本发明专利技术公开了大豆蛋白GmVPS9a2在调控植物贮藏蛋白分选中的应用。本发明专利技术所提供的GmVPS9a2为：B1)氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质；B2)氨基酸序列为SEQ ID No.3的第1-465位的蛋白质；B3)在SEQ ID No.3或SEQ ID No.3的第1-465位氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由B1)或B2)衍生的蛋白质；B4)在B1)或B2)或B3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。实验证明，本发明专利技术的植物贮藏蛋白分选相关蛋白影响植物中贮藏蛋白的分选，可以用于培育贮藏蛋白分选正常的转基因植物。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术设及生物
中大豆蛋白GmVPS9a2在调控植物胆藏蛋白分选中的应 用。
技术介绍
大豆是重要的经济作物和粮食作物，含有大量的不饱和脂肪酸和多种必需氨基 酸，产量稳定，在我国各地都有种植。为人类提供了占世界植物蛋白供应市场70%左右的蛋 白质资源，由大豆加工的豆制品更是人类日常膳食的重要组成部分。在营养价值上，其氨基 酸组成与牛奶蛋白质相近，非常接近于理想蛋白的要求，可与动物蛋白等同，在基因结构上 最接近人体氨基酸，所W是最具营养的植物蛋白质，由其制作的饮品，被营养学家誉为"绿 色牛奶"。美国食品和药品管理局（FDA)的健康通告显示，每天食用含有25g大豆蛋白的食 品，有助减少屯、血管发病率。胆藏蛋白作为大豆巧粒中的第一大类营养物质，在很大程度上 决定了大豆的营养价值和各项蛋白质指标。 大豆胆藏蛋白占巧粒总蛋白含量的70%-80%，其中WllS和7S胆藏蛋白含量最 高，分别占种子蛋白的40%和30%，它们营养价值丰富，而且食品加工特性优良。细胞学的 研究也初步证实了7S和IlS胆藏蛋白的分选途径是一条W内质网为起点、中间经由高尔基 体，最终W蛋白胆藏液泡为沉积位点的转运线路。WllS球蛋白为例，首先在内质网中合成 一个前体分子，进入胆藏液泡后，会被液泡加工酶切割成酸性亚基和碱性亚基。
技术实现思路
本专利技术提供的是一个大豆蛋白GmVPS9a2在调控植物胆藏蛋白分选中的应用。 本专利技术所提供的胆藏蛋白分选相关蛋白GmVPS9a2在调控植物胆藏蛋白分选中的 应用中；所述胆藏蛋白分选相关蛋白GmVPS9a2为如下BI)或B2)或B3)或B4)的蛋白质： BI)氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质； B2)氨基酸序列为SEQ ID No.3的第1-465位氨基酸的蛋白质；[000引 B3)在SEQ ID No.3或SEQ ID No.3的第1-465位氨基酸序列中经过取代和/或缺失 和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由Al)或A2)衍生的蛋白质； B4)在BI)或B2)或B3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。其中，序列1由466个氨基酸组成。 为了使BI)和B2)中的蛋白质便于纯化，可在序列表中SEQ ID No.3或SEQ ID No.3 的第1-465位氨基酸所示的蛋白质的氨基末端或簇基末端连接上如表1所示的标签。[001^ 表1、标签的序列 「00131 上述B3)中的GmVPS9a2可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得 至1]。上述83)中的6111￥口59曰2的编码基因可通过将序列表中沈9 10齡.4或沈9 10齡.4的第 1-1395位核巧酸所示的DNA序列中缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或 几个碱基对的错义突变，和/或在其5/端和/或y端连上表1所示的标签的编码序列得到。 为解决上述技术问题，本专利技术还提供了与GmVPS9a2相关的生物材料在调控植物胆 藏蛋白分选中的应用。 本专利技术所提供的与GmVPS9a2相关的生物材料在调控植物胆藏蛋白分选中的应用 中，所述生物材料为下述Al)至A14)中的任一种： Al)编码GmVPS9a2的核酸分子；[001引A2)含有Al)所述核酸分子的表达盒； A3)含有Al)所述核酸分子的重组载体； A4)含有A2)所述表达盒的重组载体； A5)含有Al)所述核酸分子的重组微生物； A6)含有A2)所述表达盒的重组微生物； A7)含有A3)所述重组载体的重组微生物； A8)含有A4)所述重组载体的重组微生物； A9)含有Al)所述核酸分子的转基因植物细胞系； A10)含有A2)所述表达盒的转基因植物细胞系； All)含有Al)所述核酸分子的转基因植物组织； Al 2)含有A2)所述表达盒的转基因植物组织； A13)含有Al)所述核酸分子的转基因植物器官； A14)含有A2)所述表达盒的转基因植物器官。 