一种多肽－人组织阴离子转运多肽41和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽—人组织阴离子转运多肽４１，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人组织阴离子转运多肽４１的多核苷酸的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种多肽——人组织阴离子转运多肽41，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。人肝组织阴离子转运多肽(OATP)74基因由2737个核苷酸组成，含16个碱基对的聚腺苷酸尾，它的起始位点在第54个核苷酸处，其开放读框序列延伸超过2010个核苷酸，编码一个含670个氨基酸分子量为74KD的含8个潜在N-糖基化位点的蛋白。人肝组织阴离子转运多肽74的序列提示蛋白含有10-12个跨膜区域、8个N-糖基化位点，其中的4个N-糖基化位点位于跨膜结构域9-12的大的亲水噜噗上(Kullak-Ublick et al.1995)。人肝组织阴离子转运多肽74与鼠组织阴离子转运多肽74非常密切，两者有67％的同源性、82％的相似性，鼠组织阴离子转运多肽74可能含有10个跨膜结构域、4个N-糖基化位点(Jacquemin E etal.，1994)，两者很可能均属组织阴离子转运多肽基因家族(Kullak-Ublick etal.1995)。以人肝OATP互补RNA为探针，Northern杂交分析显示来自人肝脏、脑、肺、肾、睾丸的mRNA的交叉激活。进一步的研究显示高强度的杂交信号在人脑全mRNA、肝脏mRNA、肾mRNA中出现，并且一些数据提示人OATP在许多组织中以多种形式出现，主要表现为分子量的大小。人OATP在人体总的组织阴离子转运上起着重要作用。人肝OATP在肝外多种组织的存在暗示了总体上它在人体组织的阴离子跨上皮运输中的重要作用(Kullak-Ublick et al.，1995)。本专利技术的人的组织阴离子转运多肽41基因与人的组织阴离子转运多肽74基因在蛋白水平上有46％的同源性，与鼠的组织阴离子转运多肽74基因在蛋白水平上有45％的同源性(同源蛋白号U21943)，其结构域相似于组织阴离子转运多肽基因家族的特征性结构域---10-12个跨膜结构域、4-8个N-糖基化位点，其中的数个N-糖基化位点位于跨膜结构域的大的亲水噜噗上。基于以上各点，故认为本专利技术的新基因为一编码人组织阴离子转运多肽基因家族的基因，命名为人组织阴离子转运多肽41。并以此推断其结构域与组织阴离子转运多肽基因家族结构域相似，具有相似的生物学功能。编码人组织阴离子转运多肽41的多聚核苷酸，及其所编码的人组织阴离子转运多肽41的发现为研究细胞在正常及病理条件下的分化、增殖的生理生化过程提供了一种方法，也为诊断、治疗与细胞分化增殖紊乱而造成的疾病包括癌症提供了一种新途径。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽41的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人组织阴离子转运多肽41的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人组织阴离子转运多肽41的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人组织阴离子转运多肽41的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人组织阴离子转运多肽41的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人组织阴离子转运多肽41异常相关的疾病的方法。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的人组织阴离子转运多肽41，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物、类似物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少70％相同性(a)编码上述人组织阴离子转运多肽41的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有<210>2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有<210>1中75-1208位的序列；和(b)具有<210>1中1-2061位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。如本专利技术所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的人组织阴离子转运多肽41”是指人组织阴离子转运多肽41基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化人组织阴离子转运多肽41。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。人组织阴离子转运多肽41多肽的纯度能用氨基酸序列分析。本专利技术提供了一种多肽——人组织阴离子转运多肽41，其基本上是由<210>2所示的氨基酸序列组成的。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人组织阴离子转运多肽41的片段、衍生物和类似物。如本专利技术所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的人组织阴离子转运多肽4 1相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术多肽的片段、衍生物或类似物可以是(I)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基被保守或非保守氨基酸残基(优选的是保守氨基酸残基)取代，并且取代的氨基酸可以是也可以不是由遗传密码子编码的；或者(II)这样一种，其中一个或多个氨基酸残基上的某个基团被其它基团取代包含取代基；或者(III)这样一种，其中成熟多肽与另一种化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合；或者(IV)这样一种，其中附加的氨基酸序列融合进成熟多肽而形成的多肽序列(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)通过本文的阐述，这样的片段、衍生物和类似物被认为在本领域技术人员的知识范围之内。本专利技术提供了分离的核酸(多核苷酸)，基本由编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸组成。本专利技术的多核苷酸序列包括<210>1的核苷酸序列。本专利技术的多核苷酸是从人胎脑组织的cDNA文库中发现的。它包含的多核苷酸序列全长为2061个碱基，其开放读框(75--1208)编码了377个氨基酸。根据氨基酸序列同源比较发现，此多肽与鼠的组织阴离子转运多肽有45％的同源性，可推断出该人组织阴离子转运多肽41具有鼠的组织阴离子转运多肽相似的结构和功能。本专利技术的多核苷酸可以是DNA形式或是RNA形式。DNA形本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人组织阴离子转运多肽４１，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]