【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，涉及cgt-odn在免疫调节中的应用。
技术介绍
1、核酸是模式识别受体(prrs)检测到的启动先天免疫反应的主要保守病原体决定簇。含有cpg基序的细胞外细菌单链dna(ssdna)及其合成模拟物cpg寡核苷酸(odns)可被免疫细胞内化，并被内体中的tolllike受体9(tlr9)识别。cpg odn已显示出对抗癌症、感染和过敏性疾病的巨大潜力。
2、第一类待鉴定的prrs是toll样受体(tlrs)，它是识别细胞外或内体病原体配体的膜蛋白。然而，一些病原体可以逃避tlrs的检测，进入宿主细胞质或细胞核。因此，大多数tlr具有感知相似配体的细胞内互补prr，如用于rna的tlr3和rig-i/mda5，以及用于脂多糖(lps)的tlr4和胱天蛋白酶。toll样受体9(tlr9)是ssdna中cpg基序的特异性受体，内化到内体中，但它对胞质或核酸ssdna“视而不见”，主要在专业免疫细胞中表达，这表明存在广泛表达的细胞内ssdna prr。然而，迄今为止，还没有明确鉴定出这种特异性检测细胞内ssdna的tlr9互补受体。
3、在tlr9被克隆的几十年前，细菌ssdna被鉴定为卡氏杆菌(bcg)免疫治疗的关键活性成分，这是一种与科利毒素密切相关的策略。随后发现，未甲基化的cpg基序对某些免疫细胞内吞的ssdna和合成寡核苷酸(odn)的免疫刺激活性至关重要，这导致了基于cpg-odn的疫苗佐剂、抗肿瘤疗法以及过敏性和感染性疾病治疗的各种临床试验。值得注意的是，在这些应用中使用的递送系统
技术实现思路
1、为了解决现有技术中存在的技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：
2、本专利技术提供了一种cgt-odn核苷酸序列，所述cgt-odn核苷酸序列如下所示：
3、5’-(x)ncgt/a(x)m(g)a(x)b(g)c(x)d-3’，
4、其中，x为任意核苷酸碱基，n代表≥0的任意整数数值，m代表≥0的任意整数数值，a代表≥0的任意整数数值，b代表≥0的任意整数数值，c代表≥0的任意整数数值，d代表≥0的任意整数数值，c代表选自胞嘧啶、5-甲基胞嘧啶，g代表选自鸟嘌呤，t代表胸腺嘧啶，a代表腺嘌呤，a、c至少有一项数值为≥1的整数；
5、进一步，所述a、c至少有一项数值为≥2的整数；
6、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列侧翼序列富含连续g核苷酸；
7、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列具有磷酸二酯连接。
8、在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列不存在硫代磷酸(ps)和2’-o-甲基骨架，硫代磷酸(ps)和2’-o-甲基骨架会破坏odn的免疫刺激活性。在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列可以是甲基化序列。在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列可以是回文序列。
9、在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列需要至少一个cgt/a基序，侧翼序列即下游序列存在连续的至少2个g核苷酸序列，连续的g核苷酸序列可直接排列于cgt/a基序后，也可间隔其他序列排列于cgt/a基序下游。
10、在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列并不限制核苷酸序列的长度，进一步的，所述核苷酸序列的长度包括但不限于10nt、11nt、12nt、13nt、14nt、15nt、16nt、17nt、18nt、19nt、20nt、21nt、22nt、23nt、24nt、25nt、26nt、27nt、28nt、29nt、30nt、31nt、32nt、33nt、34nt、35nt、36nt、37nt、38nt、39nt、40nt、41nt、42nt、43nt、44nt、45nt、46nt、47nt、48nt、49nt、50nt、51nt、52nt、53nt、54nt、55nt、56nt、57nt、58nt、59nt、60nt、61nt、62nt、63nt、64nt、65nt、66nt、67nt、68nt、69nt、70nt、71nt、72nt、73nt、74nt、75nt、76nt、77nt、78nt、79nt、80nt、81nt、82nt、83nt、84nt、85nt、86nt、87nt、88nt、89nt、90nt、91nt、92nt、93nt、94nt、95nt、96nt、97nt、98nt、99nt、100nt、200nt、300nt、400nt、500nt、1000nt、10000nt。
11、在本专利技术中，术语“odn”是指能够激活免疫应答的寡聚脱氧核苷酸，“odn”在本专利技术中不具体限制核苷酸长度。特别的，术语“cgt-odn”是指具备cgt/a基序与下游连续g核苷酸序列的，显示出免疫激活功能的寡聚脱氧核苷酸。术语“连续g核苷酸序列”是指通过磷酸二酯键连续偶联至少2个鸟嘌呤脱氧核糖核酸到cgt-odn上的形式，所述“cgt”中的胞嘧啶脱氧核糖核酸可以是甲基化的，也可是非甲基化的，所述cgt-odn核苷酸序列可以是拥有回文序列的，也可以是不具有回文序列的。
