胆酸类衍生物、其制备方法和医药用途技术

本发明专利技术涉及药物化学领域，涉及胆酸类衍生物、其制备方法和医药用途，具体涉及一类通式为(I)的胆酸类衍生物、它们的制备方法、含有这些化合物的药物组合物以及它们的医药用途，特别是作为预防或治疗高脂血症、肥胖症或II型糖尿病的药物的用途。

Cholic acid derivatives, process for their preparation and medical use

The present invention relates to the field of pharmaceutical chemistry, involving cholic acid derivatives, preparation method and pharmaceutical use thereof, in particular to a general formula (I) cholic acid derivatives, preparation method and pharmaceutical compositions containing these compounds and their pharmaceutical use of them, especially as the use of drugs to prevent or treat hyperlipidemia, obesity or type II diabetes.

【技术实现步骤摘要】
胆酸类衍生物、其制备方法和医药用途
：本专利技术涉及药物化学领域、具体涉及胆酸类衍生物。本专利技术还公开了它们的制备方法和药理活性、含有这些化合物的药用组合物以及它们的医药用途特别是作为预防或治疗高脂血症、肥胖症、II型糖尿病药物的用途。
技术介绍
：心血管病目前居全球死因前列，严重危害人类健康。血脂异常是引起动脉粥样硬化、导致血栓形成的主要因素，调血脂药物在心血管疾病防治中具有突出地位，对于维持心血管系统的健康十分重要。血脂异常是指血浆中的总胆固醇(Totalcholesterol，TC)、甘油三酯(Triglyceride，TG)和低密度脂蛋白胆固醇(Low-densitylipidcholesterol，LDL-C)增多，高密度脂蛋白胆固醇(High-densitylipidcholesterol，HDL-C)减少。LDL可被氧化成oxLDL，过多的oxLDL在巨噬细胞内堆积变成泡沫细胞，同时引起血管内皮细胞凋亡，引起炎性反应，共同促进动脉粥样硬化斑块形成；新生的小颗粒HDL接受从血管壁巨噬细胞中流出的胆固醇，经酯化后转运到肝脏并代谢成胆酸盐清除出体外，完成胆固醇逆转运(Reversecholesteroltransport，RCT)。高TG引起过度脂交换，会形成含胆固醇少、TG多的大颗粒HDL，使RCT能力强的小颗粒HDL-C水平下降，胆固醇在血管内壁沉积，增加了动脉粥样硬化性心血管病的危险。肥胖症是一种最常见的慢性内分泌代谢疾病，在当今世界人群中发病率呈逐年上升趋势，已成为全球性的公共健康难题。肥胖症能引发许多健康问题，不仅会增大高脂血症、高血压、冠心病、II型糖尿病的发病率和死亡率，还易引起呼吸系统并发症、骨关节炎症以及精神方面的疾病。各种实验结果显示适度的体重减轻(5-10％)可明显降低糖尿病、肿瘤和心血管系统的危险系数。
技术实现思路
：本专利技术公开了通式I的一类胆酸类衍生物，经初步生物活性研究显示，本专利技术化合物对3T3-L1细胞的增殖均有抑制活性。本专利技术化合物具有潜在的治疗高脂血症、肥胖症、II型糖尿病药物的用途。其中R1代表OH、二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、哌啶基。R2代表OH、NH2、羧酸基、磺酸基、羧酸酯基、磺酸酯基。n代表0、1、2、3、4、5、6。其中R1优选代表二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、哌啶基。其中R2优选代表甲酸酯基。其中n优选代表0、1、2。本专利技术化合物结构如下：下面药理实验及实施例中化合物的代号等同于此处的代号所对应的化合物结构。本专利技术通式的化合物可以由以下方法制备：(a)EDCI，HOBt，CHCl2，rt，10h；(b)TsCl，DMAP，rt，12h；(c)NaN3，DMF，75℃，48h；(d)PPh3，THF，H2O，rt，24h；(e)H2SO4，CH3OH，rt，2h；(f)K2CO3，KI，DMF，80℃，5h；(g)K2CO3，KI，DMF，60℃，8h.下面是本专利技术的部分化合物的药理活性检测：我们对合成的目标化合物进行了初步生物活性筛选，测试了化合物对前脂肪细胞增殖的影响。