一种金花葵总黄酮提取物的制备方法技术

本发明专利技术是一种金花葵总黄酮提取物的制备方法，包括金花葵的原料干燥至含水量低于5％、粉碎过10目筛、用40％～95％乙醇提取，回收乙醇至尽，加水稀释，通过D101大孔吸附树脂柱，用2～4倍水，5％～30％乙醇除杂，用50％～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥。所制得的金花葵提取物总黄酮含量大于70％，金丝桃苷含量大于7％。本发明专利技术具有工艺简单、提取完全、高效节能、总黄酮含量高等优点。使金花葵大幅度增值。

【技术实现步骤摘要】

生物医药。
技术介绍
金花葵又名菜芙蓉、也叫野芙蓉，为一年生草本锦葵科秋葵属植物，金花葵学名为AureaHELIANTHUS。2003年8月，中国农科院在河北邢台地区发现濒临绝种的金花葵。近代研究金花葵最具食用、药用、营养以及美容瘦身等保健功能，是具有较高的经济价值的植物。金花葵是金花葵种群中的1种，与同科属植物黄蜀葵、秋葵属相同的金花葵种。金花葵极易栽培，从北到南我国大部分地区都能种，收获颇丰。金花葵味甘、无毒，具有通淋、清热之功效，现代药理学研究表明：金花葵具有抗炎、利尿、减少血小板聚的作用。金花葵的花、果、叶、茎、根、种子全身是宝，被誉为“植物大熊猫”，金花葵植物中含有多种生物活性物质，主要成分是植物黄酮，有研究表明6g金花葵花含总黄酮384mg，相当于96g银杏叶的含量，金花葵还含有大量的VE，是橙汁的3000倍，还含有丰富的不饱和脂肪酸、油酸、亚油酸、亚麻酸，这些是心脑血管的保护神，同时含有丰富的雄激素，有“植物伟哥”之美称，是补肾的良药，还含有高聚糖胶、膳食纤维、微量元素硒、锌、钙及多种不皂化物等。这些营养物质是人体必需但又不能自行合成的必须靠饮食摄入的，其中以植物黄酮类活性物质最为重要。金花葵黄酮对人体急性心肌缺血、缺氧具有保护作用，可降低急性心肌梗塞的梗塞面积，对心肌损伤有一定的保护作用；金花葵黄酮能显著抑制血清中胆固醇、甘油三脂及低密度脂蛋白的升高，降低血清游离脂肪酸水平，进一步降低血脂水平；金花葵黄酮有显著的镇痛作用，其作用效价强度约为吗啡的1/20，且无依赖性；金花葵黄酮还有改善微循环的作用，对原发性高血压有治疗作用。黄酮的提取分离方法很多，其中大孔吸附树脂法具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、洗脱条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点，是富集、分离黄酮类化合物良好的方法。
技术实现思路
本专利技术采用稀醇提取D101大孔吸附树脂除杂的方法，分离、富集总黄酮，总黄酮含量高达70％以上，其中金丝桃苷含量达7％以上。这个方法具体为：用干燥的金花葵花、根、茎、叶、种子（提油后的渣子）用40～95％的乙醇回流提取2～4次，每次1～2小时，提取液减压回收乙醇至尽，加水冲稀，上D101大孔吸附树脂柱，树脂柱通过正交试验以金丝桃苷含量及收率为指标，确定工艺参数为：D101大孔吸附树脂与上柱提取液体积比为1:2～4，提取液浓缩为每ml含原料0.1～0.5g，吸附速度为1BV树脂/h，用2～4倍水快速冲洗，流出液弃之，继用2～4倍5～30％乙醇快速冲洗，另器收集流出液，再用2～4倍50～95％的乙醇洗脱，洗脱速度为0.8BV树脂/h，收集洗脱液，减压（70℃以下，0.09MPa）回收乙醇至无醇味，继续浓缩至干，在真空干燥箱干燥（70℃以下，0.09MPa）至水份低于5％，得黄色至棕黄色粉末，味微苦，即总黄酮提取物，收率为3.0％～6.0％。用比色法测定含总黄酮在70％以上。用HPLC测定单体黄酮金丝桃苷含量为7％以上，金丝桃苷苷元为槲皮素，具有很好的镇痛作用，强于阿司匹林，但无依赖性，还具有较强得抗炎、解痉、利尿、止咳、降压、降低胆固醇、抗凝血、蛋白固化及局部和中枢镇痛作用，对心脑血管有很好得保护作用。此外总黄酮提取物中还含有多种黄酮类及异黄酮类成分。另器收集得流出液再配成适度浓度的溶媒，是为减少总黄酮的损失，也可降低成本。大孔吸附树脂柱每次用毕，用95％乙醇冲洗，至使再用，大约用30次左右，用酸碱处理，可再重复使用。本专利技术的优点在于采用稀醇提取、大孔吸附树脂分离除杂的方法，无污染、无毒、操作条件简单、提取物的总黄酮含量高、收率高。实施实例采集金花葵花（尚未脱落前），置真空干燥箱中，于70℃、0.09MPa条件干燥24小时，粉碎，过10目筛，取粗粉5Kg，加60％乙醇50L提取三次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，在70℃、0.09MPa条件下减压回收乙醇至尽，加水稀释至50L，通过15LD101大孔吸附树脂柱，上柱速度为15L/h，用45L水快速冲洗，洗脱液弃之，继用20％乙醇30L快速洗脱，洗脱液另器收集备用，再用60％乙醇30L洗脱，洗脱速度为12L/h，收集洗脱液，70℃以下、0.09MPa减压回收乙醇至尽，再在75℃、0.09MPa继续浓缩至60℃相对密度1.28，转置真空干燥箱70℃、0.09MPa真空干燥至干，称重，得提取物230g，粉碎，得棕黄色粉末，味苦。HPLC法测定金丝桃苷含量：对照品溶液的制备：取金丝桃苷对照品适量，精密称定，加80％甲醇制成每1ml含45μg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加80％甲醇40ml，超声处理10分钟，放冷，加80％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。色谱条件：以迪马C18反相柱（4.6×250mm，5μ）为色谱柱；以乙腈-0.1％磷酸溶液（16:84）为流动相；检测波长为360nm。理论板数按金丝桃苷峰计算应不低于5000。结果：本品总黄酮提取物含金丝桃苷9.75％。总黄酮含量的测定：对照品溶液的制备：取芦丁对照品18mg，精密称定，置100ml量瓶中，加60％乙醇适量溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含芦丁0.18mg）。标准曲线的制备：精密量取对照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml量瓶中，分别加1.5％的AlCl3溶液8ml，再加入醋酸-醋酸钠缓冲液（PH值5.5）4ml，并用60％乙醇溶液定容，静置0.5h，以相应的试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（附录ⅤA），在398nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。测定法：取本品粉末20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇40ml，超声处理10分钟，放冷，加60％乙醇至刻度，摇匀，精密量取2.0ml，置25ml量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加1.5％的AlCl3溶液8ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的重量（mg），计算，即得。结果：本品总黄酮提取物含总黄酮以芦丁计为80.69％。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金花葵总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：用这种方法制备的金花葵黄酮提取物含量在70％以上，其制备方法如下：将金花葵原料干燥粉碎，用10～20倍40％～95％的乙醇提取2～4次，每次1～2小时，合并提取液，滤过，在70℃以下、0.09MPa的条件下减压，回收乙醇至尽，加水稀释，采用D101大孔吸附树脂柱进行分离，先用水洗除杂质，继用5～30％乙醇除杂质，再用50％～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液在70℃以下、0.09MPa的条件下减压，回收乙醇，继续浓缩至稠膏，在70℃以下、0.09MPa的条件下真空干燥至干，粉碎，即得金花葵总黄酮提取物。

