ALK4:ACTRIIB异多聚体和其用途制造技术

在某些方面，本公开内容提供了可溶性异聚多肽复合物，其包含ALK4受体的细胞外结构域和ActRIIB的细胞外结构域。在某些方面，这样的可溶性ALK4:ActRIIB复合物可用于调节(促进或抑制)组织或细胞的生长，包括例如，肌肉、骨、软骨、脂肪、神经组织、肿瘤和/或癌细胞。在某些方面，这样的ALK4:ActRIIB复合物可用于改进肌肉形成、骨形成、代谢参数和与这些组织、细胞网络、肾和内分泌系统有关的病症。

ALK4:ACTRIIB heteroligomers and their uses

In some respects, the present disclosure provides a soluble polypeptides complex that contains the extracellular domain of the ALK4 receptor and the extracellular domain of ActRIIB. In some ways, such soluble ALK4:ActRIIB complexes can be used to regulate (promote or inhibit) tissue or cell growth, such as muscle, bone, cartilage, fat, nerve tissue, tumor and / or cancer cells. In some respects, such ALK4:ActRIIB complexes can be used to improve muscle formation, bone formation, metabolic parameters and diseases associated with these tissues, cell networks, kidney and endocrine system.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】ALK4：ACTRIIB异多聚体和其用途相关申请的交叉引用本申请要求2015年4月6日提交的美国临时申请系列号62/143,579和2015年9月18日提交的美国临时申请系列号62/220,836的权益。前述申请各自的公开内容通过引用以其整体结合到本文中。专利技术背景转化生长因子-β(TGF-β)超家族包含各种生长因子，其享有共同的序列元件和结构基序。这些蛋白已知在脊椎动物和无脊椎动物二者中对多种细胞类型发挥生物学作用。超家族的成员在胚胎发育期间在模式形成和组织特化中执行重要的功能，和可影响各种分化过程，包括脂肪生成、肌生成、软骨发生、心脏发生、血细胞生成、神经发生和上皮细胞分化。该家族分成两个概括的系统发生进化枝：更近进化的超家族成员，其包括TGF-β、活化素和nodal，和更远相关的超家族蛋白的进化枝，其包括许多BMP和GDF[Hinck(2012)FEBSLetters586：1860-1870]。TGF-β家族成员具有多样的，通常互补的生物学作用。通过操纵TGF-β家族的成员的活性，通常有可能引起生物体的显著生理学变化。例如，Piedmontese和BelgianBlue牛品种带有GDF8(亦称为肌抑素)基因的功能丢失突变，其导致肌肉质量显著增加[Grobet等(1997)NatGenet.、17(1)：71-4]。此外，在人中，GDF8的失活的等位基因与肌肉质量增加有关，并据报道，与异常优越的力量有关[Schuelke等(2004)NEnglJMed、350：2682-8]。纤维化、肌肉、骨、脂肪、红细胞和其它组织的变化可通过增强或抑制由TGF-β家族的配体介导的细胞内信号传导(例如，SMAD1、2、3、5和/或8)来实现。因此，对调节TGF-β超家族的各种配体的活性的试剂存在需要。专利技术简述如本文所述的，已发现ALK4：ActRIIB异二聚体蛋白复合物是TGF-β超家族的配体的独特拮抗剂，与相应的ActRIIB和ALK4同二聚体比较显示不同的配体-结合特征/选择性。特别地，与任一同二聚体比较，实例性ALK4：ActRIIB异二聚体显示与活化素B的结合增强，保留如ActRIIB同二聚体所观察到的与活化素A、GDF8和GDF11的强结合，和显示与BMP9、BMP10和GDF3的结合显著减少。