混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用，所述混源萜类化合物D1399的结构式如式(Ⅰ)所示。本发明专利技术通过体外MTT抗肿瘤活性评价发现，D1399对人乳腺癌细胞株MDA‑MB‑435具有显著的抑制作用。初步的作用机理研究表明，D1399可同时通过Caspase依赖的内源性和外源性途径诱导肿瘤细胞凋亡。因此，所述D1399可应用于制备抗乳腺癌药物，并具有良好的开发应用前景，

【技术实现步骤摘要】
混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用
本专利技术属于药物化学
，更具体地，涉及一种混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用。
技术介绍
在各种疾病中，癌症是致人死亡的主要疾病之一。据WHO报告，全世界每年约有600万人被癌症夺去生命，估计到2020年将升至1000万人。乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，发病率在过去五十年中呈缓慢上升趋势，在许多西方国家中，乳腺癌的发病率占女性癌症的首位。在中国，癌症的健康负担逐年增长，每年超过160万人诊断为癌症，120万因癌症而死亡。与其他大多数国家一样，乳腺癌也成为了中国女性最常见的癌症；每年中国乳腺癌新发数量和死亡数量分别占全世界的12.2％和9.6％。目前治疗恶性肿瘤的主要方法包括：手术治疗、抗癌药物的化学治疗、放射治疗和生物反应调节剂及其它治疗。其中化疗在恶性肿瘤治疗中占有不可替代的地位。对于乳腺癌，常用治疗手段主要是以传统的手术治疗为主，术后辅以局部或全身的放疗、化疗及内分泌治疗，其中化疗是治疗乳腺癌的重要辅助性手段，化疗能够明显降低乳腺癌的术后复发率，对晚期乳腺癌失去根治机会者采用化疗也有明显的缓解率。但是，由于抗恶性肿瘤药物的选择性差，毒副作用大，造成恶性肿瘤患者免疫功能低下，生活质量降低，这使得化疗药物的使用受到一定的限制。因此，从不同途径寻找高效、低毒、特异的抗肿瘤药物仍是肿瘤药物治疗的当务之急。随着细胞分子生物学的发展，可将癌症定义为细胞周期异常性疾病。癌症从细胞水平上可以看作是调控细胞周期或细胞凋亡的某一个或某几个环节发生紊乱，使癌化细胞无限制地盲目无序增殖的一种状态。细胞凋亡诱导剂能通过调控细胞凋亡的生物过程，控制和矫正癌化细胞盲目无序增殖的状态。因此，新的细胞凋亡诱导剂有可能开发成新的化疗药物用于治疗癌症，而检测细胞凋亡诱导作用的生物活性指标则可用于筛选和发现新的抗癌活性物质。混合生源萜(混源萜)是一类由聚异戊烯途径与其它生物合成途径混杂偶联所产生的混源代谢产物。混源代谢产物的生物合成过程中往往会有众多杂原子的引入，使得分子结构中形成不同的极性中心，具有较强的反应活性，因而容易与生物大分子相结合。因此，混源萜类化合物已是药物先导化合物的重要来源。
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有技术中的不足，提供了一种混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用。本专利技术报道了D1399在体外对人乳腺癌细胞生长的抑制作用和初步作用机制，为进一步开发的抗肿瘤新型候选药物奠定基础。本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：本专利技术提供了一种混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用，所述混源萜类化合物D1399的结构式如式(Ⅰ)所示：本专利技术的混源萜类化合物D1399分子量为503。其结构运用核磁共振(H-NMR,13C-NMR,HSQC,HMBC)、高分辨质谱(ESI-MS)等现代波谱技术进行测定。D1399的合成方法可以参考现有技术，例如US20040127540A。本专利技术通过体外实验证明D1399具有很强的抗肿瘤活性，可作为治疗乳腺癌等其他实体肿瘤的先导化合物，可用于制备抗肿瘤药物。进一步地，本专利技术在体外抗乳腺癌细胞试验中发现，所述D1399对人乳腺癌细胞MDA-MB-435生长抑制作用的IC50为0.89μM，体外抑制乳腺癌细胞生长活性显著。因此，本专利技术提供一种对罹患癌症的任何哺乳动物(特别是人类)进行化合物联合治疗的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的本专利技术化合物或其药用组合物。进一步地，所述药物还包括药学上可接受的载体或稀释剂。