细胞生长调节因子制造技术

本发明专利技术公开了一种由肌细胞和白血细胞分泌或释放的新的物质。这种新的物质具有抑制肿瘤细胞增殖和抑制被激活淋巴细胞增殖的活性。该物质不抑制正常细胞的增殖。据本发明专利技术，这种物质可用于治疗或预防癌症，并且，该物质在体液中的，或者在通过个体细胞在其中生长而条件化的液体中的含量，可用于诊断癌症，或用于测定个体发生癌症的危险程度。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术总体来说，属于人类医学和兽医学领域，并涉及影响细胞生长和增殖的一些新物质。本专利技术还涉及这些物质在预防或治疗疾病方面的应用。本专利技术进一步涉及一种诊断疾病的方法，或者对易患某种疾病或具有患某种疾病的诱因的个体进行普查的方法。术语汇编为了使本文叙述简练，将使用几个新造的术语。其中的某些术语和在本文范围内它们应当被理解的方式如下面所述“细胞生长调节因子(GR)”-影响细胞生长或增殖的物质。GR对生长或增殖的作用可能是促进细胞的生长或增殖，或者是抑制细胞的生长或增殖。“内源性GR(EGR)”-由体内细胞分泌或释放出的物质，它能影响体内同种细胞或者其它细胞的生长或增殖。“抑制细胞GR/EGR”-具有停止或明显减慢细胞生长或增殖作用的GR/EGR，基本上对细胞没有任何破坏作用。抑制细胞EGR典型地通过在细胞周期的一个阶段阻止细胞周期而起作用。“低分子量-EGR(LMW-EGR)”-分子量小于大约3000道尔顿的EGR。“肌肉因子(MF)”-由肌细胞分泌或释放的LMW-EGR。“白血细胞因子(WBF)”-由白血细胞分泌或释放的LMW-EGR。“源细胞”-分泌或释放EGR的细胞。“靶细胞”-受EGR作用的细胞。“条件培养基(CM)”-由于源细胞在其中生长而条件化的培养基。CM因此含有源细胞分泌的EGR。“肌细胞CM”和“白血细胞CM”-分别由于肌细胞和白血细胞在其中生长而条件化的培养基。肌细胞CM和白血细胞CM分别含有MF和WBF。上述术语还应该参照下文来解释和理解。专利技术背景大量研究工作涉及到被称为“细胞因子”(cytokines)的EGR的发现、表征、生物检测和临床开发工作。至今发现的所有细胞因子都是蛋白质类物质，具有几千道尔顿至几万道尔顿的分子量范围。细胞因子虽然各具有不同的来源和靶细胞，并具有不同活性模式，但都具有蛋白质类物质的共同特性。已有报道表明，在实验动物中，运动可显著地抑制肿瘤的生长和发展(S.A.Hoffman等，1962，癌症研究，22597-599；V.E.Baracos，1989，生理病理化学杂志，67864-870)A.Szent-Gyorgyi等(1963，科学，1401391-1392)曾报导，在包括胸腺、主动脉、肌肉和腱等几种组织的提取物中，含有二种物质，一种促进小鼠腹水瘤的生长(被他们称为“促细胞素”)，另一种抑制其生长(被他们称为“抑细胞素”)。抑细胞素被描述为小分子量物质，相对不稳定，在室温下大约一周内就分解了。而且，根据其分离的方式，这种物质看来是亲脂性的。T.Namba等(1968，英国实验病理学杂志，49294-301)也描述了肌细胞提取物对腹水瘤细胞的抑制作用，并发现肌肉提取物的抑制活性是可以通过硅膜透析的。加热提取物会影响这种抑制活性，尽管对透析液加热后没有发现任何作用。E.Watta等(美国专利4,708,948)公开了一种抑制肿瘤生长的大分子量多肽，也是可以从肌肉组织得到的。M.Djaldetti等(美国专利5,242,692)公开了一种来自肌细胞的，能抑制肿瘤细胞增殖的因子。这种因子是从肌细胞培养物的上清液中被分离出的，它具有通过凝胶电泳测定的在25,000-30,000道尔顿范围内的表观分子量。专利技术概述本专利技术基于一些由肌细胞或者白血细胞分泌、释放或产生的新物质的发现，这些物质具有抑制肿瘤细胞增殖的生物活性，而基本上不影响正常的，非肿瘤细胞的增殖。此外，还发现，这些物质对抑制被激活的免疫细胞的增殖是有效的。据此，一方面，本专利技术提供了一种基本上被纯化的细胞生长调节因子，它是(a)LMW-EGR，一种具有下列特征的物质i.它是由肌细胞，特别是肌细胞或白血细胞产生、分泌或释放的，ii其分子量小于大约3000道尔顿，iii.