12、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列与seq id no:1-15任一所示的核苷酸序列具有至少90％、优选至少95％、优选至少96％、优选至少97％、优选至少97％、优选至少98％、优选至少99％的同一性。
13、在本专利技术使用的术语“同一性”是指通过在比对窗里比较两个最佳比对序列(例如，核酸序列)测定的数值，其中为了两个序列的最佳比对，比较窗中序列的部分与参照序列(其不包含添加或缺失)相比可以包含添加或缺失(即，缺口)。通过测定两个序列中存在相同核苷酸或氨基酸残基的位置的数目以产生匹配位置数目，将匹配位置的数目除以比较窗中位置的总数，并将结果乘以100以产生序列同一性百分比来计算百分比。与参照序列相比每个位置处相同的序列说成与参照序列是100％相同的，且反之亦然。
14、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列如seq id no:1-15任一所示。
15、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列如seq id no:1-9任一所示。
16、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列如seq id no:1、3、4、6、8任一所示。
17、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列如seq id no:4所示。
18、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列可以是天然源或人工合成的。
19、进一步，所述cgt-odn核苷酸序列具备cgt基序、cga基序、cgt+cga基序。
20、在一些实施方案中，所述cgt-odn核苷酸序列不限制具体生物来源，所述生物来源可包括任何可具备cgt-odn核苷酸序列通式结构的生物，具体包括但不限于细菌、本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种CGT-ODN核苷酸序列，其特征在于，所述CGT-ODN核苷酸序列如下所示：
2.根据权利要求1所述的CGT-ODN核苷酸序列，其特征在于，所述CGT-ODN核苷酸序列与SEQ ID NO:1-15任一所示的核苷酸序列具有至少90％、优选至少95％、优选至少96％、优选至少97％、优选至少97％、优选至少98％、优选至少99％的同一性；
3.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列；
4.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体，和药学上可接受的辅剂；
5.权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体、权利要求4所述的药物组合物在免疫调节中的应用；
6.权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体在用于制备治疗或预防感染性疾病、过敏性疾病、免疫缺陷性疾病、肿瘤的药物组合物中的应用。
7.权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载
8.权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体在抗体生产中的应用。
9.权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体在调控tRNA降解程度中的应用；
10.一种制备CGT-ODN相关抗体的方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1或2所述的CGT-ODN核苷酸序列、权利要求3所述的载体进行非人类动物免疫获得抗体；
...【技术特征摘要】
1.一种cgt-odn核苷酸序列，其特征在于，所述cgt-odn核苷酸序列如下所示：
2.根据权利要求1所述的cgt-odn核苷酸序列，其特征在于，所述cgt-odn核苷酸序列与seq id no:1-15任一所示的核苷酸序列具有至少90％、优选至少95％、优选至少96％、优选至少97％、优选至少97％、优选至少98％、优选至少99％的同一性；
3.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求1或2所述的cgt-odn核苷酸序列；
4.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1或2所述的cgt-odn核苷酸序列、权利要求3所述的载体，和药学上可接受的辅剂；
5.权利要求1或2所述的cgt-odn核苷酸序列、权利要求3所述的载体、权利要求4所...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘德培，张鹏，胡小青，李泽坤，陈厚早，
申请(专利权)人：中国医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：
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