一种基因gBabc制造技术

技术编号:13926897 阅读:349 留言:0更新日期:2016-10-28 09:30
本发明专利技术公开了一种从牛传染性鼻气管炎病毒的主要抗原糖蛋白gB中得到的基因gBabc,该基因表达能够得到高免疫原活性的融合蛋白,最后制作用于检测牛传染性鼻气管炎抗体的胶体金免疫层析试纸条。本发明专利技术的目的基因成功高效表达、分离纯化得到用于检测牛传染性鼻气管炎抗体的融合抗原蛋白gBF,且经实验验证该融合蛋白具有高抗原性及高免疫活性,建立了牛传染性鼻气管炎抗体胶体金免疫层析方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种从牛传染性鼻气管炎病毒的主要抗原糖蛋白gB中得到的目的基因gBabc
技术介绍
牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)也称牛疱疹病毒Ⅰ型(Bovine herpesvirusⅠ,BHV-Ⅰ)引起牛的一种急性、热性、接触性传染病,临床症状有上呼吸道及气管粘膜发炎、呼吸困难、流鼻汁等,并伴有结膜炎、流产、乳腺炎,有时诱发小牛脑炎等。更严重的危害是导致持续性感染,给诊断、预防及治疗该病造成极大的困难。牛传染性鼻气管炎病毒粒子最外层的囊膜由11种糖蛋白组成,其中gB、gC和gD糖蛋白具有高免疫原性,能够刺激机体产生抗体并在补体存在下致使感染细胞裂解。目前,IBR的鉴别诊断方法主要包括传统的病毒分离、血清学实验、聚合酶链式反应(PCR)技术等,其中血清学实验又包括血清中和实验、琼脂扩散实验、间接血凝实验和ELISA诊断方法。这些检测方法对操作步骤、操作环境、仪器设备的要求都很高,很难应用于临床诊断。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题,本专利技术的目的是提供一种从牛传染性鼻气管炎病毒本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种基因gBabc,其特征在于:所述基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种基因gBabc,其特征在于:所述基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。2.根据权利要求1所述的基因gBabc表达得到融合蛋白gBF,具有如序列表SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。3.权利要求1所述的基因gBabc的合成方法,其特征在于:包括如下的步骤:利用DNAstar对牛传染性鼻气管炎病毒的主要抗原糖蛋白gB进行预测分析,选出3段抗原指数高的抗原表位基因,根据3段氨基酸序列起始位置找出3段对应基因序列,并分别命名为gBa、gBb和gBc,3段基因序列之间用Linker序列连接,并选定EcoR I和Xho I为酶切位点,将融合好的基因序列送与合成得到重组克隆载体PUCK-(gBa-linker-gBb-linker-gBc),重组克隆载体存在于大肠杆菌DH-5α中,通过摇菌的方式克隆以及扩增目的基因,通过质粒提取、双酶切以及胶回收得到带有粘性末端的目的基因gBabc。4.根据权利要求1所述的基因gBabc表达得到融合蛋白gBF的方法,其特征在于:包括如下的步骤:将基因gBabc与线性化表达载体pET-28a(+)进行...

【专利技术属性】
技术研发人员:秦建华刘腾赵月兰史万玉包永占景翠王敏赵越刘立元
申请(专利权)人:河北农业大学
类型:发明
国别省市:河北;13

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