一组丙型流感病毒LAMP检测用引物及其应用制造技术

本申请属于丙型流感病毒检测技术领域，具体涉及利用环介导逆转录等温扩增技术(RT‑LAMP)检测丙型流感病毒时所用引物序列的专利申请。一组丙型流感病毒LAMP检测用引物，包括外引物对INF‑CF3/ INF‑CB3、内引物对IFN‑C FIP/ IFN‑C BIP两对引物，利用该引物组可制备RT‑LAMP检测用试剂盒。总体而言，基于现有环介导逆转录等温扩增技术原理，本发明专利技术首次将其应用于丙型流感病毒检测应用中，应用范围广泛，既可人用，也可兽用，具有操作流程一致度高，检测结果稳定可靠等优点，对于丙型流感病毒检测及预防体系的建立具有十分重要的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一组丙型流感病毒LAMP检测用引物及其应用
本申请属于丙型流感病毒检测
，具体涉及利用环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)检测丙型流感病毒时所用引物序列的专利申请。
技术介绍
RT-LAMP技术的原理是：设计两对引物（一对内引物、一对外引物），特异性识别靶序列中的六个结合区域，在具有置换活性的BstDNA聚合酶及逆转录酶AMV的催化下，使RNA模板在特定恒温环境中通过循环置换反应实现快速、特异、灵敏地扩增，从而达到检测病毒的目的。RT-LAMP扩增主要分为两个阶段，第一阶段为哑铃状扩增始发物的形成：内引物FIP和BIP除了在3’端与模板互补外，其5’端还可与下游扩增产物中的部分序列互补，使得新合成的单链产物两端可形成一个类似哑铃状的环形结构。第二价段为循环扩增阶段：以第一阶段形成的哑铃状的环形DNA为模板，进行周而复始的扩增和延伸，扩增的终产物是具有不同长度、不同个数茎环结构的DNA混合物，其在电泳后的琼脂糖凝胶上可形成连续的梯状条带。从RT-LAMP的原理和特点可以看出，与常规基因检测方法相比，该方法在RNA病毒的检测方面应该有着很大的优势。第一，操作简单：与传统PCR本文档来自技高网...

【技术保护点】
一组丙型流感病毒LAMP检测用引物，其特征在于，该组引物包括外引物对INF‑CF3/ INF‑CB3、内引物对IFN‑C FIP/ IFN‑C BIP两对引物，引物序列如SEQ ID NO.1~4所示，具体如下：INF‑CF3：5’‑ CCAAATAATGGAAATGGTTGAAG‑3’，INF‑CB3：5’‑ TCTTCTCCAAGGCCAGTA‑3’；IFN‑C FIP：5’‑ TCTCAACCAAGCTGTGATTGTTC‑TACGATCACCCAAACGACTA‑3’，IFN‑C BIP：5’‑GAGTAATGTCTCAGAAAGTGGAAGA‑TCGTTCATTGCTGTGCTG‑3...

【技术特征摘要】
1.一组丙型流感病毒LAMP检测用引物，其特征在于，该组引物包括外引物对INF-CF3/INF-CB3、内引物对IFN-CFIP/IFN-CBIP两对引物，引物序列如SEQIDNO.1~4所示，具体如下：INF-CF3：5’-CCAAATAATGGAAATGGTTGAAG-3’，INF-CB3：5’-TCTTCTCCAAGGCCAGTA-3’；IFN-CFIP：5’-TCTCAACCAAGCTGTGATTGTTC-TACGATCACCCAAACGACTA-3’，IFN-CBIP：5’-GAGTAATGTCTCAGAAAGTGGAAGA-TCGTTCATTGCTGTGCTG-3’。2.利用权利要求1所述丙型流感病毒LAMP检测用引物所制备的RT-LAMP检测用试剂盒，其特征在于，由如下组分构成：（1）RNA提取液：TRIZol和RNA酶抑制剂，（2）反应混合液：由BstDNA聚合酶缓冲液、BstDNA聚合酶、AMV反转录酶、dNTP、Betaine、MgCl2溶液、INF-CF3引物、INF-CB3引物、NF-CFIP引物、INF-CBIP引物、DEPC处理水构成；（3）染色剂：染色剂HNB，（4）阳性对照样品：重组质粒INF-CPMD；（5）DEPC处理水。3.如权利要求2所述RT-LAMP检测用试剂盒，其特征在于，25次检测用量各成分比例如下：（1）RNA提取液：TRIZol，25mL，RNA酶抑制剂25μL；（2）反应混合液：BstDNA聚...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭夫望，吕明，张海倩，
申请(专利权)人：河南昂睿生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南,41