一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，解决了现有技术中枯草芽孢杆菌的培养产量低、成本高、易污染的问题。本发明专利技术的制备方法包括以下步骤：步骤1：按重量份称取原料：所述原料以发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：糖40‑60g/L，甘油10‑20g/L，玉米淀粉10‑14g/L，蛋白胨12‑24g/L，氨基酸2‑5g/L，金属离子化合物以金属离子计0.6‑1.0g/L，所述金离离子为铝离子、钾离子、锌离子、镁离子和亚铁离子中的一种或多种；步骤2：将上述组份依次溶解后，调节pH值；步骤3：灭菌，备用，即得。本发明专利技术方法工艺简单，操作简便，生产成本低，大大提高了枯草芽孢杆菌的产量。

Preparation method of Bacillus subtilis fermentation medium

The invention discloses a method for preparing a fermentation medium for Bacillus subtilis, which solves the problems of low yield, high cost and easy pollution of Bacillus subtilis in the prior art. The preparation method of the invention comprises the following steps: Step 1: according to weight weighed raw materials: the raw materials in the fermentation medium volume, which comprises the following components: the content of sugar 40 60g/L, glycerol 10 20g/L 10 14g/L, corn starch, peptone 12 24g/L, 2 amino acids 5g/ L, metal ion compounds with metal ions of 0.6 1.0g/L, the metal ion is one or more aluminum ions, potassium ion, zinc ion, magnesium ion and ferrous ion; step 2: the above components are dissolved, adjusting the pH value; step 3: sterilization, standby, i.e.. The method has the advantages of simple process, simple operation and low production cost, and greatly improves the yield of Bacillus subtilis.

