一种细胞培养基及生产蛋白质的方法技术

本发明专利技术属于生物制药领域，提供了一种细胞培养基和利用该培养基培养细胞生产蛋白质的方法。本发明专利技术的细胞培养基是在化学成分限定的培养基基础上，进行了氨基酸优化，从而提高了细胞的蛋白表达能力。本发明专利技术的方法工艺控制简单，有利于大规模扩大生产。

A cell culture medium and the method of producing protein

The present invention belongs to the field of biopharmaceuticals, providing a cell culture medium and a method for producing protein by using the culture medium. The cell culture medium of the present invention is to optimize the amino acid on the basis of the medium of chemical composition, thus improving the protein expression ability of the cell. The method of the invention has simple process control and is beneficial to the large-scale expansion of production.

【技术实现步骤摘要】
一种细胞培养基及生产蛋白质的方法
本专利技术属于生物制药领域，涉及一种通过细胞培养生产蛋白质的方法。
技术介绍
西妥昔单抗(cetuximab，商品名为爱必妥)是由ImCloneSystems公司开发的一种抗EGFR人鼠嵌合型单克隆抗体，用于治疗EGFR高表达的转移性结直肠癌及头颈部癌症。表达西妥昔单抗的宿主细胞为鼠源骨髓瘤细胞SP2/0。SP2/0细胞表达的蛋白除了非人源NGNA(N-glycolylneuraminicacid，N-羟乙酰基神经氨酸)修饰外，还有少量的鼠源α-(1,3)半乳糖残基，其能触发机体严重的免疫反应。西妥昔单抗就因含鼠源“α-(1,3)半乳糖残基”结构而造成临床上出现过敏性休克等严重不良事件，该不良反应一定程度上限制了其使用。目前，70％以上的抗体蛋白都是由CHO细胞生产的。对比其他哺乳动物细胞，CHO细胞的优点主要包括：①CHO细胞表达的蛋白糖基化修饰结构与人类基本一致，CHO细胞缺乏有活力的α-(1,3)半乳糖残基转移酶，因此其表达的重组蛋白末端不会有α-(1,3)半乳糖残基修饰；②CHO细胞能够在生物反应器培养的过程中获得较高的细胞密度；③CHO细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞培养基，包括基础培养基和补料培养基，其中，所述补料培养基包括40‑80g/L的CD EfficientFeed C AGT、20‑70g/L的Cell Boost 5、0.1‑0.8g/L的谷氨酸、0.5‑1.2g/L的酪氨酸、0.2‑1g/L的半胱氨酸、0‑0.8g/L的色氨酸、0.1‑0.3g/L的苏氨酸、0‑0.4g/L的苯丙氨酸和1‑2g/L的PF68；优选地，所述补料培养基还包括pH调节剂，所述补料培养基的pH值为6.9‑7.2。

【技术特征摘要】
2016.08.23 CN 20161070890151.一种细胞培养基，包括基础培养基和补料培养基，其中，所述补料培养基包括40-80g/L的CDEfficientFeedCAGT、20-70g/L的CellBoost5、0.1-0.8g/L的谷氨酸、0.5-1.2g/L的酪氨酸、0.2-1g/L的半胱氨酸、0-0.8g/L的色氨酸、0.1-0.3g/L的苏氨酸、0-0.4g/L的苯丙氨酸和1-2g/L的PF68；优选地，所述补料培养基还包括pH调节剂，所述补料培养基的pH值为6.9-7.2。2.根据权利要求1所述的细胞培养基，其中，所述基础培养基为哺乳动物细胞培养用基础培养基，优选所述哺乳动物细胞为CHO细胞。3.根据权利要求1或2所述的细胞培养基，其中，所述基础培养基包括5-20g/L的CDFortiCHOAGT或DynamisAGT，和5-15g/L的Ex-Cell302；优选地，所述基础培养基还包括pH调节剂，所述基础培养基的pH值为6.9-7.2。4.根据权利要求1-3任一所述的细胞培养基，其中，所述补料培养基包括56-80g/L的CDEfficientFeedCAGT、20-70g/L的CellBoost5、0.19-0.58g/L的谷氨酸、0.5-1.02g/L的酪氨酸、0.43-0.85g/L的半胱氨酸、0-0.8g/L的色氨酸、0.12-0.3g/L的苏氨酸、0-0.35g/L的苯丙氨酸和1-2g/L的PF68。5.根据权利要求3所述的细胞培养基，其中，所述基础培养基包括12.5g/L的CDFortiCHOAGT或DynamisAGT，和10.8g/L的Ex-Cell302；所述补料培养基包括56g/L的CDEfficientFeedCAGT、21g/L的CellBoost5、0.58g/L的谷氨酸、1.02g/L的酪氨酸、0.85g/L的半胱氨酸、0.4g/L的色氨酸、0.12g/L的苏氨酸、0.17g/L的苯丙氨酸和1.5g/L的PF68。6.根据权利要求1-5任一所述的细胞培养基培养动物细胞的方法，其中所述动物细胞为哺乳动物细胞，优选地，所述哺乳动物细胞为CHO细胞。7.一种培养细胞生产蛋白质的方法，包括用根据权利要求1-5中任一项所述的细胞培养基培养细胞，其中，所述基础培养基用于细胞生长阶段，所述补料培养基用于细胞生产蛋白质阶段；优选地，细胞培养过程中，细胞密度达到5-8×106细胞/ml时，细胞培养进入细胞生产蛋白质阶段。8.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：薛彤彤，杨秋艳，李明雄，王帅坤，谢冰松，刘立平，王利春，王晶翼，
申请(专利权)人：四川科伦博泰生物医药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51