【技术特征摘要】
1.一种金花葵总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：用这种方法制备的金花葵黄酮提取物含量在70％以上，其制备方法如下：将金花葵原料干燥粉碎，用10～20倍40％～95％的乙醇提取2～4次，每次1～2小时，合并提取液，滤过，在70℃以下、0.09MPa的条件下减压，回收乙醇至尽，加水稀释，采用D101大孔吸附树脂柱进行分离，先用水洗除杂质，继用5～30％乙醇除杂质，再用50％～95％乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液在70℃以下、0.09MPa的条件下减压，回收乙醇，继续浓缩至稠膏，在70℃以下、0.09MPa的条件下真空干燥至干，粉碎，即得金花葵总黄酮提取物。2.根据权利要求1所述的一种金花葵总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：将采集的金花葵在60℃～80℃烘干或置真空干燥箱中，在60℃～80℃、0.09MPa以下真空干燥至含水量5％以下，粉碎，过10目筛。3.根据权利要求1所述的一种金花葵总黄酮提取物的制备方法，其特征在于：权利要求1中所述的金花葵原料为其根、茎杆...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏吉城，孔伶俐，史德胜，伊惠贤，魏熙然，李梓楠，
申请(专利权)人：天津丹溪国药研究所，
类型：发明
国别省市：天津;12