一种小春花总黄酮的提取方法技术

本发明专利技术提供了一种小春花总黄酮的提取方法，包括以下步骤：将小春花粉碎，得到小春花粗粉；采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对得到的小春花粗粉进行回流提取，将得到的提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏；得到的小春花乙醇提取稠膏用水混悬后用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附与解吸附，得到小春花总黄酮；其中大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中依次采用水和乙醇水溶液洗脱。本发明专利技术提供的小春花总黄酮提取方法的得率达64.48％以上，所得小春花总黄酮提取物的含量可达56.92％以上，含量相对于现有技术提高了近7倍以上。

Method for extracting total flavone of spring flower

The present invention provides a method for extracting total flavonoids from small flowers, which comprises the following steps: small flower pieces, small flowers, coarse powder; as the extraction solvent with ethanol water solution, to get the coarse powder Xiaochunhua extraction, the concentrated extract obtained by extraction, the paste of Xiaochunhua by ethanol; the small spring water ethanol extraction paste after suspension with macroporous adsorption and desorption adsorption resin column and polyamide column, obtained total flavonoids of Xiaochunhua; the adsorption of macroporous resin column and polyamide column adsorption followed by water and aqueous ethanol elution. The yield of the total flavonoids extraction method of the invention can reach more than 64.48%, and the content of the total flavone extract of the spring flower can reach more than 56.92%, and the content of the total flavone extract is increased by more than 7 times compared with the prior art.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然药物提取
，具体涉及一种小春花总黄酮的提取方法。
技术介绍
小春花为阴地蕨科植物阴地蕨Botrychiumternatum(Thunb.)Sw.、华东阴地蕨Botrychiumjaponicum(Prantl)Underw.、薄叶阴地蕨BotrychiumdaucifoliumWall.、绒毛阴地蕨BotrychiaceaelanuginosumWall.、药用阴地蕨Botrychiumofficinaleching、粗壮阴地蕨Botrychiumrobustum(Rupr.)Underw.或蕨萁Botrychiumvirginianum(L.)Sw.的带根全草，别名：蛇不见、一朵云、黄连七、破天云等。小春花为浙江省习用药材，少数民族特色药材，也是著名的秦岭七药之一，具有清热解毒，滋补强肾，平肝熄风，止咳，止血，明目祛翳等功效。主要用于治疗肾亏、风热感冒、支气管哮喘、百日咳、头晕头痛、小儿高热惊搐、惊痫、瘰疬、火眼、目翳、毒蛇咬伤、狂犬咬伤、乳腺炎、腮腺炎以及辅助抗肿瘤。民间常以煎汤作为茶饮或与鸡、鸭、猪肉同炖，用以清热解毒、平肝止咳、滋补强壮。研究表明，小春花主要含有黄酮、氨基酸、挥发油等化学成分。专利技术人对小春花不同的提取部位进行了止咳平喘的药效学筛选，认为黄酮类成分为其良好生物活性的物质基础。小春花提取物的总黄酮中，含量最高的木犀草素具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎以及保护神经系统的作用，其特有的阴地蕨素也被证实具有抗炎和抗氧化的作用。目前，对小春花进行提取的方法多停留在粗提物的提取，对于小春花总黄酮提取也多停留在得到总黄酮即可的程度，但是分离得到的总黄酮纯度较低，降低了小春花总黄酮的应用空间。而且现有的小春花总黄酮提取方法在纯化过程中不但会去除杂质，还会同时损失大量的小春花总黄酮，缺乏一种兼顾总黄酮提取效率以及纯度的小春花总黄酮提取方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种小春花总黄酮的提取方法，能够在维持高提取效率的同时提高小春花总黄酮的纯度。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一种小春花总黄酮的提取方法，包括以下步骤：a、将小春花粉碎，得到小春花粗粉；b、采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对所述步骤a得到的小春花粗粉进行回流提取，将得到的提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏；c、将所述步骤b得到的小春花乙醇提取稠膏用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附和解吸附，得到小春花总黄酮；所述步骤c中，大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中分别依次采用水和乙醇水溶液洗脱。优选的，所述步骤a中粉碎的粒度不低于18目。优选的，所述步骤b中回流提取的次数为2～4次，每次提取2～3h。优选的，所述步骤b中小春花粗粉与每次提取的提取溶剂的质量比为1:5～10，所述回流提取用乙醇水溶液的体积浓度为70～90％。优选的，所述步骤b在回流提取前还包括：用所述乙醇水溶液浸泡步骤a得到的小春花粗粉0.5～2h。优选的，所述步骤c中洗脱用乙醇水溶液的体积浓度为50～90％。优选的，所述步骤c中的吸附为：依次进行大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附。进一步优选的，所述步骤c中大孔吸附树脂柱吸附时，大孔吸附树脂柱为非极性大孔吸附树脂柱，洗脱用乙醇水溶液用量4～6BV。进一步优选的，所述步骤c采用聚酰胺柱吸附时，所述聚酰胺柱填充物的粒度为100～200目，所述洗脱用乙醇水溶液的体积浓度为70～80％。进一步优选的，所述步骤c中，大孔吸附树脂柱上样液总黄酮浓度为1.22～2.44mg/ml，聚酰胺柱上样液总黄酮浓度为0.59～2.36mg/ml。本专利技术与现有技术相比，本专利技术具有以下优点：本专利技术采用大孔吸附树脂吸附和聚酰胺柱吸附的方式对小春花中的总黄酮进行提取并纯化，分离的小春花总黄酮得率可达到64.48％以上，得到的小春花总黄酮含量可达到56.92％以上，相对于现有技术相似得率情况下小春花总黄酮的含量低于8.5％，小春花总黄酮的含量提高了7倍以上。可见，本专利技术提供的小春花总黄酮提取方法能够在维持提取效率的情况下，显著提高小春花总黄酮提取物的含量。现有技术在对小春花总黄酮进行提取时往往难以兼顾提取效率和纯度，本专利技术的提取方法通过提取工艺参数和提取溶剂的合理搭配，在去除杂质的同时能够有效的减少小春花总黄酮在联用大孔吸附树脂吸附和聚酰胺柱吸附过程中的损失。附图说明图1为以木樨草素为对照品绘制的木樨草素浓度-吸光度标准曲线。具体实施方式本专利技术提供了一种小春花总黄酮的提取方法，包括以下步骤：a、将小春花粉碎，得到小春花粗粉；b、采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对所述步骤a得到的小春花粗粉进行回流提取，将得到的提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏；c、将所述步骤b得到的小春花乙醇提取稠膏用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附与解吸附，得到小春花总黄酮；所述步骤c中，大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中依次采用水和乙醇水溶液洗脱。在本专利技术中，小春花为阴地蕨科植物阴地蕨、华东阴地蕨、薄叶阴地蕨、绒毛阴地蕨、药用阴地蕨、粗壮阴地蕨或蕨萁的带根全草。本专利技术将小春花粉碎，得到小春花粗粉。在本专利技术中，所述小春花为小春花的全草，优选的在粉碎前将小春花全草去泥、洗净、干燥。在本专利技术中，所述干燥方式优选为晒干，所述干燥优选的干燥至小春花全草含水量低于10％。在本专利技术中，小春花粉碎的粒度优选不低于18目，更优选不低于35目，进一步优选的粉碎粒度为60～120目。本专利技术对所述粉碎的方法没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的中药材粉碎的技术方案即可。所述粉碎后，本专利技术采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对得到的小春花粗粉进行回流提取，得到提取液，具体的：将所述小春花粗粉与乙醇水溶液混合，进行回流提取。本专利技术在提取前优选用提取溶剂浸泡小春花粗粉至透心。在本专利技术中，所述浸泡时间优选为0.5～2h，更优选为浸泡1h。在本专利技术中，所述小春花粗粉与每次提取的乙醇水溶液质量比优选为1:5～10，更优选为1:6～8。在本专利技术中，所述作为提取溶剂的乙醇水溶液的体积浓度优选为70～90％，更优选为75～85％，最优选为80％。提取用乙醇水溶液浓度能够显著影响小春花总黄酮的提取得率，当乙醇水溶液的体积浓度为80％时提取效率最优。在本专利技术中，所述提取为回流提取。在本专利技术中，所述回流提取次数优选为2～4次，更优选为3次。在本专利技术中，每次回流提取时间的优选为2～3h，更优选为2h。本专利技术对所述回流提取设备没有任何限定，采用本领域技术人员熟知的回流提取设备即可。所述回流提取后，本专利技术将每次回流提取得到的液相组分进行过滤，合并多次提取得到的滤液，得到提取液。得到提取液后，本专利技术将所述提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏。在本专利技术中，所述浓缩方式优选为加热浓缩，将所述提取液浓缩至密度1.05-1.1mg/ml，优选的浓缩至1.08mg/ml。得到小春花乙醇提取稠膏后，本专利技术将所述小春花乙醇提取稠膏用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附，得到小春花总黄酮。本专利技术使用大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附的先后顺序无具体限定，优选的依次进行大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附。所述大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中，本专利技术分别先用水进行洗脱，弃去水洗脱液，再用体积分数为50～90％的乙醇本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种小春花总黄酮的提取方法，包括以下步骤：a、将小春花粉碎，得到小春花粗粉；b、采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对所述步骤a得到的小春花粗粉进行回流提取，将得到的提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏；c、将所述步骤b得到的小春花乙醇提取稠膏用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附与解吸附，得到小春花总黄酮；所述步骤c中，大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中分别依次采用水和乙醇水溶液洗脱。

