本发明专利技术公开了一种镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法，包括以下步骤：取镰形棘豆，加入浓度为70％‑80％醇类溶剂，微波提取，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g。本发明专利技术镰形棘豆中总黄酮的提取方法，简便快速，可以有效提取出镰形棘豆中的总黄酮。同时，本发明专利技术还提供了通过前述镰形棘豆提取方法得到的总黄酮提取物在制备抗炎药物中的应用。
A method of extraction total flavonoids has anti-inflammatory activity of Fusarium from Oxytropis
The invention discloses a method for extracting total flavonoids has an anti-inflammatory activity of Oxytropis falcata Bunge, comprises the following steps: Taking Oxytropis falcata, adding concentration of 70% 80% alcohol solvent, microwave extraction, the volume and the mass of the alcohol solvent and medicine material ratio is 10 ~ 35:1mL/g. The method of the invention, extraction of total flavonoids from oxytropisfalcatabunge is simple and fast, can effectively extract the total flavonoids from oxytropisfalcatabunge. At the same time, the invention also provides a method to extract total flavonoids obtained by the extraction of Oxytropis falcata preparation for the application of anti-inflammatory drugs.
【技术实现步骤摘要】
一种从镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法
本专利技术涉及天然药物领域，具体涉及镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法。
技术介绍
黄酮类化合物是两个苯环通过中央三碳相互联接而成的一系列化合物。母体结构包括包括黄酮类、二氢黄酮类、黄酮醇类、二氢黄酮醇类以及查尔酮类等。藏药镰形棘豆(OxytropisfalcateBunge)(藏药名为莪达夏)是豆科(Leguminosae)棘豆属(OxytropisD.C.)多年生草本植物。生长在2700～4300m的河滩、沙地、山坡、草甸，主要产于青藏高原。据《晶珠本草》记载，镰形棘豆具有愈合疮口、利便、防止骨刺产生、治病痛、除毒、止血之功效，并能清毒、治疗炭疽病、麻风病及流感、扁桃体炎。临床研究证明，镰形棘豆对于预防、治疗流行性感冒及慢性气管炎有独特疗效。并且，药理实验证明镰形棘豆总黄酮苷元是治疗慢性气管炎的有效部分，并能增加肾上腺皮质功能，说明黄酮类化合物是镰形棘豆的重要活性成分。因此，如何有效提取出镰形棘豆中的总黄酮，具有重要的意义。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种镰形棘豆中总黄酮的提取方法，包括以下步骤：取镰形棘豆，加入浓度为70％-80％醇类溶剂，微波提取，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g。进一步地，所述醇类溶剂为甲醇或乙醇。进一步地，所述醇类溶剂的浓度为75％。进一步地，所述微波提取的功率为200W～900W。进一步地，所述微波提取的功率为600W～900W，优选700W。进一步地，所述微波提取的时间为10分钟～40分钟。进一步地，所述微波提取的时间为20分钟～40分钟，优选30分钟。进一步地，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为20-35:1mL/g，优选25:1mL/g。进一步地，所述微波提取温度为80～95℃，优选85℃。本专利技术还提供了一种镰形棘豆中总黄酮提取物，所述提取物是按照下述方法制备得到的：(1)取镰形棘豆，按照前述的提取方法制备得到镰形棘豆中总黄酮提取液；(2)浓缩提取液，陶瓷膜滤过，有机膜纯化，取滤液，干燥即得。本专利技术还提供了前述镰形棘豆总黄酮提取物在制备抗炎药物中的应用。本专利技术镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法，简便快速，可以有效提取出镰形棘豆中的总黄酮。同时，本专利技术得到的镰形棘豆提取物对LPS诱导的炎症模型具有显著的改善作用，主要通过抑制炎症因子NO、TNF-α等释放，直接发挥抑制作用，从而表现出抗炎作用。显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。具体实施方式镰形棘豆于2015年8月采自青海省海北州，经中国科学院西北高原生物研究所孙菁副研究员鉴定；芦丁标准品购自中国药品检定所(批号：100080-200707，含量为90.5％，)，乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠均为分析纯。自制超纯水。微波提取仪(RWBC，南京苏恩瑞公司)METTLERTOLEDOPL203和XS204电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司)；TU-1901型紫外可见分光光度计；料液比的单位为ml/g。