Catfish visceral proteinase, with visceral catfish as raw materials, adding the buffer extraction supernatant for catfish visceral crude extracts; in catfish visceral crude saturated ammonium sulfate was added for salting out, dialysis will precipitate dissolved in phosphate buffer; the dialysate was purified by adsorption chromatography on hydroxyapatite protease, beneficial effects the present invention: extraction of protease, high purity, stable activity, can be used as a variety of food proteins by enzymatic hydrolysis agent, realize the value of the catfish internal organs, improve the economic value of catfish. At the same time, the high purity protease extracted by this method can improve lymphocyte activity, thereby enhancing the body's ability to prevent disease and disease, and also having unexpected effect of scavenging free radicals in organism.
【技术实现步骤摘要】
鲶鱼内脏蛋白酶
本专利技术涉及水产品加工领域,尤其是涉及鲶鱼内脏蛋白酶的加工技术。
技术介绍
鲶鱼在加工中留下可食用肉质部分,内脏弃去不用。伴随着大批量加工而产生的内脏,不仅造成生态污染,而且也是一种极大的资源浪费,内脏中含有丰富的酶类物质,大量研究表明鱼类内脏可作为蛋白酶的重要来源,鱼内脏中蛋白酶含量丰富,所含蛋白酶在较宽的温度范围内都具有活性,是良好的蛋白酶来源,采用内源酶的最大好处是成本低、活性较高、与底物结合好,因此以鲶鱼加工后所剩下的内脏为原料进行酶资源的开发、利用有着积极的意义,因此,研究鲶鱼内脏蛋白酶的提取工艺对鲶鱼产品的综合开发具有重要的现实意义,目前国内外在鱼内脏蛋白酶的研究上多侧重于酶的分离纯化和酶特性研究。现有技术如授权公告号为CN104070711B的中国专利技术专利,公开了一种以鱿鱼内脏为原料提取得到的蛋白酶及其提取方法与应用。本专利技术以新鲜或者冰冻的鱿鱼内脏为原料,鱿鱼内脏经破碎后,用水或食盐溶液进行提取,通过控制提取过程中食盐溶液浓度、固液比、温度、提取时间得到较高的蛋白酶回收率;然后通过等电点沉淀法和添加絮凝剂沉淀等方法去除杂蛋白,提高酶的纯度;最后经浓缩、添加稳定剂、防腐剂等成为液体鱿鱼内脏蛋白酶酶制剂;或者添加填料后经干燥、粉碎,得固体鱿鱼内脏蛋白酶制剂。本专利技术实现了对鱿鱼内脏的增值利用,提高渔业生产附加值,减少鱿鱼制品生产对环境的污染,而且制备得到的鱿鱼蛋白酶作为水解各种食品蛋白质的酶制剂,增加了商品蛋白酶的品种,但此法提取的蛋白酶纯度不高、效率低、操作不方便。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种纯度高、能够 ...
【技术保护点】
鲶鱼内脏蛋白酶,其特征在于:所述的鲶鱼蛋白酶以鲶鱼内脏为原料,通过以下步骤得到:1)浸提:匀浆机均质鲶鱼内脏后,加入缓冲液浸提、离心,所得上清液即为鲶鱼内脏粗提液;2)盐析:在鲶鱼内脏粗提液中加入饱和度硫酸铵沉淀后,鲶鱼内脏粗提液与饱和度硫酸铵的重量体积比为1g:1.6~1.9ml,在4~7℃、8000~10000 r/min下离心13~18min;3)透析:将沉淀物溶解在磷酸盐缓冲液中,在3~6℃的蒸馏水中透析20~30h,每7~10小时换1次蒸馏水;4)纯化:将透析液采用羟基磷灰石吸附层析法制备鲶鱼内脏纯蛋白酶,羟基磷灰石用缓冲液浸泡11~14h,将得到的用洗脱液洗脱后并冷冻干燥,即得鲶鱼内脏纯蛋白酶。
【技术特征摘要】
1.鲶鱼内脏蛋白酶,其特征在于:所述的鲶鱼蛋白酶以鲶鱼内脏为原料,通过以下步骤得到:1)浸提:匀浆机均质鲶鱼内脏后,加入缓冲液浸提、离心,所得上清液即为鲶鱼内脏粗提液;2)盐析:在鲶鱼内脏粗提液中加入饱和度硫酸铵沉淀后,鲶鱼内脏粗提液与饱和度硫酸铵的重量体积比为1g:1.6~1.9ml,在4~7℃、8000~10000r/min下离心13~18min;3)透析:将沉淀物溶解在磷酸盐缓冲液中,在3~6℃的蒸馏水中透析20~30h,每7~10小时换1次蒸馏水;4)纯化:将透析液采用羟基磷灰石吸附层析法制备鲶鱼内脏纯蛋白酶,羟基磷灰石用缓冲液浸泡11~14h,将得到的用洗脱液洗脱后并冷冻干燥,即得鲶鱼内脏纯蛋白酶。2.根据权利要求1所述的一种鲶鱼内脏蛋白酶,其特征在于:所述鲶鱼内脏与缓冲溶液的重量体积比为1~1.3g:0.7ml...
【专利技术属性】
技术研发人员:廖波明,张宪忠,
申请(专利权)人:金华市伊万卡科技有限公司,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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