OX2受体的同系物制造技术

本发明专利技术涉及ＯＸ２受体的同系物。本发明专利技术还涉及编码哺乳动物，例如灵长类动物ＯＸ２的受体的核酸，纯化蛋白及其片段。还提供多克隆和单克隆抗体。描述了使用组合物用于诊断和治疗用途的方法。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
0X2受体的同系物本申请是申请日为2000年5月11日，申请号为00810289. 9，发 明名称为"0X2受体的同系物，，的专利技术专利申请的分案申请。专利
本专利技术涉及影响哺乳动物生理学，包括免疫系统功能的组合物和 方法。特别是，它提供可以调节发育和/或免疫系统的试剂或方法。还 描述了这些材料的诊断和治疗用途。专利技术背景0X2抗原(0X2)是一种在各种细胞，包括胸腺细胞，B淋巴细胞， 活化的T淋巴细胞，神经元，内皮细胞，和滤泡树突细胞上鉴定的细 胞表面蛋白。Barclay (1981) Immunology 44: 727—736。序列分析表明， 它是一种包含两种胞外免疫球蛋白-样(Ig-样)区和短胞质区的跨膜 蛋白。Clark等，(1985 ) EMB0 J. 4: 113-118。此区的构成较普通且 可以在多种不同的白细胞表面蛋白中找到。Barclay等，(1997 ) Leucocyte Antigens Factsbook (2d. ed.) Academic Press， 伦敦'这 些类型的蛋白常常与其它也具有Ig-样区的细胞表面上的其它蛋白相 互作用。0X2抗原的分布与一种假^C相一致，即0X2通过结合配偶体，例如 0XZ受体(0X210，交换信号至白细胞谱系内的细胞内，其,中该白细胞 谱系包括巨嗜细胞，其表达受体(Preston等，(1997 )Eur. J. Immunol, 27:1911-1918)，和单核细胞-巨嗜细胞谙系的其它细胞。且，0X2还 可能参与在巨嗜细胞各种功能的调节。在此情况中，例如，0X2在神经 元上的表达可以建立了一种可以表达0X2R的，被称作小胶质细胞的脑 停留巨嗜细胞的直接通讯方法，因为它们来源于单核细胞-巨嗜细胞谱 系。Perry和Gordon (1988) Trends Neurosci. 11: 273-277。通常，巨嗜细胞的缺损或过度活化造成免疫疾病和其它疾病的广 范围发病。见，例如，McGee等，(eds.1992 ) Oxford Textbook of Pathology Oxford University Press, Oxford., Lewis 和 McGee (eds. 1992)The Macrophage IRL Press,0xfordj和 Bock和 Goode (eds. 1997)The Molecular Basis of Cellular Defence Mechanisms Wiley & Sons,且，OX2的相互作用蛋白，例如，0X2抗原的0X2R的鉴定较困难， 这是因为相互作用的亲和力通常非常低.这意味着细胞表面蛋白的重 组形式，例如，0X2,与其结合配偶体，相互作用的蛋白，例如，0X2R 的结合不够稳定，以致不能用普通方法检测。因而，CD48和CD2间的 相互作用，它们的配偶体在其胞外区均含两个Ig-样区，具有第二部 分的半衰期。见，Van der Merwe等，(1993) Biochem. Soc. Trans. 21:340S;和Van der Merve和Barclay (1994) Trends Biochem. Sci. 19:354-358'细胞表面蛋白，如0X2的重组形式可以通过很多方法制成多价 体，并用于检测新的蛋白.已经用基因工程方法改造了 0X2，以包括 来源于CD4的两个Ig-样区的标记物.重组可溶性蛋白是通过常规表 达方法在真核细胞中表达的.在早期的研究中，相互作用是在荧光颗 粒和小鼠巨嗜细胞上的多价重组OX2蛋白间观察的。Preston等， (1997) Eur. .T. Immunol. 27:1911-1918。尽管如此，通过阻断抗体0X89,在小鼠巨嗜细胞上筌定0X2R还 未成功。