一种星孢菌素类化合物的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种星孢菌素类化合物在制备治疗癌症、炎症或艾滋病的药物中的应用。本发明专利技术化合物为从一种放线菌中分离纯化得到，经鉴定为星孢菌素类化合物，经功能研究发现，这些化合物对前列腺癌细胞具有较高的活性，同时还对Brd4蛋白具有较高的抑制作用，说明本发明专利技术化合物在制备治疗肿瘤、HIV、白血病等疾病的药物方面具有良好的应用前景。

Application of a kind of actinomycin

The invention discloses an application of an actinomycin compound in the preparation of drugs for the treatment of cancer, inflammation or AIDS. The compounds of the invention are from an actinomycete isolated and purified, identified as staurosporine compounds, the function of the study found that these compounds have higher activity in prostate cancer cells, but also has higher inhibitory effect on Brd4 protein, that has a good application prospect in drug disease, the compounds of the present invention in preparation for treatment of tumors, HIV, leukemia etc..

【技术实现步骤摘要】
一种星孢菌素类化合物的应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种星孢菌素类化合物的应用。
技术介绍
癌症是危害人类生命健康的重大疾病之一，具有病程长死亡率高的特点。前列腺癌是一种常见于男性泌尿生殖系统的恶性肿瘤，其发病率在西方欧美国家居所有男性肿瘤之首，死亡率仅次于肺癌，居第二位。与西方国家相比，我国前列腺癌的发病率明显偏低，但近年来由于受各种因素的影响而呈显著增长态势。世界卫生组织报告，2012年全球癌症患者和死亡病例都在持续地增加，新增癌症病例有近一半出现在亚洲，其中大部分在中国，中国新增癌症病例高居第一位。因此，癌症的预防和治疗至关重要。星孢菌素(STA)最早是从土壤放线菌中分离得到的吲哚咔唑类化合物，之后陆续从多种海洋放线菌和无脊椎动物中发现。研究表明蛋白激酶C(PKC)是介导肿瘤细胞增殖、分化、凋亡及血管生成的信号通路中发挥至关重要的作用，PKC已经成为抗肿瘤治疗的一个靶点。STA为强PKC抑制剂(IC50＝2.7nM)，主要作用于细胞信号转导通路中各种激酶、拓扑异构酶以及细胞周期调控因子，但随后证明为广谱的激酶抑制剂，选择性差，因而无法成药。而多个星孢菌素的衍生物目前正作为抗肿瘤药物处于临床研究。天然来源的星孢菌素衍生物UCN-01目前处于治疗乳腺癌和淋巴癌的II期临床研究。结构修饰得到的星孢菌素衍生物PKC-412处于急性髓性白血病的临床Ⅲ期，非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴白血病的临床Ⅱ期；口服lestaurtinib已经于2006年由FDA批准作为治疗急性髓细胞白血病的孤儿药；CEP-2563已经完成了治疗实体瘤的Ⅰ期临床研究；Enzastaurin正处于治疗淋巴瘤的Ⅲ期临床研究。上述实例表明，星孢菌素类化合物具有广阔的成药前景。BRD4蛋白隶属于溴结构域蛋白家族中的BET亚家族，全长共1362个氨基酸残基，其氮端的第一个溴结构域，即BRD4(44-168)。它能识别结合乙酰化修饰的赖氨酸，并因此特异性地调控DNA甲基化、染色质重建和翻译相关的核小体的转录后修饰，从而进一步调控基因表达。BRD4是一个十分有潜力的药物靶标，大量文章报道显示BRD4是肿瘤、HIV和白血病等疾病治疗的很有前景的靶点。
技术实现思路
本专利技术通过对放线菌进行研究，分离纯化得到5种星孢菌素类化合物。一种星孢菌素类化合物在制备治疗癌症、炎症或艾滋病的药物中的应用，所述星孢菌素类化合物的结构式为式I或式Ⅱ结构：R1＝H或Me；R2＝OH、N(Me)COH或N(Me)COMe；R3＝O或NOH。所述星孢菌素类化合物的结构式为以下五种中的一种：所述癌症为前列腺癌、结肠癌、非小细胞肺癌、白血病、肝癌、肾癌、甲状腺癌、皮肤癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、间皮瘤或者外周神经鞘膜瘤。所述癌症为前列腺癌。所述炎症为关节炎或皮肤炎。本专利技术又提供了一种星孢菌素类化合物在制备Brd4蛋白抑制剂中的应用，所述星孢菌素类化合物的结构式为式I或式Ⅱ结构：R1＝H或Me；R2＝OH、N(Me)COH或N(Me)COMe；R3＝O或NOH。