本发明专利技术公开了一个Ⅰ型细胞因子受体样分子及其编码基因。该Ⅰ型细胞因子受体样分子是下述氨基酸残基序列之一：１）序列表中的ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１；２）将序列表中ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有将细胞阻抑于Ｇ０／Ｇ１期，降低Ｓ期细胞比例功能的蛋白质。本发明专利技术的Ⅰ型细胞因子受体样分子及其编码基因既可作为潜在的肿瘤诊断标记使用，也可以其为活性成分制备成Ⅰ型神经纤维瘤、胰腺肿瘤及其它相关肿瘤的治疗性药物，将在医学及制药领域发挥重要作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及细胞因子受体样分子及其编码基因与应用，特别是涉及一个I型细胞 因子受体样分子及其编码基因与其在制备抑制细胞增殖的治疗性基因药物中的应用。
技术介绍
纤维结合素III型(FNIII)结构域是许多蛋白分子(如细胞黏附与迁移分子、细 胞受体分子、生长因子受体分子、蛋白酪氨酸磷酸酶等)的重要结构域(C.W. Ward, Members of the insulin receptor family contain three fibronectin type III domains, Growth Factors 16 (1999) 315-322)。 FNIII结构域最早是在牛的纤维结 合素中发现的(T.E. Petersen, H. C. Thogersen， K. Skorstengaard， K. Vibe-Pedersen， P. Sahl， Sottrup-Jensen, S. Magnusson， Partial primary structure of bovine plasma fibronectin: three types of internal homology, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 80 (1983) 137-141)。该结构域在典型的纤维结 合素分子中是一个长约100个氨基酸残基、有15次重复的同源单位。纤维结合素蛋 白与其异源二聚体形式的整合素受体的特异性结合主要依赖于靠近纤维结合素蛋白羧基端的第10个FNIII结构域(FNIII10)内的细胞黏附基序，即精氨酸、甘氨酸和天 门冬氨酸结构域(RGD)，及其附近的FNIII9结构域中的协同位点(M.A. Arnaout， S. L. Goodman, J. P. Xiong, Coming to grips with integrin binding to ligands, Curr. Opin. Cell. Biol. 14 (2002) 641-651)。 RGD结构域不仅存在于纤维结合素中，它也存在于许多整合素受体家族蛋白的特异性配体中，其中包括纤维蛋白原、胶原、玻 璃体结合蛋白、冯威特布兰特因子、内动蛋白、韧粘素、外加某些黏附蛋白等(E. Ruoslahti， RGD and other recognition sequences for integrins, Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 12 (1996) 697-715)。虽然如此，目前估计仅有5_6%的RGD蛋白属于膜 蛋白或分泌型蛋白，而自然界存在的大多数RGD蛋白主要分布在细胞内(G. K. Papadopoulos， C. Ouzounis， E. Eliopoulos, RGD sequences in several receptor proteins: novel cell adhesion function of receptors, Int. J. Biol. Macromol. 22 (1998) 51—57)。I型细胞因子受体超家族蛋白的特点是受体的胞外区分布有一个细胞受体同源区 (CRH)。典型的CRH结构由两个反向平行的FNIII结构域组成，每个FNIII结构域又由7个时斤叠片构成桶状结构。在第一个FNIII结构域靠近蛋白氨基末端的位置通常 会有四个半光氨酸残基，而保守的WSXWS基序位于第二个FNIII结构域的羧基端，即 靠近细胞膜的区域。通常认为，CRH的功能主要是参与受体的二聚化，与特异性配体 的相互作用，以及受体跨膜区的信号转导等。