一种多肽－人血管上皮钙粘着蛋白54和编码这种多肽的多核苷酸制造技术

本发明专利技术公开了一种多肽—人血管上皮钙粘着蛋白５４，编码此多肽的多核苷酸和经ＤＮＡ重组技术产生这种多肽的方法。本发明专利技术还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法，如恶性肿瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各类炎症等。本发明专利技术还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明专利技术还公开了编码这种新的人血管上皮钙粘着蛋白５４的多核苷酸的用途。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，具体地说，本专利技术描述了一种多肽——人血管上皮钙粘着蛋白54，以及编码此多肽的多核苷酸序列。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的制备方法和应用。细胞内的粘着由特殊的细胞粘着分子介导。细胞粘着分子至少可分为三个亚家族，免疫球蛋白亚家族、整合蛋白亚家族及钙粘着蛋白亚家族。所有形成固体组织的细胞类型均表达钙粘着蛋白亚家族的一些成员，这暗示钙粘着蛋白涉及许多细胞类型的选择性粘附。细胞内的相互粘着可能是信号转导的一种方式，在生物体内调控着细胞生长及极化等多种过程。因而，钙粘着蛋白在生物体内有着重要的生物学功能，其表达异常将导致细胞间不能正常的进行相互作用，从而引发细胞生长被抑制、组织及器官发育异常、肿瘤的发生等多种疾病。钙粘着蛋白通常被认为是一些糖基化整合膜蛋白，含有一N末端决定其结合特异性的细胞外结构域，一疏水性跨膜结构域及C末端细胞质结构域。其中C末端的结构域为该亚家族中所有成员高度保守的结构域，通过连环蛋白或其它细胞骨架相关的蛋白与细胞骨架相互作用。细胞质结构域对于细胞外结构域发挥结合调节功能也是必需的。不同细胞中钙粘着蛋白家族成员间的相互结合是同源的。早在80年代，人们就已从哺乳动物的各种不同组织克隆得到了多种钙粘着蛋白。1987年，Nagafuchi等人从鼠中克隆得到了E-钙粘着蛋白；同年，Nose等人克隆得到了P-钙粘着蛋白；Gallin等人克隆得到了L-CAM，该蛋白也为E-钙粘着蛋白；1988年，Hatta等人克隆得到了N-钙粘着蛋白；E-、P-及N-三种亚类型的钙粘着蛋白在蛋白水平上有45％-58％的相似性。直到1990年，Suzuki等人克隆得到了八个新的钙粘着蛋白，人们对这种蛋白的研究才有了新的进展。同年，人们还克隆得到了R-钙粘着蛋白、M-钙粘着蛋白及B-钙粘着蛋白。研究发现，不同亚类的钙粘着蛋白在不同的组织中表达，如E-钙粘着蛋白在上皮组织表达，而N-钙粘着蛋白在神经、肌肉等上皮组织中却不表达。本专利技术的新的人血管上皮钙粘着蛋白54与鼠血管钙粘着蛋白2在蛋白水平上有35％的同一性和58％的相似性，且含有相似的结构特征，因而两者同为钙粘着蛋白家族的新成员，均为上皮组织特异表达的蛋白。在上皮细胞中，主要的钙粘着蛋白中的一种就是VE-钙粘着蛋白，上皮钙粘着蛋白对于神经、肌肉等上皮组织的发育有着重要的调控作用，在细胞间负责转导不同细胞间的信息。由于如上所述人血管上皮钙粘着蛋白54蛋白在机体重要功能中起重要作用，而且相信这些调节过程中涉及大量的蛋白，因而本领域中一直需要鉴定更多参与这些过程的人血管上皮钙粘着蛋白54蛋白，特别是鉴定这种蛋白的氨基酸序列。新人血管上皮钙粘着蛋白54蛋白编码基因的分离也为研究确定该蛋白在健康和疾病状态下的作用提供了基础。这种蛋白可能构成开发疾病诊断和/或治疗药的基础，因此分离其编码DNA是非常重要的。本专利技术的另一个目的是提供编码该多肽的多核苷酸。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人血管上皮钙粘着蛋白54的多核苷酸的重组载体。本专利技术的另一个目的是提供含有编码人血管上皮钙粘着蛋白54的多核苷酸的基因工程化宿主细胞。本专利技术的另一个目的是提供生产人血管上皮钙粘着蛋白54的方法。本专利技术的另一个目的是提供针对本专利技术的多肽——人血管上皮钙粘着蛋白54的抗体。本专利技术的另一个目的是提供了针对本专利技术多肽——人血管上皮钙粘着蛋白54的模拟化合物、拮抗剂、激动剂、抑制剂。本专利技术的另一个目的是提供诊断治疗与人血管上皮钙粘着蛋白54异常相关的疾病的方法。本专利技术涉及一种分离的多肽，该多肽是人源的，它包含具有<210>2氨基酸序列的多肽、或其保守性变体、生物活性片段或衍生物。