一种多肽－人组织阴离子转运多肽13.93和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－－人组织阴离子转运多肽１３．９３，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人组织阴离子转运多肽１３．９３的多核苷酸的用途。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——人组织阴离子转运多肽13.93，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
肝细胞能够通过肝基底外侧细胞从肝窦状血小管摄取大量不同的亲脂性组织阴离子如多种胆汁阴离子与甾族复合物，钠离子依赖性与非钠离子依赖性的转运系统位于肝基底外侧细胞质膜区域上，与牛磺酸(或甘氨酸)结合的胆酸通过钠离子-牛磺胆酸协同转运多肽(NTCP)优先地被肝细胞摄取，这在鼠与人肝细胞中均发现(Hagenbuch B et al.，1991)。另一方面，肝细胞对非胆酸结合状态的组织阴离子的摄取是通过非钠离子依赖性的载体独特性地进行，这些载体可能包括胆汁转运激酶(37KD)、四溴酚酞磺酸钠和胆红素结合蛋白(55KD)、一种特殊的组织阴离子结合蛋白(55KD)(Tiribelli C.，1990；Berk PD et al.，1987；Wolkoff AW et al.，1993)，此外已被克隆的鼠与人肝组织阴离子转运多肽74亦进行非钠离子依赖性的组织阴离子如四溴酚酞磺酸盐、胆酸盐、牛磺胆酸盐、甘氨胆酸盐、脱氧牛磺胆酸盐等的转运(Jacquemin E et al.，1994)。人肝组织阴离子转运多肽(OATP)74基因由27110个核苷酸组成，含16个碱基对的聚腺苷酸尾，它的起始位点在第54个核苷酸处，其开放读框序列延伸超过2010个核苷酸，编码一个含670个氨基酸分子量为74KD的含8个潜在N-糖基化位点的蛋白。人肝组织阴离子转运多肽74的序列提示蛋白含有10-12个跨膜区域、8个N-糖基化位点，其中的4个N-糖基化位点位于跨膜结构域9-12的大的亲水噜噗上(Kullak-Ublick et al.1995)。人肝组织阴离子转运多肽74与鼠组织阴离子转运多肽74非常密切，两者有67％的同源性、82％的相似性，鼠组织阴离子转运多肽74可能含有10个跨膜结构域、4个N-糖基化位点(Jacquemin E et al.，1994)，两者很可能均属组织阴离子转运多肽基因家族(Kullak-Ublick et al.1995)。以人肝OATP互补RNA为探针，Northern杂交分析显示来自人肝脏、脑、肺、肾、睾丸的mRNA的交叉激活。进一步的研究显示高强度的杂交信号在人脑全mRNA、肝脏mRNA、肾mRNA中出现，并且一些数据提示人OATP在许多组织中以多种形式出现，主要表现为分子量的大小。人OATP在人体总的组织阴离子转运上起着重要作用。人肝OATP在肝外多种组织的存在暗示了总体上它在人体组织的阴离子跨上皮运输中的重要作用(Kullak-Ublick et al.，1995)。通过基因芯片的分析发现，在正常脑、肝癌、肌肉、胎脑、胎肾，胎肺、胎肝、甲状腺、胸腺、成人肝、肺、胶质瘤中，本专利技术的多肽的表达谱与人组织阴离子转运多肽的表达谱非常近似，因此二者功能也可能类似。本专利技术被命名为人组织阴离子转运多肽13.93。由于如上所述人组织阴离子转运多肽13.93蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人组织阴离子转运多肽13.93蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人组织阴离子转运多肽13.93蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾1病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人组织阴离子转运多肽13.93以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽13.93的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽13.93的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人组织阴离子转运多肽13.93的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人组织阴离子转运多肽13.93的抗体。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人组织阴离子转运多肽13.93蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本专利技术提供了一种多肽——人组织阴离子转运多肽13.93，其基本上是由<210>2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人组织阴离子转运多肽13.93的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人组织阴离子转运多肽13.93相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(III)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括<210>1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。编码成熟多肽的编码区序列可以与<210>1所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本专利技术所用，“简并的变异体”在本专利技术中是指编码具有<210>2的蛋白质或本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人组织阴离子转运多肽１３．９３，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]