牛传染性鼻气管炎病毒nano‑PCR检测试剂盒及其制备方法技术

牛传染性鼻气管炎病毒nano‑PCR检测试剂盒及其制备方法，涉及牛传染性鼻气管炎病毒检测领域，解决了现有检测牛传染性鼻气管炎病毒检测方法灵敏性低、血清学检测假阳性高、国外进口试剂昂贵的问题。该试剂盒包括Mighty Amp酶、2xBuffer Mix缓冲液、无菌双蒸水、金纳米颗粒溶胶、一对特异性引物和牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒；一对特异性引物分别为P1(5'‑GCTCGCCAACTTCTTTCAGGG‑3')和P2(5'‑GCGTCAAACTCCTCCTCTTCCTC‑3')。牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒的序列如SEQ ID NO:2所示。该试剂盒灵敏度高、简便、成本低。

【技术实现步骤摘要】
牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及牛传染性鼻气管炎病毒检测
，具体涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
传染性鼻气管炎(InfectiousBovineRhinotracheitis，IBR)又名牛疱疹病毒Ⅰ型感染症(Bovineherpesvirustype1infections，BoHV-1)是由牛传染性鼻气管炎病毒引起牛的一种急性接触性传染病，临床表现形式多样，以呼吸道为主，又称红鼻病或牛传染性坏死性鼻炎。自然条件下，仅牛对本病易感。病牛和带毒动物是主要传染源，隐性感染的种公牛精液带毒。病牛愈后可带毒6～12个月，甚至长达19个月。病毒主要存在于鼻、眼、阴道分泌物和排泄物中。急性BoHV-1呼吸道感染还可以继发其他细菌性或病毒性感染，造成牛呼吸道疾病综合征(BRDC)。此病目前在世界范围内流行，对乳牛的产奶量、公牛的繁殖力及役用牛的使役力均有较大影响，结合流行病学，可做出初步诊断，但确诊必须依靠实验室诊断，实验室诊断包括病毒分离鉴定和血清学试验。通常检测血清样品中BoHV-1抗体的方法有病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
牛传染性鼻气管炎病毒nano‑PCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：MightyAmp酶、2xBufferMix缓冲液、无菌双蒸水、金纳米颗粒溶胶、一对特异性引物和一个牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒；所述一对特异性引物分别为：鉴定牛传染性鼻气管炎病毒的引物P1和P2：P1：5'‑GCTCGCCAACTTCTTTCAGGG‑3'，P2：5'‑GCGTCAAACTCCTCCTCTTCCTC‑3'；所述牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒为含有306个碱基的核苷酸片段构成的pMD18‑T重组质粒，其序列如序列表中的SEQ ID NO:2所示；所述含有306个碱基的核苷酸片段构成的pMD18‑T重...

【技术特征摘要】
1.牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：MightyAmp酶、2xBufferMix缓冲液、无菌双蒸水、金纳米颗粒溶胶、一对特异性引物和一个牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒；所述一对特异性引物分别为：鉴定牛传染性鼻气管炎病毒的引物P1和P2：P1：5'-GCTCGCCAACTTCTTTCAGGG-3'，P2：5'-GCGTCAAACTCCTCCTCTTCCTC-3'；所述牛传染性鼻气管炎病毒阳性对照质粒为含有306个碱基的核苷酸片段构成的pMD18-T重组质粒，其序列如序列表中的SEQIDNO:2所示；所述含有306个碱基的核苷酸片段构成的pMD18-T重组质粒能够在大肠杆菌DH5α感受态细胞中增殖。2.根据权利要求1所述的牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒，其特征在于，所述含有306个碱基的核苷酸片段的序列如序列表中的SEQIDNO:1所示。3.根据权利要求1所述的牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒还包括阴性对照，所述阴性对照为蒸馏水。4.制备权利要求1至3中任意一项所述的牛传染性鼻气管炎病毒nano-PCR检测试剂盒的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)配制PCR反应液所述PCR反应液包括MightyAmp酶、2xBufferMix缓冲液、无菌双蒸水、金纳米颗粒溶胶和一对特异性引物；所述一对特异性引物分别为...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭利，程世鹏，
申请(专利权)人：中国农业科学院特产研究所，
类型：发明
国别省市：吉林,22