上述与GmVPS9a2相关的生物材料在调控植物胆藏蛋白分选中的应用中，Al)所述 核酸分子可为如下al)或曰2)或曰3)或曰4)的基因： al)核巧酸序列是序列表中SEQ ID No.4的cDNA分子或DNA分子； a2)核巧酸序列是序列表中SEQ ID No.4的第1-1395位核巧酸的CDNA分子或DNA分 子； a3)与al)或曰2)限定的核巧酸序列具有75%或75%^上同一性，且编码6111￥?59曰2 的CDNA分子或基因组DNA分子； a4)在严格条件下与al)或曰2)限定的核巧酸序列杂交，且编码GmVPS9a2的CDNA分 子或基因组DNA分子。 其中，所述核酸分子可W是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA;所述核酸分子也可 W 是 RNA，如 mRNA 或 hnRNA 等。 其中，SEQ ID No.4由1401个核巧酸组成，编码沈Q ID No.3所示的蛋白质。 本领域普通技术人员可W很容易地采用已知的方法，例如定向进化和点突变的方 法，对本专利技术的编码GmVPS9a2的核巧酸序列进行突变。那些经过人工修饰的，具有与本专利技术 分离得到的GmVPS9a2的核巧酸序列75 %或者更高同一性的核巧酸，只要编码GmVPS9a2且具 有GmVPS9a2功能，均是衍生于本专利技术的核巧酸序列并且等同于本专利技术的序列。 运里使用的术语"同一性"指与天然核酸序列的序列相似性。"同一性"包括与本发 明的编码GmVPS9a2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的核巧酸序列具有75%或更高，或85% 或更高，或90%或更高，或95%或更高同一性的核巧酸序列。同一性可W用肉眼或计算机软 件进行评价。使用计算机软件，两个或多个序列之间的同一性可W用百分比（％)表示，其可 W用来评价相关序列之间的同一性。 上述与GmVPS9a2相关的生物材料在调控植物胆藏蛋白分选中的应用中，所述严格 条件是在2 X SSC，0.1 % SDS的溶液中，在68 °C下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5 X SSC， 0.1 % SDS的溶液中，在68 °C下杂交并洗膜2次，每次15min;或，0.1 X SSPE(或0.1 X SSC)、 0.1%SDS的溶液中，65°C条件下杂交并洗膜。 上述75%或75% W上同一性，可为80%、85%、90%或95% W上的同一性。 上述与GmVPS9a2相关的生物材料在调控植物胆藏蛋白分选中的应用中，A2)所述 的含有编码GmVPS9a2的核酸分子的表达盒(GmVPS9a2基因表达盒），是指能够在宿主细胞中 表达GmVPS9a2的DNA，该DNA不但可包括启动GmVPS9a2基因转录的启动子，还可包括终止 GmVPS9a2基因转录的终止子。进一步，所述表达盒还可包括增强子序列。可用于本专利技术的启 动子包括但不限于:组成型启动子，组织、器官和发育特异的启动子，和诱导型启动子。启动 子的例子包括但不限于:花挪菜花叶病毒的组成型启动子35S:来自西红柿的创伤诱导型启 动子，亮氨酸氨基肤酶（"LAP",Chao等人（1999)Plant Physiol 120:979-992);来自烟草的 化学诱导型启动子，发病机理相关I(PRl)(由水杨酸和BTH(苯并嚷二挫-7-硫本文档来自技高网...
【技术保护点】
贮藏蛋白分选相关蛋白GmVPS9a2在调控植物贮藏蛋白分选中的应用；所述贮藏蛋白分选相关蛋白GmVPS9a2为如下B1)或B2)或B3)或B4)的蛋白质：B1)氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质；B2)氨基酸序列为SEQ ID No.3的第1‑465位氨基酸的蛋白质；B3)在SEQ ID No.3或SEQ ID No.3的第1‑465位氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有相同功能的由A1)或A2)衍生的蛋白质；B4)在B1)或B2)或B3)的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白质。
【技术特征摘要】
...
【专利技术属性】
技术研发人员：邱丽娟，魏中艳，任玉龙，
申请(专利权)人：中国农业科学院作物科学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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