吡嗪氧化物ＮＦ－１６１６－９０４的制备方法技术

式（Ⅰ）的新吡嗪氧化物ＮＦ－１６１６－９０４，＆其通过水解从梭孢壳属微生物的培养液分离出的中间体化合物ＮＦ－１６１６－９０２制备。吡嗪氧化物ＮＦ－１６１６－９０４具有生物学和药理学活性，它是防治由过氧化物基团（Ｏ＋［－］－［２］）引起的疾病以及肾炎的有效药剂。（*该技术在2008年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种NF-1616-904的吡嗪氧化物。更确切地说，本专利技术涉及一种新型NF-1616-904的吡嗪氧化物，制备所述化合物的方法，和以所述化合物作为有效成分的药物组合物。本专利技术的NF-1616-904的吡嗪氧化物是一种在任何现有技术文献中未知的新型化合物。本专利技术的目的在于提供一种新型NF-1616-904的吡嗪氧化物。本专利技术的另一个目的是提供制备所述NF-1616-904的吡嗪氧化物的方法。本专利技术的再一个目的是提供以所述NF-1616-904的吡嗪氧化物作为有效成分的药物组合物。附图说明图1给出本专利技术NF-1616-904的新中间体化合物的1H-NMR波谱图;图2给出同样中间体化合物的13C-NMR波谱图;图3给出同样中间体化合物的红外吸收光谱图。本专利技术的上述目的可通过具有下列式(Ⅰ)结构的NF-1616-904的新吡嗪氧化物来实现 本专利技术人做了广泛的研究工作，结果发现通过培养一种从土壤样品(Iriomote-jima，Okinawa-ken，Japan)中分离出的微生物可生产出一种具有特定的生物学活性的新物质。然后，通过发现水解上述作为中间体的新物质可生产NF-1616-904的新吡嗪氧化物这一事实成功地完成了本专利技术。下面将详述用作中间体化合物的新物质和本专利技术NF-1616-904的吡嗪氧化物的制备方法。用于制备本专利技术NF-1616-904的吡嗪氧化物的中间体化合物可通过培养一种微生物来生产。至于在生产中间体化合物时使用的微生物菌株的具体实例，可使用属于梭孢壳属的菌株，该菌株是从土壤样品(Iriomote-jimaOkinawa-ken，Japan)中分离出来的，所述菌株被命名为小梭孢壳(Thielaviaminor)OFR-1561并贮存在日本工业科技厅的发酵研究所，贮存号为FERMBP-1908。所述菌株的真菌学性质如下(a)形态学根据显微镜观察，闭囊壳是球形的或近球形的，直径为40～100μm，深褐色，具有平滑表面的弯曲。外壁为半透明的，子囊是8个孢子的且为宽阔的梨状或卵圆形的，大小为20～25×11～15μm，而且是渐消失的。子囊孢子是椭园状的，大小为8-11×6-8μm，起初无色，然后变为深橄榄色或橄榄褐色。平滑表面的两边稍微隆起，形成单个顶端芽孔。未观察到分生孢子。(b)在各种琼脂培养基上的生长状况肉眼观察通过在37℃下接种菌株，在各种琼脂培养基上生长10天的巨大的菌落。ⅰ)麦芽汁-琼脂培养基生长良好。白色棉状菌丝丛生。形成大量子囊果。菌落背面呈白色或深绿色。ⅱ)马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基生长良好。白色棉状菌丝充分张开。形成较少量子囊果。菌落背面呈深绿色。ⅲ)Sabouraud氏琼脂培养基生长良好。只观察到白色棉状菌丝。未观察到子囊果的形成。菌落背面呈浅黄色。ⅳ)YpSs-琼脂培养基生长良好。白色菌丝在砻嫔舷∈璧胤稚⒖Ｔ诰浔砻嬗写罅炕疑蚝谏淖幽夜＞浔趁嫖奚 (c)生理性质生长温度18～43℃生长的PH范围pH3～10最适生长温度25～39℃最适生长PH范围pH5～8根据上述真菌学性质和按照DavidMalloch和R.F.Cain在《真菌》第65卷，(1973年)，第1055-1077页中“梭孢壳属”一文和JeanMouchacca在《BulletinTrimestrielSocieteMycologiqueFrance》，第89卷，(1973年)，第295-311页中“LesThielaviadessolsaride;especesnouvellesetanalysegenerique”一文中所述的方法，该菌株被确定为属于小梭孢壳菌株，理由是子囊表面是光滑的，子囊孢子的大小为8-11×6-8μm，具有单个顶端芽孔，以及它不形成分生孢子，最后，该菌株被命名为小梭孢壳OFR-1561(FERMBP-1908)。