细胞因子受体链制造技术

本发明专利技术公开了编码ＩＬ－１３受体和其片段的多核苷酸。本发明专利技术还公开了ＩＬ－１３受体蛋白质，制备它们的方法，ＩＬ－１３与其受体结合的抑制剂和它们的鉴别方法。本发明专利技术还提供了使用这些分子和ＩＬ－１３／ＩＬ－１３Ｒ相互作用的拮抗剂的医学治疗方法。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是1997年4月30日提交的申请序列号No.08/841,751申请的部分继续申请，而序列号为No.08/841,751的申请是1996年3月1日提交的序列号No.08/609,572申请的分案申请。IL-13是与几种生物活性的产生有关的细胞因子，包括诱导IgG4和IgE转换，包含在人类未成熟B细胞中；在正常人类B细胞中诱导种系IgE重链(ε)转录和CD23表达；在存在CD40L或抗CD40mAb情况下诱导B细胞增殖。尽管IL-13的许多活性与IL-4的活性相似，但与IL-4相反，IL-13对活化的T细胞或T细胞克隆体没有生长促进作用。如同多数细胞因子，IL-13通过与在靶细胞表面的IL-13受体(“IL-13R”)相互作用表现出某些生物活性。IL-13R和IL-4受体(“IL-4R”)具有相同的组分，其是受体活化所需的；然而，IL-13不与用130 kD IL-4R转染的细胞结合(Zurawski等人，同上)。因此，IL-13R必须含有至少一条其他配体结合链。细胞因子受体通常含有两条或三条链。IL-13的一条配体结合链的克隆最近已有报道(Hilton等人，Proc.Natl.Acad.Sci.93497-501)。因此需要鉴别和克隆IL-13R的任何其他IL-13结合链的序列，以使IL-13R蛋白质可为各种目的制备，包括制备治疗试剂，筛查IL-13结合受体的抑制剂和受体信号传递。(b)从核苷酸103到核苷酸1242的SEQ ID NO3核苷酸序列；(c)由于遗传密码的简并从(a)或(b)定义的核苷酸序列的序列中变化而来的核苷酸序列；(d)在严格条件下能与(a)或(b)定义的核苷酸杂交的核苷酸序列；(e)编码(a)或(b)定义的序列的物种同源体的核苷酸序列；(f)(a)或(b)定义的核苷酸序列的等位基因变体。较好地，核苷酸序列编码具有人类IL-13受体生物活性的蛋白质。核苷酸序列可操作地与表达控制序列结合。在较好的实施方案中，多核苷酸包括从核苷酸256到核苷酸1404的SEQ IDNO1的核苷酸序列；从核苷酸319到核苷酸1257的SEQ IDNO1的核苷酸序列；从核苷酸1324到核苷酸1404的SEQ IDNO1的核苷酸序列；从核苷酸103到核苷酸1242的SEQ IDNO3的核苷酸序列；从核苷酸178到核苷酸1125的SEQ IDNO3的核苷酸序列；从核苷酸1189到核苷酸1242的SEQ IDNO3的核苷酸序列。本专利技术还提供了含有编码包括在下列组中选取的氨基酸序列的肽或蛋白质的核苷酸序列的分离多核苷酸(a)SEQ ID NO2的氨基酸序列；(b)从氨基酸22到氨基酸334的SEQ ID NO2的氨基酸序列；(c)从氨基酸357到氨基酸383的SEQ ID NO2的氨基酸序列；(d)SEQ ID NO4的氨基酸序列；(e)从氨基酸26到氨基酸341的SEQ ID NO4的氨基酸序列；(f)从氨基酸363到氨基酸380的SEQ ID NO4的氨基酸序列；(g)具有IL-13受体结合链生物活性的(a)-(f)的片段。其他较好的实施方案编码从氨基酸1到331的SEQ ID NO2的氨基酸序列和从氨基酸26到331的SEQ ID NO2的氨基酸序列。本专利技术还提供了用多核苷酸转化的宿主细胞，较好地是哺乳动物细胞。在其他实施方案中，本专利技术提供了制备IL-13bc蛋白质的方法。该方法包括(a)在适当的培养介质中培养本专利技术的宿主细胞培养物；(b)从培养物中提纯IL-13bc蛋白质。本专利技术还提供了包括在下列组中选取的氨基酸序列的分离IL-13bc蛋白质(a)SEQ ID NO2的氨基酸序列；(b)从氨基酸22到氨基酸334的SEQ ID NO2的氨基酸序列；(c)从氨基酸357到氨基酸383的SEQ ID NO2的氨基酸序列；(d)SEQ ID NO4的氨基酸序列；(e)从氨基酸26到氨基酸341的SEQ ID NO4的氨基酸序列；(f)从氨基酸363到氨基酸380的SEQ ID NO4的氨基酸序列；(g)具有IL-13受体结合链生物活性的(a)-(f)的片段。