＴ－３’　　（序列号：ＮＯ．２）；　　　　寡核苷酸引物对：５’－ＧＡＧ　　ＴＣＧ　　ＣＣＴ　　ＡＣＣ　　　ＧＡＧ　　ＡＡＡ　　ＴＣＣ－３’　　　　５’－ＡＣＣ　　ＡＣＧ　　ＧＣＡ　　ＧＧＧ　　ＴＧＡ　　ＡＧＡ　...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王中康，殷幼平，夏玉先，袁青，彭国雄，曾德玉，赵云，曹月青，
申请(专利权)人：重庆大学，重庆重大生物技术发展有限公司，四川渝高科技有限责任公司，
类型：发明
国别省市：85[中国|重庆]