【技术特征摘要】
1.一种小春花总黄酮的提取方法，包括以下步骤：a、将小春花粉碎，得到小春花粗粉；b、采用乙醇水溶液作为提取溶剂，对所述步骤a得到的小春花粗粉进行回流提取，将得到的提取液浓缩，得到小春花乙醇提取稠膏；c、将所述步骤b得到的小春花乙醇提取稠膏用大孔吸附树脂柱和聚酰胺柱进行吸附与解吸附，得到小春花总黄酮；所述步骤c中，大孔吸附树脂柱吸附和聚酰胺柱吸附中分别依次采用水和乙醇水溶液洗脱。2.根据权利要求1所述的小春花总黄酮的提取方法，其特征在于，所述步骤a中粉碎的粒度不低于18目。3.根据权利要求1或2所述的小春花总黄酮的提取方法，其特征在于，所述步骤b中回流提取的次数为2～4次，每次提取2～3h。4.根据权利要求3所述的小春花总黄酮的提取方法，其特征在于，所述步骤b中小春花粗粉与每次提取的提取溶剂的质量比为1:5～10，所述回流提取用乙醇水溶液的体积浓度为70～90％。5.根据权利要求1所述的小春花总黄酮的提取方法，其特征在于，所述步骤b在回流提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄萍，戴纯辉，
申请(专利权)人：黄萍，
类型：发明
国别省市：浙江;33