一种检测体液中靶标代谢物含量的超高效液相色谱串联质谱方法技术

本发明专利技术涉及一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法。本发明专利技术基于超高效液相色谱串联质谱的检测平台，首先利用靶标代谢物的标准品逐个优化其质谱检测参数和色谱分离条件；然后利用优化好的色谱质谱方法进一步摸索血浆中15种重点靶标代谢物(4个溶血卵磷脂、3个不饱和脂肪酸、8个胆汁酸)的提取方法；利用优化好的分析方法，考察了血浆和尿液中这些代谢物同时测定时的检测限、定量限、精密度、准确性、线性范围等。结果表明本发明专利技术的检测方法能快速、准确、特异、灵敏地定量体液中15种重要靶标代谢物的含量，为肝胆疾病非侵入式临床诊断标志物的筛选奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法
本专利技术涉及生物分析与检测
，具体地说，涉及一种超高效液相色谱串联质谱的检测方法。
技术介绍
肝脏是内源性和外源性小分子代谢物在体内最重要的代谢器官。大量研究表明，随着肝病进程(正常肝—肝炎—肝硬化—肝癌)的不断加深，胆汁酸、溶血卵磷脂和不饱合脂肪酸代谢稳态会被破坏，而且不同肝脏损伤程度对应的这三类代谢物的代谢特征也不一样，因此，若能定量分析体液中这三类代谢物的含量，对于肝胆疾病的小分子诊断标志物的筛选具有重要意义。这三类代谢物中每一类代谢物单独的定量方法都有报道，但迄今尚未见三类代谢物同时快速定量的方法，这是由于这三类代谢物的分子极性以及在体内的丰度变化非常大，同时定量他们具有很大挑战性。中国专利文献CN201210230311.8，公开日2012.11.07，公开了一种用于血清中总胆汁酸测定的组合试剂A和检测方法，组合试剂A包含由Tris-HCl缓冲液、3α-羟基类固醇脱氢酶(3α-HSD)、辅酶(NAD+或NADH)构成的试剂I；和由心肌黄酶、2,6-二氯酚靛酚(DCPIP)、Tris-HCl缓冲液构成的试剂II。通过辅酶循环不断地本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于同时快速检测体液中靶标代谢物含量的超高效液相色谱串联质谱的检测方法，其特征在于，所述的体液为血浆、血清或尿液；所述的靶标代谢物选自下列中的两种或两种以上：GCDA、TCDA、GCDCA、GDCA、DCA、GCA、TCA、CDCA、LPC16:0、LPC18:0、LPC18:1、LPC20:0、EPA、AA和DHA；质谱条件为：

【技术特征摘要】
1.一种用于同时快速检测体液中靶标代谢物含量的超高效液相色谱串联质谱的检测方法，其特征在于，所述的体液为血浆、血清或尿液；所述的靶标代谢物选自下列中的两种或两种以上：GCDA、TCDA、GCDCA、GDCA、DCA、GCA、TCA、CDCA、LPC16:0、LPC18:0、LPC18:1、LPC20:0、EPA、AA和DHA；质谱条件为：所用色谱柱为2.1×50mm2，1.7μm的C18柱。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，质谱条件为：3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的检测方法还选用了内标，所述的内标选自LPC17:0和GCA-C13。4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏长青，彭章晓，林雪晶，钱海华，
申请(专利权)人：苏长青，
类型：发明
国别省市：上海,31