Brd4蛋白是肿瘤、HIV和白血病等疾病治疗的很有前景的靶点，说明本专利技术化合物在制备治疗肿瘤、HIV和白血病等疾病的药物中具有良好的应用前景。所述星孢菌素类化合物的结构式为以下五种中的一种：本专利技术化合物为从一种放线菌中分离纯化得到，经鉴定为星孢菌素类化合物，经功能研究发现，这些化合物对前列腺癌细胞具有较高的活性，同时还对Brd4蛋白具有较高的抑制作用，说明本专利技术化合物在制备治疗肿瘤、HIV、白血病等疾病的药物方面具有良好的应用前景。附图说明图1为化合物1的结构式示意图。图2为化合物2的结构式示意图。图3为化合物3的结构式示意图。图4为化合物4的结构式示意图。图5为化合物5的结构式示意图。具体实施方式菌种来源放线菌为链霉菌(Streptomycessp.)，保藏号为CICCNo.172617，购买自位于北京市朝阳区酒仙桥中路24号院6号楼的中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)，订购网址：http://www.china-cicc.org/。培养基高氏一号液体培养基：以发酵培养基1L计，可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，加水至1L，调pH7.2。高氏一号固体培养基：以发酵培养基1L计，可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，12g琼脂，加水至1L，调pH7.2。大米培养基：大米和海盐水按以下质量体积比：大米40g，25％的海盐水60mL，即大米∶25％的海盐水＝40g∶60mL。实施例11、种子液将上述链霉菌接种于含有250mL液体培养基的500mL锥形瓶中，每瓶含250mL高氏一号液体培养基，在摇床中28℃下以180rpm振荡培养4天，获得种子液。2、发酵以每瓶接种8mL的量将上述种子液接种到大米发酵培养基(由以下重量组分制成：大米40g，25％的海盐水60mL)中，28℃静置培养60天后终止发酵。3、粗提每瓶固体发酵物用EA(乙酸乙酯)约300mL浸泡过夜，三层纱布过滤除去菌丝体，收集滤液，减压浓缩得粗提物(油状浸膏)。4、分离纯化粗提物用90％甲醇水溶解，等体积石油醚萃取三遍后，90％甲醇水相减压浓缩得到醇相，甲醇相用甲醇溶解后，经1200rpm离心8min后，采用SephadexLH-20凝胶柱色谱进行分离，洗脱溶剂为含甲醇体积分数20％～100％的水溶液，TLC分析后将相似流分合并，共得到14个组分Fr.A～Fr.N。Fr.J(365.0mg)经中压制备液相色谱梯度洗脱210min(洗脱溶剂为含甲醇加酸体积分数50％～100％的水溶液，流速为10mL/min，检测波长为292nm)，每隔10min接一流分，TLC分析后将相似流分合并得到3组分Fr.J-1～Fr.J-3。Fr.J-3经高压制备液相色谱梯度洗脱70min(洗脱溶剂为含乙腈体积分数40％～60％的水溶液，流速为10mL/min，检测波长为292nm)，得到化合物1(1.5mg，tR＝29min)、4(6.2mg，tR＝43min)和5(9.5mg，tR＝45min)。Fr.I(299.8mg)经中压制备液相色谱梯度洗脱210min(洗脱溶剂为含甲醇加酸体积分数50％～100％的水溶液，流速为10mL/min，检测波长为292nm)，每隔10min接一流分，TLC分析后将相似流分合并得到3组分Fr.I-1～Fr.I-3。Fr.I-2经高压制备液相色谱梯度洗脱60min(洗脱溶剂为含乙腈体积分数40％～60％的水溶液，流速为10mL/min，检测波长为292nm)，得到化合物2(2.5mg，tR＝33min)和3(1.2mg，tR＝22min)。实施例2(1)化合物1结构鉴定白色粉末(CH3OH)，紫外光下有蓝紫色荧光。根据1H和13CNMR数据推测其分子式为C29H26N4O4，1HNMR(CD3OD，400MHz)：δH7.26(1H，d，J＝7.8Hz，H-1)，7.49(1H，brt，H-2)，7.39(1H，brt，H-3)，9.43(1H本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种星孢菌素类化合物在制备治疗癌症、炎症或艾滋病的药物中的应用，所述星孢菌素类化合物的结构式为式I或式Ⅱ结构：

【技术特征摘要】
1.一种星孢菌素类化合物在制备治疗癌症、炎症或艾滋病的药物中的应用，所述星孢菌素类化合物的结构式为式I或式Ⅱ结构：R1＝H或Me；R2＝OH、N(Me)COH或N(Me)COMe；R3＝O或NOH。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述星孢菌素类化合物的结构式为以下五种中的一种：3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述癌症为前列腺癌、结肠癌、非小细胞肺癌、白血病、肝癌、肾癌、甲状腺癌、皮肤癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌...

【专利技术属性】
技术研发人员：马忠俊，周彪，丁婉婧，刘美星，
申请(专利权)人：杭州科兴生物化工有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33