事实上，ALK4：ActRIIB异二聚体显示对BMP9低至无的可观察量的亲和力，尽管该配体与ActRIIB同二聚体强结合。参见图6。这些结果因此证实，与ActRIIB同二聚体相比，ALK4：ActRIIB异二聚体是TGF-β超家族的某些配体的更具选择性的拮抗剂(抑制剂)。因此，在其中这样的选择性拮抗作用是有利的某些应用中，ALK4：ActRIIB异二聚体比ActRIIB同二聚体更有用。实例包括治疗应用，其中需要拮抗活化素(例如，活化素A、活化素B、活化素AB、活化素AC)、GDF8和GDF11的一种或多种，伴随对BMP9、BMP10和GDF3的一种或多种的拮抗作用减少。此外，ALK4：ActRIIB异二聚体产生显著类似于ActRIIB同二聚体的某些生物学作用，尽管两种复合物的配体选择性不同。例如，ALK4：ActRIIB异二聚体产生对骨骼肌肉和骨的有益的合成代谢作用以及对脂肪组织的分解代谢作用，非常类似于ActRIIB-Fc同二聚体。然而，不像ActRIIB同二聚体，ActRIIB：ALK4异二聚体仅显示对BMP9和BMP10低的亲和力或短暂结合，因此应该对由这些配体介导的过程，例如血管发生具有很少至没有同时抑制作用。这种新的选择性可用于例如，治疗需要对肌肉和骨的刺激作用和/或对脂肪的抑制作用，但不需要改变血管发生的患者。此外，ALK4：ActRIIB异二聚体在肾疾病的小鼠模型中具有各种有益作用，特别是对治疗或预防肾损伤、炎症和纤维化。因此，不希望受特定作用机制的约束，预期结合/抑制活化素(例如，活化素A、活化素B、活化素AB和活化素AC)、GDF8和/或GDF11的至少一种或多种的ALK4：ActRIIB异多聚体以及其变体是可用于促进对骨骼肌肉和骨的有益的合成代谢作用、对脂肪组织的分解代谢作用和对肾疾病的有益作用的试剂。此外，预期模拟本文所述的ALK4：ActRIIB异二聚体的结合/抑制性质的其它拮抗剂(抑制剂)或拮抗剂的组合以及直接或间接拮抗ALK4和/或ActRIIB受体的试剂、直接或间接拮抗ALK4-和/或ActRIIB-结合配体的试剂、直接或间接拮抗下游信号传导介质(例如，Smads)的试剂和/或直接或间接拮抗TGF-β超家族共受体的试剂将具有类似的体内生物学作用，包括例如，对肌肉和骨的刺激作用和对脂肪的抑制作用。这些拮抗模拟物在本文通称为“ALK4：ActRIIB拮抗剂”或“ALK4：ActRIIB抑制剂”。因此，本公开内容部分地提供了异多聚体复合物(异多聚体)，其包含至少一个ALK4多肽和至少一个ActRIIB多肽(ALK4：ActRIIB异多聚体)。优选地，ALK4多肽包含ALK4受体的配体-结合结构域，例如，ALK4细胞外结构域的一部分。类似地，ActRIIB多肽通常包含ActRIIB受体的配体-结合结构域，例如，ActRIIB细胞外结构域的一部分。优选地，这样的ALK4和ActRIIB多肽以及其得到的异多聚体是可溶性的。在某些方面，ALK4：ActRIIB异多聚体包含ALK4氨基酸序列，其与以SEQIDNO：9的氨基酸24-34的任一个开始(例如，氨基酸24、25、26、27、28、29、30、31、32、33和34)和以SEQIDNO：9的氨基酸101-126的任一个结束(例如，氨基酸101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125和126)的多肽具有至少70％同一性。例如，ALK4：ActRIIB异多聚体可包含与SEQIDNO：9的氨基酸34-101具有至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，ALK4：ActRIIB异多聚体可包含与SEQIDNO：9的氨基酸24-126具有至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在其它实施方案中，ALK4：ActRIIB异多聚体可包含与SEQIDNO：10具有至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的ALK4氨基酸序列。在仍其它实施方案中，ALK4：ActRIIB异多聚体可包含与SEQIDNO：20具有至少70％、75％、80％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的ALK4氨基酸序列。在某些本文档来自技高网...