不是蛋白质，iv.可溶于水，v.对热稳定，vi.有抑制细胞增殖的生物活性，特别是抑制肿瘤细胞的增殖或抑制被激活的淋巴细胞的增殖；或者(b)一种(a)类物质的衍生物，也具有抑制细胞增殖的生物活性。另一方面，本专利技术提供了这种物质在预防和治疗疾病方面的应用。据此，提供了用于预防疾病或功能紊乱的方法，包括对需要治疗的对象施用有效量的该GR。赋予GR抑制增殖的活性方式之后，典型地在一段时间内对患者定期施用GR。进而，根据本专利技术的这一方面，本专利技术提供了一种含有一定量该GR的组合物。该组合物可以是一种含有治疗有效量的GR和药用载体或稀释剂的药物组合物。这种药物组合物可以用于预防疾病或失调，或者用于治疗疾病或失调。该组合物还可以是非处方组合物，例如作为neutraceutical组合物，食品添加剂，保健食品制剂等等。最后，本专利技术的这一方面还提供了所述GR在制备这些组合物中的应用。特别优选的是用所述GR治疗或预防癌症，或者在治疗或预防由于免疫系统活动过度而引起的各种病症的范围内，抑制(消除或降低)被激活淋巴细胞的活性，例如用于克服器官排斥作用，治疗自身免疫疾病等等。本专利技术还进一步提供了用于诊断癌症，或检查个体癌症状况的方法，或者用于对易发生癌症或具有癌症诱因的个体进行普查的方法，这种方法包从所述个体的体液中，或从所述个体的细胞培养物的上清液中，测定所说的LMW-EGR的含量。本专利技术的另一方面是以适当的条件培养基中的活性级分的纯化为基础，制备本专利技术的GR的方法。专利技术描述新的低分子量EGR的发现是本专利技术的基础。术语“低分子量”应当被理解为，当通过超滤法测定时，分子量小于大约3000道尔顿，特别是小于大约2000道尔顿，而优选的是小于大约500道尔顿的。技术人员知道，这些分子量都是大致的，不能看作是精确的数值。已发现本专利技术的LMW-EGR是非蛋白质类物质，即它们既不是蛋白质，也不是肽，也不是具有在其生物活性中起作用的蛋白质或肽基元的其它物质。(本专利技术的研究结果不能排除如下可能性这种LMW-EGR可以以同蛋白质或肽结合或络合的形式存在，但在LMW-EGR作为生长调节剂的活性中，其中的蛋白质或肽基元不起任何作用，或仅有有限的作用)。根据本专利技术，至令为止，LMW-EGR是从肌细胞的CM和从白血细胞的CM中得到的。但是据信，根据本专利技术，LMW-EGR也可以从其它来源得到。因此本专利技术不局限于MF和WBF。相反地，以本专利技术的研究结果作为基础，并通过应用标准的技术和已有的有关这种物质的知识，技术人员将不难发现其它的LMW-EGR，这些也应属于本专利技术的范围。已发现MF和WBF是肿瘤特异性的抑制细胞的EGR。它们在特异性地抑制肿瘤细胞生长和增殖中，具有同等的生物活性，而对正常细胞、非肿瘤细胞都没有任何显著的作用。此外，还发现MF和WBF都是肿瘤非特异性的(即能有效地抑制各种肿瘤细胞的生长和增殖)，以及种非特异性的(对来自各种动物物种的肿瘤细胞，都显示有抑制生长和增殖的活性)。换句话说，MF和WBF在抑制癌细胞生长和增殖中，具有广谱性。并且，本专利技术的研究结果还意味着，从一种动物，特别是从哺乳动物得到的MF或WBF，可以用于另一种动物，特别是哺乳动物的癌症治疗。应该指出的是，虽然发现MF和WBF是细胞抑制因子，但发现它们对细胞也可能有某种破坏性作用，特别是在长时间暴露之后。例如，在长时间暴露于MF或WBF，以及它们的衍生物之后，靶肿瘤细胞最后可能由于例如细胞凋亡而死亡。除本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基本上纯化的细胞生长调节因子（ＧＲ），它是：（ａ）ＬＭＷ－ＥＧＲ，一种具有下列特征的物质：ｉ．它是由肌细胞或者白血细胞产生、分泌或释放的，ｉｉ．其分子量小于大约３０００道尔顿，ｉｉｉ．不是蛋白质，ｉｖ．可溶于水， ｖ．对热稳定，ｖｉ．具有抑制细胞增殖的生物活性；或（ｂ）具有抑制细胞增殖生物活性的（ａ）中物质的衍生物。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：P费彻曼，R吉亚吉斯，
申请(专利权)人：坎菲特生物药物有限公司，
类型：发明
国别省市：IL[以色列]