总黄酮测定方法如下：(1)对照品溶液的制备取芦丁对照品20mg，精密称定，置50ml量瓶中，加75％乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含芦丁0.2mg)。(2)标准曲线绘制精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分别置25ml量瓶中，各加30％乙醇至6ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，混匀，放置6分钟，再加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加30％乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法(中国药典2015年版四部)，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，对照品溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。(3)样品溶液的制备准确称取1g干燥的镰形棘豆原料，置于50mL圆底烧瓶中。在选定微波功率、液料比、提取时间、提取温度、乙醇浓度等条件进行微波提取，提取液过滤并定容至50mL，即为样品溶液。(4)镰形棘豆中总黄酮提取率计算精密量取供试品溶液2ml，置25ml量瓶中，加30％乙醇至6ml，照标准曲线制备项下的方法，自“加5％亚硝酸钠溶液1ml”起，依法测定吸光度，同时取供试品溶液2ml，除不加氢氧化钠试液外，其余同上操作，作为空白，从标准曲线上读出供试品溶液中含芦丁的浓度，根据下列公式计算，即得。A(％)＝BCm/D×100式中：B为供试液中芦丁的含量(μg/mL)，C为最终定容体积(mL)，D为稀释倍数，m为原料质量(g)。实施例1本专利技术镰形棘豆中总黄酮的提取方法专利技术人对镰形棘豆中总黄酮的提取方法进行了多个工艺参数的考察。(1)微波功率的考察准确称取1g干燥的镰形棘豆原料，置于圆底烧瓶中，提取40min，液料比为20:1，提取温度为50℃，考察不同微波功率对总黄酮提取率的影响，结果如表1所示。表1功率(W)200300400500600700800900提取率(％)0.570.680.770.820.961.151.081.01结果表明，在200W～900W范围内，均可以有效提取出镰形棘豆中的黄酮。其中，600W～900W范围内效果较佳，700W效果最佳。(2)提取时间的考察准确称取1g干燥的镰形棘豆原料，置于圆底烧瓶中，乙醇浓度为75％，提取温度为50℃，微波功率为700W时，考察不同提取时间对总黄酮提取率的影响，结果如表2所示。表2时间(min)101520303540提取率(％)0.670.850.971.131.041.03结果表明，在10分钟～40分钟范围内，均可以有效提取出镰形棘豆中的黄酮。其中，20分钟～40分钟范围内效果较佳，30分钟效果最佳。(3)液料比的考察准确称取1g干燥的镰形棘豆原料，置于圆底烧瓶中，微波功率为700w，提取35min，乙醇浓度为75％时，考察不同液料比对总黄酮提取率的影响，结果如表3所示。表3结果表明，在1:10～1:35范围内，均可以有效提取出镰形棘豆中的黄酮。其中，1:20～1:35范围内效果较佳，1:25效果最佳。(4)温度的考察准确称取1g干燥的镰形棘豆原料，置于圆底烧瓶中，微波功率为700w，提取35min，乙醇浓度为75％时，考察不同温度比对总黄酮提取率的影响，结果如表4所示。表4温度(℃)7080859095提取率(％)0.850.971.151.111.06结果表明，在70-95℃范围内，均可以有效提取出镰形棘豆中的黄酮。其中，80～95℃范围内效果较佳，85℃效果最佳。在上述结果的基础上，专利技术人对提取工艺进行了进一步优化筛选，结果显示，当微波功率到731W，提取时间为26分钟，液料比26：1时，该条件下镰形棘豆中总黄酮提取率为1.56％。实施例2本专利技术镰形棘豆总黄酮提取物的制备1)微波提取：微波提取功率为731w，提取时间为26min，本文档来自技高网...
【技术保护点】
镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：取镰形棘豆，加入浓度为70％‑80％醇类溶剂，微波提取，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g。
【技术特征摘要】
1.镰形棘豆中具有抗炎活性总黄酮的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：取镰形棘豆，加入浓度为70％-80％醇类溶剂，微波提取，所述醇类溶剂与药材的体积质量比为10～35:1mL/g。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述低级醇类溶剂为甲醇或乙醇。3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述醇类溶剂的浓度为75％。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于：所述微波提取的功率为200W～900W，优选600W～900W，更优选700W。5.根据权利要求1-4任一项所述的提取方法，其特征在于：所述微波提取的时间为10分钟～40分钟，优选20分钟～40分钟，更优选30分钟。6.根据权利要求1-5一项所述的提取方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈晨，李玉林，刘凤芹，陈涛，
申请(专利权)人：中国科学院西北高原生物研究所，
类型：发明
国别省市：青海,63
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