【技术保护点】
重组异多聚体，其包含ALK4多肽和ActRIIB多肽。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.06 US 62/143579;2015.09.18 US 62/2208361.重组异多聚体，其包含ALK4多肽和ActRIIB多肽。2.权利要求1的异多聚体，其中ALK4多肽包含与以下多肽具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列：a)以SEQIDNO:9的氨基酸24、25、26、27、28、29、30、31、32、33或34的任一个开始，和b)以SEQIDNO:9的氨基酸101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125或126的任一个结束。3.权利要求1的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:9的氨基酸34-101具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。4.权利要求1的异多聚体，其中ALK4多肽基本上由与SEQIDNO:9的氨基酸34-101具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列组成，或由其组成。5.权利要求1的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:10具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。6.权利要求1的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:20具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。7.权利要求1-6中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与以下多肽具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列：a)以SEQIDNO:1的氨基酸20、21、22、23、24、25、26、27、28或29的任一个开始，和b)以SEQIDNO:1的氨基酸109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133或134的任一个结束。8.权利要求1-6中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:1的氨基酸29-109具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。9.权利要求1-6中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:1的氨基酸25-131具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。10.权利要求1-9中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽在对应于SEQIDNO:1的L79的位置处不包含酸性氨基酸。11.权利要求1-10中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:2具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。12.权利要求1-10中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:3具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。13.权利要求1-10中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:5具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。14.权利要求1-10中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:6具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。15.权利要求1-14中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽是还包含异源结构域的融合蛋白。16.权利要求1-15中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽是还包含异源结构域的融合蛋白。17.权利要求15的异多聚体，其中ALK4多肽包含相互作用对的第一或第二成员。18.权利要求16的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含相互作用对的第一或第二成员。19.权利要求15-18中任一项的异多聚体，其中异源结构域包含Fc免疫球蛋白结构域。20.权利要求19的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白结构域包含促进异二聚体形成的一种或多种氨基酸修饰。21.权利要求19或20的异多聚体，其中免疫球蛋白Fc结构域包含抑制同二聚体形成的一种或多种氨基酸修饰。22.权利要求19-21中任一项的异多聚体，其中异源结构域包含来自IgG免疫球蛋白的Fc免疫球蛋白结构域。23.权利要求22的异多聚体，其中IgG免疫球蛋白选自：IgG1、IgG2和IgG3或IgG4。24.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:23具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。25.权利要求24的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:23的残基134和177的位置处包含带正电荷的氨基酸。26.权利要求25的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:23的位置134和177处包含K。27.权利要求24-26中任一项的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:23的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。28.权利要求27的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:23的位置225处不包含K。29.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:24具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。30.权利要求29的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:24的残基170和187的位置处包含带负电荷的氨基酸。31.权利要求30的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:24的位置170和187处包含D。32.权利要求29-31中任一项的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:24的残基225的位置处包含带正电荷的氨基酸。33.权利要求32的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:24的位置225处包含K。34.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:25具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。35.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:26具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。36.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:27具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。37.权利要求36的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:27的残基132的位置处包含C，和其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:27的残基144的位置处进一步包含W。38.权利要求36或37的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:27的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。39.权利要求38的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:27的位置225处不包含K。40.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:28具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。41.权利要求40的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:28的残基127的位置处包含C，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:28的残基144的位置处进一步包含S，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:28的残基146的位置处进一步包含A，和其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:28的残基185的位置处进一步包含V。42.权利要求40或41的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在对应于SEQIDNO:28的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。43.权利要求42的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白在SEQIDNO:28的位置225处不包含K。44.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:29具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。45.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:30具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。46.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:31具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。47.