Preston等，(1997) Eur. .T. Inununol. 27:1911-1918。如前所述，新的0X2-样分子受体的发现，鉴定，和理解是非常有 利的。本专利技术提供0X2配位体新的受休同系物，和相关的化合物，及 它们的使用方法。专利技术概述本专利技术涉及被称作0X2的配位体的新受体同系物，例如，啮齿类 动物和灵长类动物的实施方案。这些通常被称作0X2的受体同系物 (0X2RH),有来源于各种啮齿类动物和灵长类动物物种的实施方案。 已经建立了两种确实结合各物种0X2的受体同系物.特别是，提供被 称作0X2RH1， OX2RH2， 0X2RH3，和OX2RH4的同系物的描述。它包括编 码多肽自身的核酸，和它们的生产和使用方法.本专利技术核酸的特征部 分在于，它与本专利技术所包括的克隆互补DNA(cDNA)序列的同源性。本专利技术人已经生产出了一种新的，大鼠巨嗜细胞上0X2R的单克 隆抗体(mAb)，称作0X102，其阻断0X2和0X2R之间的相互作用。 它们已经被分离并表征大鼠0X2R的基因和多肽.其中提供大鼠0X2R 的核酸分子和多肽(预测的氨基酸序列)的序列。从相似蛋白类推， 本专利技术人教导人类0X2R的核苷酸和氨基酸序列与相应大鼠的0X2R序列至少50%同源。大鼠0X2R cDNA和预测的0X2R多肽序列的有效性 能够鉴定等价的人类0X2R序列，或者通过筛选已知的人类序列，或 通过细胞杂交或PCR技术分离人类的核酸.大的胞质序列在0X2R多肽中的存在表明0X2R在巨嗜细胞功能中 具有某些作用，信号产生或与胞质成分相互作用 因而，本专利技术提供 基于OX2R的试剂，其模拟或识别OX2R的多肽或核酸序列，例如被设 计与OXM结合位点反应的分子实体，相对于OX2R或反义序列培养的 mAbs,该试剂构成治疗上有效的化合物，用于修饰携带0X2和/或()X2R 细胞表面蛋白的细胞(例如，巨嗜细胞，活化的淋巴细胞，神经元， 内皮细胞，树突细胞，胸腺细胞，和B淋巴细胞)的功能，提高或抑 制细胞的活性。因而，基于OX2R的试剂，其模拟或者识别0X2R的多 肽或核酸序列，具有潜在的，控制巨嗜细胞较宽范闺的功能，包括对 细菌感染，自身免疫疾病等应答的作用，因为0X2R的胞外区与0X2相互作用，因而本专利技术人提供一种筛 选影响(积极地或消极地)0X2和0X2R间结合的侯选化合物的方法。 因此，本专利技术提供的OX2R可用于检测抑制0X2和0X2R间相互作用的 化合物，并因此可能影响巨嗜细胞和免疫系统其它细胞，如淋巴细胞 或滤泡树突细胞间的相互作用。大鼠OX2R的核酸和氨基酸序列在表1中列出。下面陈迷本专利技术 的各个方面.根据详细的描述，其它方面是很清楚的。因此，在第一方面中，本专利技术提供一种含多肽的物质，该多肽具 有表1中列出的氨基酸序列。在另一方面中，本专利技术提供一种含多肽的物质，该多肽至少50% 的氨基酸序列与表l中列出的氨基酸序列相同。在另一方面中，本专利技术提供一种多肽，其是上述多肽的突变体， 变体，衍生物或等位基因，且其具有全长0X2R的特性，例如，与0X2 或全长0X2R抗体的结合能力。在另一方面中，本专利技术提供一种物质，其是上迷多肽的片段(例 如，具有表1中列出的氨基酸序列的多肽片段)，该片段显示全长0X2R 蛋白的特性.例如，该片段可以与0X2蛋白或全长0X2R蛋白的抗体 结合。在其中一个实施方案中，该片段包括部分本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的或重组的聚核苷酸，其编码含ＳＥＱ　　ＩＤ　　ＮＯ：２、４、６、８、１０、１２、２０或２３所示的成熟多肽的多肽。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：AN巴克莱，MH布朗，DM戈尔曼，LL拉尼尔，GJ赖特，H切尔温斯基，JH菲利普斯，RM赫克，JD塞德维克，
申请(专利权)人：医疗研究局，先灵公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]