无诱导表达基因工程菌株及构建方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种无诱表达基因工程菌株及构建方法和应用，无诱导表达基因工程菌株的宿主细胞为肠杆菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１，ＣＣＴＣＣ　　Ｍ２０５１３６，ＰＣＲ扩增ｈｒｐ　　Ｚ基因片段，克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体中，经ＥｃｏＲ　　Ｉ／Ｘｈｏ　　Ｉ酶切、酶连接，将ｈｒｐ　　Ｚ基因插入大肠杆菌表达载体ｐＥＴ－３２ｂ（＋）硫氧还蛋白下游，构建重组表达质粒ｐＥＴ－３２ｂ－ｈｒｐ，再将其转化至Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１中，经筛选得到阳性克隆子。无诱导表达重组ＨｒｐＺ蛋白，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，高效表达了可溶性重组蛋白ＡＰＤＺ蛋白。用叶片穿刺法，表明重组蛋白ＡＰＤＺ具有诱导烟草过敏反应的生物功能。该重组蛋白对植物病害有良好的防治效果和促进植物的生长、提高了农作物产量。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物病害的防治，可以抵抗细菌、真菌、病毒、线虫等对植物的危害。更具体地讲，本专利技术涉及无诱导表达Harpin基因工作菌株，同时还涉及该菌株的构建方法，该专利技术在防治植物病害中的应用。
技术介绍
过敏反应是植物自身具有的一种保护反应，类似于高等动物所具有的广谱抗病菌免疫反应。植物病原真菌、细菌和病毒都能够引起过敏性反应(hypersensitive response，HR)。过敏性反应是一种快速的、与防卫反应相关的在侵染位点造成的植物细胞程序性死亡(programmedcell death，PCD)(Dangl et al.，1996；Klement et al.，1982)，从而使病原菌被限制在侵染部位，不能增殖。主要表现为接种区植物组织局部产生枯斑。病原菌所产生的一些多糖、脂多糖、糖蛋白、脂肪酸、蛋白质以及多肽等物质是诱导植物过敏性反应的主要因子，这些物质被称为激发子(elicitor)。高等植物过敏性反应(hypersensitiveresponse，HR)，是植物在受到病原细菌侵染、发生不亲和(incompatible)反应时所产生的一种特有现象。植物病原本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的蛋白质，其具有与ＳＥＱＩＤＮＯ．２所示氨基酸序列至少７０％同源性的序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孟小林，徐进平，丁玲，鲁伟，王健，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]