【技术实现步骤摘要】
一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法
本专利技术属于农业发酵
，具体涉及一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法。
技术介绍
枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)，是芽孢杆菌属的一种，为革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。枯草芽孢杆菌为需氧菌，可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。枯草芽孢杆菌耐热抗逆性强，在土壤和植物的表面普遍存在。是植物体内常见的一种内生菌，对人畜无毒无害，不污染环境。生长速度快、营养需求简单，在植物的表面易于存活、定殖与繁殖，生产工艺简单，制剂稳定，施用方便，储存期长。枯草芽孢杆菌是一种理想的生防微生物，其对植物病菌的作用机制和方式是多样的，通过竞争作用、抗生作用、溶菌作用和促进植物生长等方面发挥抗病抑菌的作用。目前枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时能够在作物根际或体内定殖，并起到特定肥料效应。目前，以枯草芽孢杆菌制备的微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收，净化和修复土壤，降低农作物病害发生，促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用、保护环境、以及提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用。但是在现有技术中枯草芽孢杆菌的培养仍然存在产量低、成本高的问题，同时还存在易污染的问题。因此，提供一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，制备出一种能降低生产成本，增加产量、不易污染的发酵培养基，成为了本领域技术人员亟待解决的问题。专利
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：提供一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，解决现有技术中枯草芽孢杆菌的培养产量低、成本高、易污染的问题。本专利技术采用的技术方案如下：本专利技术所述的一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤1：按重量份称取原料：所述原料以发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：糖40-60g/L，甘油10-20g/L，玉米淀粉10-14g/L，蛋白胨12-24g/L，氨基酸2-5g/L，金属离子化合物以金属离子计0.6-1.0g/L，所述金离离子为铝离子、钾离子、锌离子、镁离子和亚铁离子中的一种或多种；步骤2：将上述组份依次溶解后，调节pH值；步骤3：灭菌，备用，即得。进一步地，所述糖为葡萄糖、蔗糖或糖蜜。进一步地，所述蛋白胨为胰蛋白胨、大豆蛋白胨和鱼胨中的一种或多种。进一步地，所述氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸中的一种或两种组合。进一步地，所述铝离子以硫酸铝的形式添加，所述钾离子以氯化钾的形式添加，所述锌离子以硫酸锌的形式添加，所述镁离子以七水硫酸镁的形式添加，所述亚铁离以七水硫酸亚铁的形式添加。进一步地，所述pH值为5.0-6.5。进一步地，所述步骤2中于60－80℃加热溶解。与现有技术相比，本专利技术具有的有益效果为：本专利技术方法工艺简单，操作简便，条件易于控制，生产成本低。采用本专利技术方法制得的发酵培养基能够快速有效地培养枯草芽孢杆菌，提高枯草芽孢杆菌的产量，有效降低枯草芽孢杆菌的生产成本，且在生产过程中不会产生二次污染。本专利技术值得推广应用。具体实施方式以下具体实施方式可以对本专利技术的内容做出更为详细的说明，但本专利技术的主题范围不局限于以下具体实施例，凡是基于本
技术实现思路
所实现的技术、工艺均属于本专利技术的范围。本专利技术所述的一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤1：按重量份称取原料：所述原料以发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：糖40-60g/L，甘油10-20g/L，玉米淀粉10-14g/L，蛋白胨12-24g/L，氨基酸2-5g/L，金属离子化合物以金属离子计0.6-1.0g/L，所述金离离子为铝离子、钾离子、锌离子、镁离子和亚铁离子中的一种或多种；步骤2：将上述组份依次溶解后，调节pH值；步骤3：灭菌，备用，即得。进一步地，所述糖为葡萄糖、蔗糖或糖蜜。进一步地，所述蛋白胨为胰蛋白胨、大豆蛋白胨和鱼胨中的一种或多种。进一步地，所述氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸中的一种或两种组合。进一步地，所述铝离子以硫酸铝的形式添加，所述钾离子以氯化钾的形式添加，所述锌离子以硫酸锌的形式添加，所述镁离子以七水硫酸镁的形式添加，所述亚铁离以七水硫酸亚铁的形式添加。进一步地，所述pH值为5.0-6.5。进一步地，所述步骤2中于60－80℃加热溶解。实施例1一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基，以该发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：葡萄糖50g/L，甘油16g/L，玉米淀粉12g/L，胰蛋白胨18g/L，谷氨酸3g/L，硫酸铝以铝离子计0.8g/L。一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤1：按重量份称取上述原料；步骤2：将上述组份依次加蒸馏水于80℃加热溶解后，调节pH值为5.0；步骤3：蒸汽灭菌，备用，即得。实施例2一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基，以该发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：蔗糖30g/L，糖蜜30g/L，甘油20g/L，玉米淀粉10g/L，大豆蛋白胨18g/L，鱼胨12g/L，天冬氨酸3g/L，氯化钾以钾离子计0.5g/L，硫酸锌以锌离子计0.5g/L。一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤1：按重量份称取上述原料；步骤2：将上述组份依次加蒸馏水于60℃加热溶解后，调节pH值为6.5；步骤3：蒸汽灭菌，备用，即得。实施例3一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基，以该发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：蔗糖40g/L，甘油10g/L，玉米淀粉10g/L，鱼胨12g/L，天冬氨酸2g/L，谷氨酸3g/L，七水硫酸镁、七水硫酸亚铁以金属离子计分别为0.3g/L。一种枯草芽孢杆菌的发酵培养基的制备方法，包括以下步骤：步骤1：按重量份称取上述原料；步骤2：将上述组份依次加蒸馏水于70℃加热溶解后，调节pH值为5.5；步骤3：蒸汽灭菌，备用，即得。实施例4采用实施例1制得的发酵培养基进行枯草芽孢杆菌的培养，其培养方法如下：步骤1：种子培养：取枯草芽孢杆菌的菌种接种于装有种子培养基的三角瓶中，于30℃、120rpm条件下摇床培养12－24小时，得种子液。种子培养基的配方为：以种子培养基的体积计，包括蔗糖50g/L，甘油4g/L，，鱼胨5g/L，七水硫酸镁以镁计分别为0.1g/L。步骤2：将步骤1所得的种子液按20％的体积比加入发酵培养基中进行发酵培养，发酵温度30℃，发酵周期5d。结果显示，本实施例所得的枯草芽孢杆菌较现有技术中的发酵培养基生产现的枯草芽孢杆菌产量高出12％。上述实施例仅为本专利技术的优选实施方式之一，不应当用于限制本专利技术的保护范围，但凡在本专利技术的主体设计思想和精神上作出的毫无实质意义的改动或润色，其所解决的技术问题仍然与本专利技术一致的，均应当包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：按重量份称取原料：所述原料以发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：糖40‑60g/L，甘油10‑20g/L，玉米淀粉10‑14g/L，蛋白胨12‑24g/L，氨基酸2‑5g/L，金属离子化合物以金属离子计0.6‑1.0g/L，所述金离离子为铝离子、钾离子、锌离子、镁离子和亚铁离子中的一种或多种；步骤2：将上述组份依次溶解后，调节pH值；步骤3：灭菌，备用，即得。

【技术特征摘要】
1.一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：按重量份称取原料：所述原料以发酵培养基的体积计，包括以下含量的组分：糖40-60g/L，甘油10-20g/L，玉米淀粉10-14g/L，蛋白胨12-24g/L，氨基酸2-5g/L，金属离子化合物以金属离子计0.6-1.0g/L，所述金离离子为铝离子、钾离子、锌离子、镁离子和亚铁离子中的一种或多种；步骤2：将上述组份依次溶解后，调节pH值；步骤3：灭菌，备用，即得。2.根据权利要求1所述的一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，其特征在于：所述糖为葡萄糖、蔗糖或糖蜜。3.根据权利要求2所述的一种枯草芽孢杆菌发酵培养基的制备方法，其特征在于：所...

【专利技术属性】
技术研发人员：辜晓平，孔利文，
申请(专利权)人：成都众宜合生科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51