一种抗大肠杆菌细胞株及重组单链抗体及其制备方法技术
An anti Escherichia coli cell strain and recombinant single chain antibody and its preparation method
The present invention relates to an anti Escherichia coli cell strain and a recombinant single chain antibody and a preparation method. The antigen epitopes of Escherichia coli OmpA protein were synthesized, and the monoclonal antibody was prepared by immunized mice to produce the cell line C208 of the monoclonal antibody. Extraction of C208 RNA cells, reverse transcription cDNA, were amplified using the antibody variable region of heavy chain PCR (VH) and light chain variable region (VL) with DNA (Gly4, Ser) 3linker connect VH and VL into Pichia pastoris in vivo expression was induced by methanol. The results of ELISA assay showed that the isolated gene engineered single chain antibody against Escherichia coli could be specifically associated with Escherichia coli.
【技术实现步骤摘要】
一种抗大肠杆菌细胞株及重组单链抗体及其制备方法
本专利技术属于生物工程领域，尤其涉及一种抗大肠杆菌重组单链抗体及其制备方法，以及编码该单链抗体的基因，含有该基因的载体和宿主细胞等。
技术介绍
大肠杆菌(Escherichiacoli，E.coli)，又称大肠埃希氏菌，是一种革兰氏阴性细菌，广泛存在于生物体内，包括植物、人及其它温血动物体内。作为一种机会致病菌，大肠杆菌在健康肠道内通常不会危害宿主健康，但其仍具有引起腹泻和肠道外疾病的能力，如溶血性尿道综合征、脑膜炎及败血症等。根据其毒力因子、致病机理、致病性、临床特征及流行病特征，将致病性大肠杆菌分为以下几类，包括肠致病性大肠杆菌(EnteropathogenicE.coli，EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(EnterotoxigenicE.coli，ETEC)、肠侵袭性大肠杆菌(EnteroinvasiveE.coli，EIEC)、肠出血性大肠杆菌(EnterohemorrhagicE.coli，EHEC)、产志贺毒素大肠杆菌(Shigatoxin-producingE.coli，STEC)、肠黏附性大肠杆菌(En...
【技术保护点】
一种抗大肠杆菌细胞株及重组单链抗体及其制备方法，其特征在于抗大肠杆菌杂交瘤细胞株C208对外膜蛋白OmpA及大肠杆菌都有较高的亲和力；大肠杆菌重组单链抗体可变区C208 scFV的编码基因序列如SEQ ID NO：1所示，其中重链可变区编码基因序列如SEQ ID NO：2所示，轻链可变区编码基因序列如SEQ ID NO：3所示。
【技术特征摘要】
1.一种抗大肠杆菌细胞株及重组单链抗体及其制备方法，其特征在于抗大肠杆菌杂交瘤细胞株C208对外膜蛋白OmpA及大肠杆菌都有较高的亲和力；大肠杆菌重组单链抗体可变区C208scFV的编码基因序列如SEQIDNO：1所示，其中重链可变区编码基因序列如SEQIDNO：2所示，轻链可变区编码基因序列如SEQIDNO：3所示。2.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：王建华，管庆丰，滕达，王秀敏，毛若雨，王潇，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11
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