一种生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系及其建立方法技术
Gene engineering cell line for producing non glycosylated glycosylation protein and method for establishing the same
The present invention discloses a genetically engineered cell line for producing no fucose protein and a method for establishing the same. The present invention utilizes CRISPR/Cas9 technology to knock out Slc35c1 gene and / or Fut8 gene in host cell, and obtains stable gene engineering cell line of Slc35c1 gene silence and / or Fut8 gene silence. Can produce the complete removal of fucosylated proteins by gene engineering cell line of the invention, and the 30 generation times remained stable, solve the incomplete and unstable passage of two problems in the existing technology of fucosylated removal. The antibodies produced by the method without the presence of fucose show enhanced ADCC activity, thereby enhancing the clinical therapeutic effect of antibodies.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物工程
，涉及一种可以生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系及其建立方法。技术背景自从1986年批准第一个抗体药物以来，抗体类药物已经过30多年的蓬勃发展，由于抗体药物具有高度的靶向性、特异性、专一性等明显优势，治疗领域也从传统的癌症、自身免疫性疾病逐步扩展到抗感染、代谢性疾病以及心血管疾病的诊治方面等，并取得了瞩目的疗效，在其改善患者生存质量的同时，也创造了巨大的经济效益。针对肿瘤的抗体除了阻断靶点介导的信号转导从而诱导细胞凋亡外，更多的治疗性抗体通过以下效应功能发挥治疗作用：细胞依赖的细胞毒性作用(antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity，ADCC)、细胞依赖的吞噬作用(antibody-dependentcellularphagocytosis，ADCP)、补体依赖的细胞毒性作用(complement-dependentcytotoxicity，CDC)等。细胞依赖的细胞毒性作用(ADCC)是指表达抗体Fc受体(如FcγRIIIa)的自然杀伤细胞(NK)、巨噬细胞或中性粒细胞等，通过Fc...
【技术保护点】
一种生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系，其特征在于，所述基因工程细胞系是Slc35c1基因沉默、和/或Fut8基因沉默的细胞系。
【技术特征摘要】
1.一种生产无岩藻糖基化蛋白的基因工程细胞系，其特征在于，所述基因工程细胞系是Slc35c1基因沉默、和/或Fut8基因沉默的细胞系。2.根据权利要求1所述的基因工程细胞系，其特征在于，所述蛋白是含有Fc区的蛋白。3.根据权利要求2所述的基因工程细胞系，其特征在于，所述基因工程细胞系中含有编码含有Fc区的蛋白的核苷酸序列。4.根据权利要求1所述的基因工程细胞系，所述基因工程细胞系含有Cas9基因序列。5.根据权利要求1所述的基因工程细胞系，所述基因工程细胞系含有针对Slc35c1基因的sgRNA的基因序列、和/或含有针对Fut8基因的sgRNA的基因序列。6.权利要求1-5中任一项所述的基因工程细胞系的建立方法，其特征在于，所述建立方法包括如下步骤：敲除细胞中的Slc35c1基因、和/或Fut8基因，...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵健，魏化伟，黄亚杰，
申请(专利权)人：江苏东抗生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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