通过靶向抑制内源贮藏蛋白增强植物种子中异源多肽的累积制造技术

本发明专利技术涉及增加植物种子中异源蛋白的累积水平的改进方法，通过靶向抑制与异源蛋白竞争有限资源，诸如氨基酸、核糖体结合位点以及参与翻译和翻译后加工的酶的作用的内源蛋白来用于分子耕作。本发明专利技术提供了利用反义“抑制”或双链ＲＮＡ－诱导的ＲＮＡ干预或转录后基因沉默（ＰＴＧＳ）来抑制通过转录激活大麦醇溶蛋白基因获得的大麦中的转录因子的表达的方法。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术属于植物分子生物学领域，且具体地涉及通过抑制竞争单子叶植物胚乳中种子贮藏蛋白的内源表达增加植物种子中异源蛋白表达的方法。
技术介绍
许多植物在发育种子的胚乳中表达和贮藏大量具有不同功能的蛋白，诸如各种贮藏蛋白，代谢酶，内源几丁质酶，蛋白合成抑制因子，蛋白酶抑制因子，淀粉酶，凝集素和过氧化物酶。胚乳中的贮藏蛋白诸如通常在许多单子叶作物中，可超过种子干重的15％。因此，在特定的发育阶段，种子胚乳中的细胞机构主要由这些特定蛋白的制备和贮藏所占据。此外，发现大多数贮藏蛋白基因在几天到几周的时间内以多拷贝形式存在，反映了这些蛋白快速累积的重要性。作物种子的发育胚乳中蛋白累积的固有生物学能力是指许多作物植物，尤其是单子叶植物具有作为用于大规模生产异源重组蛋白，例如用于制药工业的高价值多肽的实用和有效载体的潜能；这种生产方法通常称作分子耕作。此外，在种子中贮藏异源多肽减少了下游加工成本，因为这些种子可以贮藏好几年而不影响异源多肽的特性。这种蛋白的表达，优选在种子-特异性或胚乳-特异性启动子的调控下。当提高用于分子耕作的特定植物中异源蛋白的表达水平时，利用常规分子生物学策略，诸如合适本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种增强植物种子中目的异源多肽的表达和累积的方法，所述方法包括：（ａ）用种子－特异性启动子的ＤＮＡ序列转化植物细胞，所述启动子与编码一或多种转录调节因子（ＴＦ）或其部分，包括不同ＴＦ的嵌合组合可操作连接，调节一或多种编码种子贮藏蛋白 的内源基因的转录，其中所述序列的转录链能够抑制、延缓或减少所述植物细胞中一或多种所述种子贮藏蛋白的表达，和（ｂ）选择没有被（ａ）中所述转录调节因子识别的顺式作用元件的种子－特异性启动子，和（ｃ）用（ｂ）中的种子－特异性启动子 的ＤＮＡ序列转化（ａ）中的相同或其它的植物细胞，所述种子－特异性启动子与编码目的异源多肽的ＤＮＡ...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：比约登拉鲁斯奥瓦尔，
申请(专利权)人：奥夫莱夫塔埃克尼公司，
类型：发明
国别省市：IS[冰岛]