一种多肽－人环指蛋白27.17和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种新的多肽－－人环指蛋白２７．１７，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的环指蛋白２７．１７的多核苷酸的用途。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种新的多肽——环指蛋白27.17，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
有一类调控蛋白质的DNA结合结构花式叫锌指结构。该调控蛋白质的活性需要Zn离子。在蛋白DNA结合结构域中，存在着一些有规律的正向重复单位。每个单位大约30个氨基酸，其中部10个氨基酸都是碱性或极性氨基酸。每个重复单位构成了结合DNA的“手指”。(孙乃恩等 分子遗传学 1990)锌指蛋白在生物活细胞中起着重要的作用，其中最重要的是作为转录调节因子发挥作用。真核基因的转录调控对于基因的正常表达是十分重要的，通常由转录调控因子来完成这一调控过程。转录调控因子在生物体内参与决定基因在何种组织及何种发育阶段开始转录。编码这类蛋白的基因如发生突变，不但该基因自身不能正常表达，而且受其调节的许多基因也不能正常的进行转录与表达。锌指蛋白对基因表达的调控主要通过与特定的DNA序列结合来完成，现在发现也有一些锌指蛋白可与RNA结合以调节RNA的代谢。锌指蛋白中有一种C3HC4型叫环指蛋白，有环指基元。这类蛋白是一种新类型的锌指蛋白，它们在金属数目，间隙，序列同源性方面都不同于以前发现的一般的锌指结合蛋白。环指基元可以简单的定义为Cys-X2-Cys-X(9-39)-Cys-X(1-3)-His-X(2-3)-Cys-X2-Cys-X(4-48)-Cys-X2-Cys，其中X是任何一个氨基酸(Freemont PS，AnnNY Acad Sci 1993，684174-192)。研究发现，主要有两种序列类似于环指蛋白基元。一种叫LIM的结构域包含有8个保守的金属配基，其间隙与环指蛋白类似，但在单个金属之间有更大的序列保守性(Schwabe JWR，Klug A，Nat Struct Biol，1994，1345-349)。另一种叫PHD或LAP的结构域也包含了8个保守的金属配基，同时与LTM结构域和环指基元相似(Aasland R.et al.，Trends Biochem Sci1995，2056-59)。环指蛋白基元包括8个金属配基，每个环指分子结合2个锌原子，每个锌原子与4个或3个半胱氨酸以及1个组氨酸四分同裂的方式连接(Everett RD.et al.，J MolBiol1993，2341329-1047)(Barlow PN.et al.，J Mol Biol1994，237201-211)。环指蛋白的3D结构表明，它的锌原子连接系统是结构域中唯一的，并被称为“cross-brace”基元。在这个系统中，第一对配基(Cys1，Cys2)与第三对配基(Cys4，Cys5)共用一个锌原子，第二对配基(Cys3，His1)与第四对配基(Cys6，Cys7)共用第二个锌原子。这样，尽管每个环指蛋白分子结合两个锌原子，但不会形成两个小的结构域，而是一个完整的结构单元。环指蛋白基元有两个结构。它们是IEEHV环指结构域和PML环指结构域。IEEHV结构域采用的是一个β-β-α-β折叠形式，PML结构域采用的是一个β-β-β-loop-α-β的折叠形式。在两种结构域中，His1和Cys4之间的距离为14埃，这是高度保守的，这暗示所有锌原子之间的距离是高度保守的。环指蛋白基元的其它保守特征还有β片层的总体拓扑结构，“cross-brace”锌原子连接系统，形成疏水核心的几个保守氨基酸残基包装。这些保守特征可能在所有环指蛋白家族中都是共有的。因此，环指基元形成了一个方便的支架系统，这个系统的结构性改变反映出该家族蛋白分子功能的多样性。环指蛋白的功能除了能与DNA结合从而调节基因转录、表达以外，还有能在细胞内多蛋白中积聚大分子、调节蛋白与蛋白之间的反应。环指蛋白结构域可能是潜在的同源寡聚化结构域或与其它靶蛋白作用。环指蛋白在发挥这些功能时，其分子必须是完整的。C3HC4型锌指蛋白家族成员庞大，这些蛋白几乎能在人类的各个组织、器官中表达。C3HC4型锌指蛋白家族成员功能繁多，具体就这些功能而言包括但不限于以下几种激活和重排免役球蛋白以及T细胞受体，调节白介素-2受体α链启动区域或HIV-1 LTR启动区域基因的表达，调节人类精子细胞的发育，连接rfp蛋白N末端和酪氨酸激酶产生ret转化蛋白，与哺乳动物乳腺癌有关，稳定CDK激酶和细胞周期蛋白H复合体，作为转录因子与多种肿瘤发生有关。由于如上所述环指蛋白27.17蛋白在机体内重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的环指蛋白27.17蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新环指蛋白27.17蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人环指蛋白27.17以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人环指蛋白27.17的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人环指蛋白27.17的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人环指蛋白27.17的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人环指蛋白27.17的抗体。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人环指蛋白27.17蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本专利技术提供了一种多肽——人环指蛋白27.17，其基本上是由<210>2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人环指蛋白27.17的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人环指蛋白27.17相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人环指蛋白２７．１７，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]