本发明专利技术提供一种高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法检测血液中降血压、降血糖药物的检测方法，其包括如下步骤：(1)检测目标化合物的确认；(2)样品预处理：采用有机溶剂沉淀蛋白法处理样品；(3)采用高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC-QTOF)进行检测，以保留时间、精确分子量、同位素峰丰度比进行筛查分析；(4)对于第(3)步检测阳性样本进行复核；和/或(5)用HPLC-QTOF进行复检，以保留时间、精确分子量进行确认。本发明专利技术根据每种药物在本发明专利技术设定的检测条件下，存在不同的保留时间，从而独创性地完成了分段进行检测的方法。本发明专利技术全部检测完31种药物所需要的时间可以在20分钟以内。其检测准确性高达95％，优选99％以上。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术提供一种高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法检测血液中降血压、降血糖药物的检测方法，其包括如下步骤：(1)检测目标化合物的确认；(2)样品预处理：采用有机溶剂沉淀蛋白法处理样品；(3)采用高效液相-高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC-QTOF)进行检测，以保留时间、精确分子量、同位素峰丰度比进行筛查分析；(4)对于第(3)步检测阳性样本进行复核；和/或(5)用HPLC-QTOF进行复检，以保留时间、精确分子量进行确认。本专利技术根据每种药物在本专利技术设定的检测条件下，存在不同的保留时间，从而独创性地完成了分段进行检测的方法。本专利技术全部检测完31种药物所需要的时间可以在20分钟以内。其检测准确性高达95％，优选99％以上。【专利说明】
本专利技术涉及。
技术介绍
飞行安全是关系国计民生的重大问题，高血压、糖尿病是飞行员常见疾病，是许多失能性疾病的基础疾病，也是飞行员停飞的重要原因。合理使用药物仍然是目前治疗高血压、糖尿病的重要措施，从而预防高血压、糖尿病所致的心、肾、脑、神经系统等并发症，延长飞行员飞行年限；然而降压药、降糖药的不合理使用，可能会导致血压、血糖急剧下降，造成飞行员突发失能。根据《民用航空人员体检合格证管理规则》(CCAR-67FS-R2)的规定，中国民航飞行员收缩压/舒张压持续高于155/95mmHg不合格；患有使用胰岛素控制的糖尿病不合格；使用可能影响安全履行职责的药物控制的糖尿病不合格。根据《空勤人员和空中交通管制员体检鉴定》(AP-67FS-002)的规定，允许飞行员使用的抗高血压药物为噻嗪类利尿齐U、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、钙通道阻滞剂或β受体阻滞剂，同时也规定了飞行员首次或更换抗高血药物，应经至少3至4周的地面观察，血压控制良好，无症状，无所使用药物的不良反应，方能荷药飞行。AP-67FS-002同时还规定，允许飞行员使用的口服降糖药物包括双胍类，或单独使用的α-糖苷酶抑制剂，不能服用磺脲类药物。初次口服降血糖药物后，经地面观察至少60日，证实其病情得到控制，无所服用药物的不良反应。因此，严格遵守民航法规规定，科学合理使用降血压、降血糖药物，是保证飞行员健康，避免药物不良反应影响飞行安全的前提。 为了掌握飞行员糖尿病、高血压的真实患病情况及服药情况，避免因高血压、糖尿病引起飞行员突发失能；同时，为了更准确掌握目前飞行员使用降血压、降血糖药物种类、用量等情况，具体分析当前常用药物在飞行中使用的有效性、安全性，对我国飞行员安全使用相关药物进行评估和分析，需要对中国民航飞行员进行药物专项检查。 目前有相关的文献报道，如高效薄层色谱法测定血液中氨氯地平的药代动力学研究(“Detect1n and determinat1n of total amlodipine by highperformance thin-layerchromatography:a useful technique for pharmacokinetic studies，，，K.K.Pandya,等，Journal of Chromatography B, 667 (1995) 315-320,下称文献 I);胶束电动色谱法测定血清样品中格列齐特等6种常用抗高血压药物(“Determinat1n of antihyperglycemicdrugs in nanomolar concentrat1n levels by micellar electrokinetic chromatographywith non-1onic surfactant，，，Vit " ezslav Maierj 等，Journal of ChromatographyA，1216(2009)4492 - 4498，下称文献2);高效液相色谱质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定以猴的空白血液为样品基质中二甲双胍等7种常用降血糖药物(“Mult1-componentplasma quantitat1n of ant1-hyperglycemic pharmaceutical compounds using liquidchromatography - tandem mass spectrometry”，Ming Wang 等，Journal of ChromatographyB，856 (2007) 318 - 327，下称文献3)，以马的空白血浆为样品基质中格列吡嗪等10种降血糖药物(“Detect1n of ant1-diabetics in equine plasma and urine by liquidchromatography - tandem mass spectrometry，，，Emmie N.M.Hoaj ,等，Journal ofChromatography B, 811 (2004)65 - 73,下称文献4),以及血衆样品中包括降糖降压药物在内的 55 种心血管治疗药物(“Development of an LC - MS/MS method for the quantitat1nof55compounds prescribed in combined card1vascular therapy，，，Oskar Gonzalez,等，Journal of Chromatography B, 879 (2011) 243 - 252,下称文献 5);超高效液相色谱质谱联用法(UPLC-MS/MS)测定血清中辛伐他汀和阿托伐他汀等(“Ultra high performanceliquid chromatography tandem mass spectrometric detect1n in clinical analysisof simvastatin and atorvastatin，，，Lucie Novakovaa,,等，Journal of ChromatographyB, 877 (2009) 2093 - 2103，文献 6)。 但上述文献中，文献I和2采用的方法灵敏度较低，消耗样本量大；文献3和文献4采用的是猴血浆或者马血浆为空白基质，与人体的空白血液基质还是有差异，不能真实的反映目标药物在人体内受到的血液基质影响；而且文献4在样品预处理时采用液-液萃取法，提取过程复杂、费时；另外，这2篇文献所检测的降血糖药物种类较少，一些临床常用的药物如二甲双胍没有涉及。文献5检测的心血管药物种类多，其中包括临床常用的降糖降压药物；预处理采用甲醇沉淀蛋白法，方法简单快速；但采用的是液相色谱质谱法，部分目标化合物检测限和定量限相比本实验方法偏高。文献6虽然也采用超高效液相色谱质谱法，但检测药物就2种，种类少，而且样品预处理采用的是固相萃取法，提取过程复杂、费时。 国内外常用的降血压、降血糖药物种类有所不同，现有技术不能涵盖中国常用的药物种类。此外，由于受检对象多(除3万多现役飞行员外，还用于招收飞行学生、外籍飞行员和军转民飞行员))，检测时间有限(影响飞行员取得体检合格证)，生物样本量少，检测目标化合物多，现有方法无法满足上述要求。因此，本本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种高效液相‑高分辨飞行时间串联质谱法检测血液中降血压、降血糖药物的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：采用高效液相‑高分辨飞行时间串联质谱法(HPLC‑QTOF)进行检测，以保留时间、精确分子量和/或同位素峰丰度比进行确认。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王伟，许海山，李松林，乔湜，李清艳，徐先发，刘国如，于红燕，丁仁奎，刘永锁，
申请(专利权)人：中国民用航空局民用航空医学中心，
类型：发明
国别省市：北京;11
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