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种可将细胞阻抑于G0/G1期，降低S期细胞比例的I型细 胞因子受体样分子。本专利技术所提供的I型细胞因子受体样分子，名称为CRLF-p48(简称p48或h-p48)， 来源于人属人(及朋o幼; ie/^)，是下述氨基酸残基序列之一1) 序列表中的SEQ ID NO: 1;2) 将序列表中SEQIDNO: 1的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、 缺失或添加且具有将细胞阻抑于G0/G1期，降低S期细胞比例功能的蛋白质。序列表中的SEQIDNO: 1由438个氨基酸残基组成，自氨基端(N端)第76-261 位氨基酸残基为纤维结合素ni型(FNIII)结构域，自氨基端第255-259位氨基酸残 基为WSPWS基序，自氨基端第249-253位氨基酸残基为RGD回文序列，自氨基端第 216-230位氨基酸残基为酪氨酸硫化位点(N-snhfedvYvgsetef-C)，自氨基端第 292-295位氨基酸残基为单一的N糖基化位点。所述取代、缺失或添加的一至十个氨基酸残基可以是非结构域中的氨基酸残基， 其改变不会对该蛋白的功能产生影响。编码本专利技术I型细胞因子受体样分子的基因(CK尸-简称/7必或力-/ 必)， 其cDNA是下述核苷酸序列之一1) 序列表中SEQ ID NO: 2的DNA序列;2) 编码序列表中SEQ ID NO: 1的DNA序列；3) 与序列表中SEQ ID NO: 2限定的DNA序列具有90X以上同源性且具有将细胞 阻抑于G0/G1期，降低S期细胞比例功能的核苷酸序列；4) 在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID NO: 2限定的DNA序列杂交的核苷酸序列。所述高严谨条件为在O. 1XSSPE (或0. 1XSSC) 、 0.1% SDS的溶液中，65。C条 件下杂交并洗膜。序列表中的SEQ ID NO: 2由1317个碱基组成，其编码序列为自5'端第1-1317 位碱基，编码具有序列表中SEQ ID NO: l的氨基酸残基序列的蛋白质，自5'端第 226-783位碱基编码纤维结合素III型(FNin)结构域，自5'端第763-777位碱基编码WSPWS基序，自5，端第745-759位碱基编码RGD回文序列，自5，端第646-690 位碱基编码酪氨酸硫化位点(N-snhfedvYvgsetef-C)，自5，端第874-885位碱基编码 N糖基化位点。含有本专利技术基因的各种表达载体、稳定细胞系、转基因动物及宿主菌均属于本发 明的保护范围。扩增CiK,-p^ 中任一片段的引物对也是本专利技术要保护的。本专利技术的另一个目的是提供一种在细胞水平调控细胞从Gl期进入到S期的方法。本专利技术所提供的在细胞水平调控细胞从Gl期进入到S期的方法，是将所述I型 细胞因子受体样分子基因CvK尸-p^9或将该基因小干扰RNA的编码基因导入宿主细胞， 导致宿主细胞被阻抑于G0/G1期或G0/G1期阻抑被解救，细胞进入到S期。所述I型细胞因子受体样分子基因C虹尸-;^9的小干扰RNA，是正义链为序列表中 SEQ ID NO: 3的核苷酸序列，反义链为序列表中SEQ ID NO: 4的双链RNA序列。将上述双链RNA序列命名为si-p48。si-p48的反义链与6T Z尸-;^《raRNA第836-856 位置序列5， -gguacagucugagcagucgaa-3，互补，序列表中SEQ ID NO: 3由21个碱 基组成，序列的方向从左至右为5'端一3'端，序列表中SEQIDN0: 4由21个碱基 组成，序列的本文档来自技高网...
【技术保护点】
Ⅰ型细胞因子受体样分子，是下述氨基酸残基序列之一：１）序列表中的ＳＥＱＩＤＮＯ：１；２）将序列表中ＳＥＱＩＤＮＯ：１的氨基酸残基序列经过一至十个氨基酸残基的取代、缺失或添加且具有将细胞阻抑于Ｇ０／Ｇ１期，降低Ｓ期细胞比例功能的蛋白质。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘力，杨帆，王树蕙，张云，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
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