较好地，蛋白质包括SEQ ID NO2的氨基酸序列；从氨基酸22到氨基酸334的SEQ ID NO2的氨基酸序列；SEQ ID NO4的氨基酸序列；从氨基酸26到氨基酸341的SEQ ID NO4的氨基酸序列。在其他较好的实施方案中，特异氨基酸序列组成融合蛋白(含有不是从IL-13bc衍生的其他氨基酸序列)。较好的融合蛋白质包括抗体片段，如Fc片段。特别较好的实施方案包括从氨基酸1到氨基酸33 1的SEQ ID NO2的氨基酸序列和从氨基酸26到氨基酸331的SEQ ID NO2的氨基酸序列。本专利技术还提供了含有本专利技术的蛋白质和药学可接受的载体的药学组合物。本专利技术进一步提供了包括与本专利技术的蛋白质特异反应的抗体的组合物。本专利技术还提供了鉴别结合IL-13bc或IL-13受体的抑制剂的方法。这些方法包括(a)将IL-13bc蛋白质或其片段与IL-13或其片段结合，所说的结合形成第一结合混合物；(b)测定在第一结合混合物中蛋白质和IL-13或片段结合的量；(c)将一种化合物与蛋白质和IL-13或片段结合形成第二结合混合物；(d)测定在第二结合混合物中结合的量；(e)比较在第一结合混合物中的结合量和在第二结合混合物中的结合量；其中当第二结合混合物的结合量降低发生时，化合物能抑制IL-13与IL-13受体的结合。本专利技术还提供了通过这些方法鉴别的IL-13R的抑制剂和含抑制剂的药学组合物。本专利技术还公开了在哺乳动物受试体中抑制IL-13与IL-13bc蛋白质或IL-13受体结合的方法，其包括服用治疗上有效量的含有IL-13bc蛋白质，IL-13bc或IL-13R抑制剂或IL-13bc蛋白质抗体的组合物。本专利技术还提供了改善IL-13活性的方法，其包括将具有IL-13活性的蛋白质与权利要求11的蛋白质结合，并将这样的结合物与除了IL-13bc外至少表达IL-13R一条链的细胞接触。较好地，接触步骤通过给哺乳动物受试体服用治疗上有效量的这种结合物来实施。本专利技术还提供了在哺乳动物受试体内治疗与IL-13相关的病况的方法。所说的方法包括服用治疗上有效量的含有IL-13拮抗剂和药学可接受的载体的组合物。其他方法提供了一种在哺乳动物受试体中抑制IL-13和IL-13bc蛋白质相互作用的方法，包括服用治疗上有效量的含有IL-13拮抗剂和药学可接受的载体的组合物。较好地，拮抗剂是从下列组中选取的，包括IL-13bc蛋白质，IL-13Rα1的可溶形式，IL-13或其IL-13结合片段的抗体，IL-13bc或其IL-13bc结合片段的抗体，IL-13Rα1或其IL-13Rα1结合片段的抗体，IL-4的IL-13R结合突变体，能抑制IL-13与IL-13bc相互作用的小分子，和能抑制IL-13与IL-13Rα1相互作用的小分子。本专利技术附图的简单描述附图说明图1演示了如在下面实施例4中所描述的用IL-13bc-Fc处理后，IL-13，IL-4，IL-11和模拟转染COS细胞的照片。图2演示了通过体内阻断白细胞介素-13过敏原-诱导气管过度反应的逆转。在初始气管内攻击后10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的多核苷酸，包括从下列组中选取的核苷酸序列： （ａ）从核苷酸２５６到核苷酸１４０４的ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１核苷酸序列； （ｂ）从核苷酸１０３到核苷酸１２４２的ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３核苷酸序列； （ｃ）由于遗传密码的简并从（ａ）或（ｂ）定义的核苷酸序列的序列中变化而来的核苷酸序列； （ｄ）在严格条件下能与（ａ）或（ｂ）定义的核苷酸杂交的核苷酸序列； （ｅ）编码（ａ）或（ｂ）定义的序列的物种同族体的核苷酸序列； （ｆ）（ａ）或（ｂ）定义的核苷酸序列的等位基因变体。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：玛丽柯林斯，德布拉唐纳德森，洛丽菲特茨，特玛林内本，马修J惠蒂尔斯，克莱夫伍德，马歇威尔斯卡尔普，
申请(专利权)人：遗传学院有限公司，约翰斯霍普金斯大学，
类型：发明
国别省市：US[美国]