“药学上可接受的载体”指药物中的非活性成分，例如但不限于：碳酸钙、磷酸钙、各种糖(例如乳糖、甘露醇等)、淀粉、环糊精、硬脂酸镁、纤维素、碳酸镁、丙烯酸聚合物或甲基丙烯酸聚合物、凝胶(gelatin)、水、聚乙二醇、丙二醇、乙二醇、蓖麻油或氢化蓖麻油或多乙氧基氢化蓖麻油、芝麻油、玉米油、花生油等。“药学上可接受的稀释剂”如淀粉(如玉米淀粉、小麦淀粉、马铃薯淀粉等)、乳糖、糊精、蔗糖、预胶化淀粉、微晶纤维素、无机盐类(如磷酸氢钙、硫酸钙、残酸钙等)和甘露醇等。药物可以是药学上可接受的任意一种剂型。包括具有适当组成的任何固体(片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂)等或液体(溶液剂、混悬剂或乳剂)或者口服、局部给药或肠胃外给药，它们可以包含所述纯化合物或者与任何载体或其它药理学活性化合物相结合。当进行肠胃外给药时，需要对这些组合物进行灭菌处理。本专利技术化合物或组合物的给药可以通过任何适当的方法进行，如静脉输注、口服制剂、腹膜内和静脉内给药。我们优选输注时间最多为48小时。包含本专利技术化合物的药用组合物可以通过以缓释配方中的脂质体或毫微球包囊方式或通过其它标准传递方式进行给药。所述化合物的正确剂量将根据具体剂型、应用模式和具体部位、患者及所要治疗的肿瘤而变化、还需考虑其它因素如年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄速率、患者症状、药物结合、反应敏感性和疾病严重程度，可以在最大允许剂量范围内连续给药或者定期给药。本专利技术的化合物和组合物可以与其它药物一起使用以提供联合治疗。所述其它药物可以形成该同一组合物的一部分，或者作为单独组合物在相同时间或不同时间进行给药，对其它药物的特性没有特别限制。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术发现了混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的新应用，在体外抗乳腺癌细胞生长模型中，通过四甲基二氮唑蓝(MTT)比色法检测到D1399对人乳腺癌细胞MDA-MB-435生长抑制作用的IC50为0.89μM，体外抑制乳腺癌细胞生长活性显著。通过对D1399抗乳腺癌的分子机制的研究，表明D1399通过影响乳腺癌细胞的Caspase3、Caspase8、Caspase9、PARP蛋白的表达量，诱导细胞凋亡来实现抗乳腺癌的活性，更增加了其成为候选抗乳腺癌药物的可能，为进一步临床试验奠定了理论基础。附图说明图1是本专利技术实施例1中人乳腺癌细胞MDA-MB-435经不同浓度的D1399作用不同时间后的形态学变化的结果图。图2是本专利技术实施例3中TUNEL免疫荧光染色法检测D1399诱导乳腺癌细胞MDA-MB-435凋亡的生物学活性图。图3是本专利技术实施例3中TUNEL免疫荧光染色法检测D1399诱导乳腺癌细胞MDA-MB-435凋亡的对照组和给药组的阳性细胞的计数结果图。图4是本专利技术实施例3中利用WesternBlotting技术检测D1399处理人乳腺癌细胞MDA-MB-435后凋亡相关蛋白的表达水平的图。具体实施方式以下结合具体实施例来进一步说明本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限定。除非特别说明，本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。除非特别说明，本专利技术所用试剂和材料均为市购。实施例1D1399对人乳腺癌MDA-MB-435细胞生长和形态的影响MDA-MB-435细胞消化后计数，按每孔2.0×106个细胞分别接种至P60培养皿中，置于37℃、5％CO2孵箱中孵育培养。24h后更换为含浓度依次为0、2、4μM的D1399的培养基，分别继续培养3、6、9h后，倒置显微镜下观察细胞形态及生长的变化。如图1所示，D1399对人乳腺癌MDA-MB-435细胞的生长具有显本文档来自技高网...

【技术保护点】
混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用，其特征在于，所述混源萜类化合物D1399的结构式如式(Ⅰ)所示：

【技术特征摘要】
1.混源萜类化合物D1399在制备抗乳腺癌药物中的应用，其特征在于，所述混源萜类化合物D1399的结构式如式（Ⅰ）所示：（Ⅰ）。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物的剂型为片剂、丸...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎孟枫，袁洁，黄益，于暕辰，许佳怡，陈彬，蒋思萍，李静，刘岚，高晓霞，
申请(专利权)人：中山大学，西藏自治区高原生物研究所，广东药学院，
类型：发明
国别省市：广东;44