一种多肽－人X连锁基因表达蛋白14和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽—人Ｘ连锁基因表达蛋白１４，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人Ｘ连锁基因表达蛋白１４的多核苷酸的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种多肽——人X连锁基因表达蛋白14，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。
技术介绍
印记基因(imprinted genes)即在生物体内存在着一些基因或染色体，其保留配子的某些特征并进行选择性差异表达。这些印记基因在生物体内的特异表达均通过一基因组印记过程来完成，基因组印记(genomic imprinting)即某一基因的个别等位基因根据其父母本的不同来源而进行特异性地表达。这些等位基因在配子形成过程中或在发育早期已被特异性地标识出来，且这一标识是可遗传的，一代代间是可逆的，其表达与否很可能存在一稳定的外遗传修饰。在生物体内已证实存在100-200种不同的印记基因，其中只有20-30种被确定。现约有25种印记基因被证实具有稳定的外遗传修饰，其中一些被表明在肿瘤的发生过程中起作用。(Joyce JA，Schofield PN；Mol Pathol 1998 Aug；51185-90)研究发现，基因组印记在生物体内具有很多重要的生物学功能，其与胚胎发育、胚胎生长、各种增生滋生层疾病的发生及白血病等肿瘤及癌症的发生均有一定的关系。(Chilosi M，Lestani M et al.，Adv Clin Path 1998 Jan；215-24)CAAX基序由一半胱氨酸残基后接两个脂肪族残基及一个C末端X残基组成，其中X可能是C、S、M、Q或A中的一个。(Taparowsky，E.etal.，Cell，1983；34581-86)该基序为蛋白转运前修饰的靶位点，在生物体有着非常重要的生物学功能。研究发现，该基序中半胱氨酸残基的异戊二烯化直接影响着蛋白发挥正常的生物学功能。只有经异戊二烯化，蛋白才能正确地与细胞膜结合，调节细胞的分化与增殖。通常由GGTase(异戊二烯基转移酶)对其进行修饰，将法尼基或牦牛儿基转移至末端cys残基上，修饰后利用高度变化的C末端以完成蛋白与细胞膜的结合与相互作用。(Hancock JF，Cadwallader K，et al.，EMBOJ 1991 Dev；104033-4039)研究证实，已知的各种含CAAX基序的蛋白，如Ras蛋白，G蛋白等均存在这一转运前修饰过程。(Brown AL，Kay GF；Hum Mol Genet，1999，Apr；8611-619)这些蛋白高度变化的C末端决定了它们在不同细胞器膜上的定位。若C末端被去除，则这些蛋白与膜结合的特异性也将消失。另外，CAAX基序异戊二烯化修饰还可能与肿瘤发生及血胆脂醇过高等疾病有关。(Schafer，W.R.；Rine，J.；Annu.Rev.Genet.，1992，26209-237)根据氨基酸同源比较的结果，本专利技术的多肽被推断鉴定为人X连锁基因表达蛋白14(HBe×14)，其同源蛋白为鼠脑中X染色体连锁基因Bex2表达的蛋白，蛋白号是AF097439。且两者核甘酸序列的C末端均含有一CAAX基序，同为印记基因家族的成员，并具有相似的生物学功能。由于如上所述人X连锁基因表达蛋白14蛋白在调节细胞分裂和胚胎发育等机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人X连锁基因表达蛋白14蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人X连锁基因表达蛋白14蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供分离的新的多肽——人X连锁基因表达蛋白14以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人X连锁基因表达蛋白14的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人X连锁基因表达蛋白14的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人X连锁基因表达蛋白14的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人X连锁基因表达蛋白14的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人X连锁基因表达蛋白14的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人X连锁基因表达蛋白14异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少72％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有<210>1中101-487位的序列；和(b)具有<210>1中1-767位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人X连锁基因表达蛋白14蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人X连锁基因表达蛋白14蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人X连锁基因表达蛋白14表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人Ｘ连锁基因表达蛋白１４，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]