1实验材料吡格列酮、阿托伐他汀钙购自南京生利德生物技术有限公司；T0901317购自上海浩然生物技术有限公司；青霉素，小牛血清(FBS)购自GibcoBRLofInvitrogenCorporation(Carlsbad，CA)；胰蛋白酶，四甲基偶氮唑盐(MTT)购自Sigama(St.Louis，MO)；其他试剂均为国产分析纯。2实验方法2.1细胞培养3T3-L1细胞分别用DMEM培养基(含10％小牛血清、100U/mL的青霉素和100μg/mL的链霉素)于5％CO2、37℃孵育箱中培养。待细胞长至汇合度为80％左右时传代。传代细胞时，倒掉旧培养基，PBS(磷酸盐缓冲液)洗两次。加入少量0.25％胰蛋白酶，铺平瓶底，37℃下消化约1-2min，倒置显微镜下观察到细胞变圆，倒掉胰酶，加入新鲜培养基，吹打混匀，植入新的培养瓶中，继续培养。细胞计数，取少量细胞混悬液与0.4％台盼蓝溶液等体积混合，用吸管吹打混匀，取少许混合液滴入计数板与盖玻片的上方空隙中，注意不要产生气泡，于100倍低倍显微镜下观察，死细胞可被台盼蓝染色，而活细胞不会，移动计数板至看到计数方格，数出四个大格的未染色细胞数，记录包括压右线和上线的细胞，左线和下线不计，细胞数/mL＝四大格细胞总数/4×104。冻存细胞时，收获对数生长期细胞(收集细胞前24h换液)，冻存液(5％DMSO、95％DMEM)重悬细胞，调细胞密度为5×106～1×107个/mL，分装入无菌冻存管中，每管加1.5mL细胞悬液，做好标记和记录，冻存管在4℃放置20min，-20℃放置20min，在-70℃超低温冰箱过夜后移入液氮容器中。细胞复苏，从液氮容器中取出冻存管，迅速放入盛有40℃水的烧杯中，不时摇动，使之尽快融化，用酒精棉球消毒冻存管表面，吸出细胞悬液，移入离心管中，补加细胞培养液至10mL，继续培养。2.2细胞增殖实验将3T3-L1细胞接种于96孔细胞培养板中。常规培养1天后，换成含1×10-4mol/L的目标化合物和OF的DMEM培养液，对照组为含0.1％(V/V)的DMSO的培养液，每组设3复孔，处理2天。弃去孔中培养液，每孔加20μLMTT液(5mg/mL)，37℃培养4h，弃孔中液体，每孔加入150μLDMSO，充分振摇，立即在酶联免疫检测仪上测定吸光度(Opticaldensity，OD)，测定波长为570nm。抑制率按下式计算：3实验结果化合物及阳性药对3T3-L1细胞增殖的影响如下：4结果讨论本专利技术化合物的活性结果可以看出，本课题合成的化合物在100μM下对3T3-L1细胞均有抑制活性。本专利技术化合物用于调血脂、降低心血管疾病的作用机制、作用强度和作用时间还需要再进一步的研究中阐明。本专利技术进一步涉及通式的化合物与药学上可接受的载体组成的药用组合物。本专利技术化合物可以单独或与一种或一种以上的药学上可以接受的载体组合制成制剂以供给药。可以用口服剂型给药，如普通片剂和胶囊、缓释片剂和胶囊、控释片剂和胶囊、滴丸、可分散粉末、颗粒剂等；也可制备成注射制剂。这些药用制剂中可以含有与载体组合的例如0.05％至90％总量的活性成分，更常见约15％至60％之间重量的活性成分。本专利技术化合物剂量可以是0.001～100mg/kg/天，也可以根据疾病程度的不同或剂型的不同偏离此剂量范围。具体实施方式部分化合物的制备实施如下：熔点用XRC-1显微熔点仪测定(温度计未经校正)，IR用NicoletiS10型傅立叶变换红外光谱仪测定(KBr压片)，1H-NMR核磁共振由BrukerAV300型(300MHz)核磁共振仪测定(TMS为内标物)，质谱分别由岛津GC/MS-QP2010型质谱仪(EI-MS)、Agilent1100LC-MSD-Trap/SL型质谱仪(ESI-MS)测定。柱层析用硅胶为100-200目、200-300目或300-400目硅胶(青岛海洋化工厂)，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯体系或氯仿-甲醇体系。薄层层析(TLC)用GF254薄层层析板(烟台江友硅胶开发有限公司)；TLC展开体系为石油醚-乙酸乙酯系统或乙酸乙酯-甲醇系统；TLC在Z本文档来自技高网...

【技术保护点】
下列通式I的化合物、其药学上可接受的盐或其前药：

【技术特征摘要】
1.下列通式I的化合物、其药学上可接受的盐或其前药：其中R1代表OH、二甲氨基、二乙氨基、吡咯烷基、哌啶基。R2代表OH、NH2、羧基、磺酸基、羧酸酯基、磺酸酯基。n代表0、1、2、3、4、5、6。2.根据权利要求1所述的化合物、其药学上可接受的盐或其前药，其中R1优选代表二甲氨基、二乙氨...

【专利技术属性】
技术研发人员：向华，钱周阳，丘荣茂，赵儒恒，胥骞，黄小菲，饶迪，侯强强，陈明琪，陈德英，尤启冬，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32