较佳地，该多肽是具有<210>2氨基酸序列的多肽。本专利技术还涉及一种分离的多核苷酸，它包含选自下组的一种核苷酸序列或其变体(a)编码具有<210>2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸；(c)与(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有<210>1中295-1770位的序列；和(b)具有<210>1中1-3096位的序列。本专利技术另外涉及一种含有本专利技术多核苷酸的载体，特别是表达载体；一种用该载体遗传工程化的宿主细胞，包括转化、转导或转染的宿主细胞；一种包括培养所述宿主细胞和回收表达产物的制备本专利技术多肽的方法。本专利技术还涉及一种能与本专利技术多肽特异性结合的抗体。本专利技术还涉及一种筛选的模拟、激活、拮抗或抑制人血管上皮钙粘着蛋白54蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本专利技术的多肽。本专利技术还涉及用该方法获得的化合物。本专利技术还涉及一种体外检测与人血管上皮钙粘着蛋白54蛋白异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，包括检测生物样品中所述多肽或其编码多核苷酸序列中的突变，或者检测生物样品中本专利技术多肽的量或生物活性。本专利技术也涉及一种药物组合物，它含有本专利技术多肽或其模拟物、激活剂、拮抗剂或抑制剂以及药学上可接受的载体。本专利技术还涉及本专利技术的多肽和/或多核苷酸在制备用于治疗癌症、发育性疾病或免疫性疾病或其它由于人血管上皮钙粘着蛋白54表达异常所引起疾病的药物的用途。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。本说明书和权利要求书中使用的下列术语除非特别说明具有如下的含义“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因组或合成的DNA或RNA，它们可以是单链或双链的，代表有义链或反义链。类似地，术语“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白质序列及其片段或部分。当本专利技术中的“氨基酸序列”涉及一种天然存在的蛋白质分子的氨基酸序列时，这种“多肽”或“蛋白质”不意味着将氨基酸序列限制为与所述蛋白质分子相关的完整的天然氨基酸。蛋白质或多核苷酸“变体”是指一种具有一个或多个氨基酸或核苷酸改变的氨基酸序列或编码它的多核苷酸序列。所述改变可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替换。变体可具有“保守性”改变，其中替换的氨基酸具有与原氨基酸相类似的结构或化学性质，如用亮氨酸替换异亮氨酸。变体也可具有非保守性改变，如用色氨酸替换甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一个或多个氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改变导致与天然存在的分子相比，一个或多个氨基酸或核苷酸的增加。“替换”是指由不同的氨基酸或核苷酸替换一个或多个氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的结构、调控或生物化学功能的蛋白质。类似地，术语“免疫学活性”是指天然的、重组的或合成蛋白质及其片段在合适的动物或细胞中诱导特定免疫反应以及与特异性抗体结合的能力。“激动剂”是指当与人血管上皮钙粘着蛋白54结合时，一种可引起该蛋白质改变从而调节该蛋白质活性的分子。激动剂可以包括蛋白质、核酸、碳水化合物或任何其它可结合人血管上皮钙粘着蛋白54的分子。“拮抗剂”或“抑制物”是指当与人血管上皮钙粘着蛋白54结合时，一种可封闭或调节人血管上皮钙粘着蛋白54的生本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多肽－人血管上皮钙粘着蛋白５４，其特征在于它包含有：〈２１０〉２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、类似物或衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毛裕民，谢毅，
申请(专利权)人：上海博德基因开发有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]