按照本专利技术，制备所需新型NF-1616-904的吡嗪氧化物所使用的中间体化合物是通过培养上述小梭孢壳OFR-1561菌株或其任何属于梭孢壳的突变株来生产的，这些菌株在合适的培养基中能产生上述中间体化合物。用培养普通微生物的常规方法培养上述微生物，一般最好在有氧条件下进行，例如液体培养，振荡培养，通气搅拌培养等。关于可用于培养微生物的培养基，可使用任何含有可被上述梭孢壳属微生物利用的营养源的培养基，包括各种合成培养基，半合成培养基，天然培养基等。关于配制培养基时所用的碳源，可单独或结合使用葡萄糖，蔗糖，果糖，甘油，糊精，淀粉，糖蜜，玉米浆和有机酸。关于配制培养基时所用的氮源，可单独或结合使用Pharmamedia胨，麦芽汁，酵母膏，大豆粉，酪蛋白，氨基酸，尿素等有机氮源，和硝酸钠，硫酸铵等无机氮源。必要的话，还可向培养基中加入钠盐，钾盐，镁盐，磷酸盐和其它重金属盐。除此之外，如果培养基在某种程度上起泡，则可向培养基中加入任何已知的消泡剂。但加入这样的消泡剂不应对生产所需中间体化合物产生任何副作用。培养基的pH最好控制到所用微生物的最佳pH范围内，一般控制到大约中性范围。生长温度可控制到适于培养微生物的大致温度，一般保持在大约20～40℃，最好保持在大约30℃。培养时间在液体培养情况下一般约为1～5天。按照上述培养，可在培养液中生产并积聚所需中间体化合物。当然，根据所用微生物的类型和特点，以及外界条件可适当改变上述各种培养条件。因此，可根据这些因素的范围选择控制最适培养条件。当在培养基中所产生的所需中间体化合物以最大量积聚时，可用为得到发酵产物通常使用的方法分离所需中间体化合物，这些方法包括，例如，盐析法(如用硫酸铵沉淀法)，透析法，萃取法，各种凝胶层析法，离子交换层析法，吸附层析法等，可以最佳顺序单独或结合使用这些方法。更具体地说，由于用上述培养法所生产的所需中间体化合物大多含在培养液(滤液)中，所以需先经过滤或离心分离培养液固体部分的菌丝体，然后用乙酸乙酯萃取所得滤液，浓缩含有所需中间体化合物的萃取液有机层，接着用层析法，如硅胶柱层析，交联葡聚糖LH-20柱(由PharmaciaFineChemicals，Inc.生产)层析等纯化浓缩液。纯化法的详细步骤将在后面所述的实施例1中给出。如此获得的中间体化合物可用实施例1所示的理化性质确定。本专利技术人已将该中间体化合物命名为NF-1616-904。这个NF-1616-904中间体化合物可用来制备本专利技术所需NF-1616-904的吡嗪氧化物，并且如后面的药理试验-1所述，NF-1616-904的中间体化合物本身具有某些特定的生物学和药理学活性，从而可降低癌细胞对各种抗肿瘤剂(该化合物与所述抗肿瘤剂结合使用)的耐受性。因此，NF-1616-904的中间体化合物对于癌症的治疗是相当行У囊┘痢 本专利技术所需NF-1616-904的吡嗪氧化物的制备是通过水解上述NF-1616-904的中间体化合物，水解条件与常用水解条件类似，有碱存在。完成所述水解后，可通过常用的分离和纯化手段容易地分离出所需NF-1616-904的吡嗪氧化物，例如常用手段包括溶剂萃取法，柱层析法，重结晶法等。更具体地讲，关于分离手段，例如用乙酸乙酯萃取水解混合物，然后对所述萃取物作柱层析，如使用交联葡聚糖LH-20柱，用甲醇使柱层析所得级本文档来自技高网...

【技术保护点】
具有下式（Ⅰ）的吡嗪氧化物ＮＦ－１６１６－９０４：＊＊＊，（１）。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：中野善正，菅原道治，植月节义，井泽武年，河口知之，和田章，
申请(专利权)人：大制药株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]