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:32具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。48.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白链包含与SEQIDNO:33具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。49.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:34具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。50.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:35具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。51.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:36具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。52.权利要求22的异多聚体，其中Fc免疫球蛋白包含与SEQIDNO:37具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。53.权利要求1-22中任一项的异多聚体，其中：a)ALK4多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述免疫球蛋白的恒定区包含与SEQIDNO:23具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列；和b)ActRIIB多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述免疫球蛋白的恒定区包含与SEQIDNO:24具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。54.权利要求1-22中任一项的异多聚体，其中：a)ALK4多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述免疫球蛋白的恒定区包含与SEQIDNO:24具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列；和b)ActRIIB多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述免疫球蛋白的恒定区包含与SEQIDNO:23具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。55.权利要求53或54的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:23的残基134和177的位置处包含带正电荷的氨基酸。56.权利要求55的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:23的位置134和177处包含K。57.权利要求53-56中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:23的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。58.权利要求57的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:23的位置225处不包含K。59.权利要求53-58中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:24的残基170和187的位置处包含带负电荷的氨基酸。60.权利要求59的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:24的位置170和187处包含D。61.权利要求53-60中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:24的残基225的位置处包含带正电荷的氨基酸。62.权利要求61的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:24的位置225处包含K。63.权利要求1-22中任一项的异多聚体，其中：a)ALK4多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述恒定区包含与SEQIDNO:27具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列；和b)ActRIIB多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述恒定区包含与SEQIDNO:28具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。64.权利要求1-22中任一项的异多聚体，其中：a)ALK4多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述恒定区包含与SEQIDNO:28具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列；和b)ActRIIB多肽是还包含免疫球蛋白的恒定区的融合蛋白，所述恒定区包含与SEQIDNO:27具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。65.权利要求63或64的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:27的残基132的位置处包含C，和其中恒定区在对应于SEQIDNO:27的残基144的位置处进一步包含W。66.权利要求63-65中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:27的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。67.权利要求66的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:27的位置225处不包含K。68.权利要求63-67中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:28的残基127的位置处包含C，其中恒定区在对应于SEQIDNO:28的残基144的位置处进一步包含S，其中恒定区在对应于SEQIDNO:28的残基146的位置处进一步包含A，和其中恒定区在对应于SEQIDNO:28的残基185的位置处进一步包含V。69.权利要求63-68中任一项的异多聚体，其中恒定区在对应于SEQIDNO:28的残基225的位置处不包含带正电荷的氨基酸。70.权利要求69的异多聚体，其中恒定区在SEQIDNO:28的位置225处不包含K。71.权利要求15-70中任一项的异多聚体，其中融合蛋白进一步包含位于ALK4结构域和异源结构域之间的接头结构域。72.权利要求15-71中任一项的异多聚体，其中融合蛋白进一步包含位于ActRIIB结构域和异源结构域之间的接头结构域。73.权利要求71或72的异多聚体，其中接头结构域选自：TGGG(SEQIDNO:17)、TGGGG(SEQIDNO:15)、SGGGG(SEQIDNO:16)、GGGGS(SEQIDNO:58)、GGG(SEQIDNO:13)、GGGG(SEQIDNO:14)和SGGG(SEQIDNO:18)。74.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:42具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。75.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:44具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。76.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:39具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。77.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:41具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。78.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中异多聚体包含：ALK4多肽，其包含与SEQIDNO:44具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列，和ActRIIB多肽，其包含与SEQIDNO:41具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。79.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:47具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。80.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽包含与SEQIDNO:48具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。81.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:45具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。82.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含与SEQIDNO:46具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。83.权利要求1-16中任一项的异多聚体，其中异多聚体包含：ALK4多肽，其包含与SEQIDNO:48具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列，和ActRIIB多肽，其包含与SEQIDNO:46具有至少70%、75%、80%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%同一性的氨基酸序列。84.权利要求1-83中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽包含一个或多个修饰的氨基酸残基，其选自：糖基化氨基酸、PEG化氨基酸、法呢基化氨基酸、乙酰基化氨基酸、生物素化氨基酸和与脂质部分缀合的氨基酸。85.权利要求1-84中任一项的异多聚体，其中ActRIIB多肽包含一个或多个修饰的氨基酸残基，其选自：糖基化氨基酸、PEG化氨基酸、法呢基化氨基酸、乙酰基化氨基酸、生物素化氨基酸和与脂质部分缀合的氨基酸。86.权利要求1-85中任一项的异多聚体，其中ALK4多肽进一步包...

【专利技术属性】
技术研发人员：R库马，A格林伯格，DS萨科，RS皮尔萨尔，R卡斯通瓜伊，
申请(专利权)人：阿塞勒隆制药公司，
类型：发明
国别省市：美国,US