一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法技术

本发明专利技术公开了一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备提取大豆胰蛋白酶抑制剂初级上清液；(2)制备提取大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物；(3)对大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物进行透析、纯化和洗脱后得到最终的大豆胰蛋白酶抑制剂。本发明专利技术通过对大豆浆液过滤、浸提并通过离心处理，能有效的确保大豆中的胰蛋白酶抑制剂分子不会流失；同时采用了分子的物理分离的方法来提取大豆胰蛋白酶抑制剂的粗提物，能更好的保护胰蛋白酶抑制剂分子不被破坏，有效的提高了大豆中胰蛋白酶抑制剂提供的质量，从而确保了胰蛋白酶抑制剂的质量、使用效果。

A method of extracting trypsin inhibitor from soybean

The invention discloses a method for extraction of soybean trypsin inhibitor, characterized by comprising the following steps: (1) preparation of extraction of soybean trypsin inhibitor primary supernatant; (2) preparation of extraction of soybean trypsin inhibitor extracts; (3) of soybean trypsin inhibitor extracts by dialysis, purification and elution is obtained after the final soybean trypsin inhibitor. The present invention by the Soybean Milk extraction liquid is filtered, and through centrifugal treatment, can effectively ensure that the soybean trypsin inhibitor molecules do not loss; while using the method of physical separation of the molecule to the extraction of soybean trypsin inhibitor extracts, trypsin inhibitor molecules can better protect effectively was not destroyed. To improve the quality of the soybean trypsin inhibitors provide, so as to ensure the quality and the use effect of trypsin inhibitor.

【技术实现步骤摘要】
一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法
本专利技术涉及一种胰蛋白酶抑制剂的提取方法，具体是指一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法。
技术介绍
大豆既是重要的粮食作物，又是主要的油料作物，还被用于畜禽饲料、食品和轻工业生产原料。而进年来，经科学家研究发现，大豆中所含的胰蛋白酶抑制剂不仅是一种能对人类的健康起到重要作用的保健品，而且在医学上也有着重要意义，具体的说大豆胰蛋白酶抑制剂在抗肿瘤、治疗糖尿病和调节胰岛素失调等方面都能起到重要的作用。目前，科研人员多采用离子分离法来提取大豆胰蛋白酶抑制剂，这种方法是先将大豆浸泡液通过电解使阴离子和阳离子交换柱层析分离，然后对获得的各组分进行活性测定、SDS凝胶电泳和等电聚焦电泳分析，最后再次通过电解对大豆的离子进行分离后得到胰蛋白酶抑制剂。然而，这种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法存在容易破坏胰蛋白酶抑制剂分子的问题，导致提取的胰蛋白酶抑制剂质量较差，致使胰蛋白酶抑制剂的使用效果不理想。因此，提供一种既能保护胰蛋白酶抑制剂分子，又能提高提取效率的大豆胰蛋白酶抑制剂提取方法便是当务之急。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有的大豆胰蛋白酶抑制剂提取方法存在容易本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备大豆胰蛋白酶抑制剂初级上清液；该初级上清液的具体制备步骤为：(1.1)取干大豆加水浸泡过夜后磨碎并充分混匀成浆液；(1.2)将步骤(1.1)中得到的浆液搅拌后加入柠檬酸钠与磷酸三钠组成的混合溶液并用3层以上的纱布过滤，得到滤液和豆渣；(1.3)在步骤(1.2)得到的滤液中，以2‑5：1.5的比例添加柠檬酸钠和磷酸三钠，直至滤液PH值达到4.5～6.0，对添加柠檬酸钠和磷酸三钠后的滤液进行浸提并水浴，水浴后离心去除杂蛋白，得到初级上清液；(2)制备大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物；该大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的具体制备步骤为：(2.1)...

【技术特征摘要】
1.一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备大豆胰蛋白酶抑制剂初级上清液；该初级上清液的具体制备步骤为：(1.1)取干大豆加水浸泡过夜后磨碎并充分混匀成浆液；(1.2)将步骤(1.1)中得到的浆液搅拌后加入柠檬酸钠与磷酸三钠组成的混合溶液并用3层以上的纱布过滤，得到滤液和豆渣；(1.3)在步骤(1.2)得到的滤液中，以2-5：1.5的比例添加柠檬酸钠和磷酸三钠，直至滤液PH值达到4.5～6.0，对添加柠檬酸钠和磷酸三钠后的滤液进行浸提并水浴，水浴后离心去除杂蛋白，得到初级上清液；(2)制备大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物；该大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的具体制备步骤为：(2.1)将初级上清液加热，并在上清液中添加硫酸铵，直至硫酸铵浓度30％，搅拌后得到次级搅拌液；(2.2)将次级搅拌液用滤纸过滤去脂，并将滤液静置过夜，即可得到粗提上清液；(2.3)在粗提上清液中加入硫酸铵，直至硫酸铵浓度50％，搅拌沉淀后得到大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物；(3)对大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物进行透析、纯化和洗脱后得到最终的大豆胰蛋白酶抑制剂的制备步骤为：(3.1)将大豆胰蛋白酶抑制剂粗提物热溶，并在该热溶后的粗提物中加入平衡液，搅拌过夜后得到透析液；(3.2)通过磷酸盐缓冲液和戊二醇以及磷酸缓冲液对透析液进行亲和层析住纯化，得到纯化液；(3.3)通过洗脱缓冲液对纯化液进行洗脱，并最终得到胰蛋白酶抑制剂。2.一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，步骤(1.1)中的水选用50℃的去离子水，且去离子水与大豆的重量比例为5-7：3；步骤(1.2)的混合溶液中的柠檬酸钠为10～100mM，磷酸三钠为10～100mM，且柠檬酸钠与磷酸三钠的重量比例...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾雪荣，张文宝，王亚周，
申请(专利权)人：成都晟博源生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51