巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法技术

一种巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括菌种活化、种子培养、上罐发酵培养、喷雾干燥的步骤，在进风口温度110-150℃，出风口温度60-90℃，进料速度为8-15ml/min的条件下，采用5-10%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，由于巨大芽孢杆菌能产生芽孢，而芽孢对高温、高压干燥、氧化、酸碱和毒物等不良因素抵抗力较强，因此巨大芽孢杆菌具有耐高温耐挤压及耐酸碱等特性，通过本发明专利技术制得的菌粉菌体存活率高，为后续肥料制备打下基础，适合规模化工业生产，所得菌粉它可以施于土壤中，提高土壤中微生物数量，提高植物的抗病能力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物肥料制备的
，具体说是一种巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法。
技术介绍
巨大芽孢杆菌为革兰氏阳性菌及好氧菌，不但能分解有机磷物质，而且也能分解难溶性磷化合物，并将有机磷物质和磷化合物转化成易被植物吸收的磷，从而提高土壤磷素的利用率，达到提高植物磷素营养的目的。因此，巨大芽孢杆菌在农业上可用于制造磷细菌肥料。同时有些巨大芽孢杆菌的菌株可产生抑菌物质，对棉花立枯病菌等多种病原真菌具有明显的抑制作用。在实际的使用中巨大芽孢杆菌是以固体粉状形态存在的，而现有的巨大芽孢杆菌菌粉的制备过程相对较为复杂，不利于规模化的生产，而且菌粉中菌体的存活率较低。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法。本专利技术为解决公知技术中存在的技术问题所采取的技术方案是:本专利技术的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCCNo.1.223；（2）种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：葡萄糖10-12g/L,磷酸氢二钾5-6g/L，磷酸二氢钾2-3g/L，尿素1-1.5g/L，酵母粉5-6g/L，硫酸镁0.35-0.41g/L，PH7.0；（3）上罐发酵培养：将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照5-10%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为上述种子培养基，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；（4）喷雾干燥：将菌液利用喷雾干燥，采用5-10%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，喷雾干燥条件为：进风口温度110-150℃，出风口温度60-90℃，进料速度为8-15ml/min。本专利技术还可以采用以下技术措施：所述的菌液经喷雾干燥成为菌粉后采用无菌密封袋包装防止吸潮。喷雾干燥步骤中，喷雾干燥条件为：进风口温度110℃，出风口温度为60℃，菌体保护剂为10%，进料速度为10ml/min。喷雾干燥步骤中，喷雾干燥条件为：进风口温度130℃，出风口温度为80℃，菌体保护剂为8%，进料速度为8ml/min。喷雾干燥步骤中，喷雾干燥条件为进风口温度150℃，出风口温度为90℃，菌体保护剂为5%，进料速度为15ml/min。本专利技术具有的优点和积极效果是:本专利技术的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法中，利用喷雾干燥技术制备菌粉，由于巨大芽孢杆菌能产生芽孢，而芽孢对高温、高压干燥、氧化、酸碱和毒物等不良因素抵抗力较强，因此巨大芽孢杆菌具有耐高温耐挤压及耐酸碱等特性，通过本专利技术制得的菌粉菌体存活率高，为后续肥料制备打下基础，适合规模化工业生产，所得菌粉它可以施于土壤中，提高土壤中微生物数量，提高植物的抗病能力。具体实施方式实施例1：本专利技术的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCCNo.1.223；（2）种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：葡萄糖10g/L,磷酸氢二钾6g/L，磷酸二氢钾2g/L，尿素1g/L，酵母粉6g/L，硫酸镁0.41g/L，PH7.0；（3）上罐发酵培养：将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照5%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为与上述种子培养基相同，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；（4）喷雾干燥：将菌液利用喷雾干燥，采用10%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，喷雾干燥条件为：进风口温度110℃，出风口温度60℃，进料速度为10ml/min。菌液经喷雾干燥成为菌粉后采用无菌密封袋包装防止吸潮。实施例2：本专利技术的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCCNo.1.223；（2）种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：葡萄糖12g/L,磷酸氢二钾5g/L，磷酸二氢钾2.5g/L，尿素1.3g/L，酵母粉5g/L，硫酸镁0.35g/L，PH7.0；（3）上罐发酵培养：将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照8%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为与上述种子培养基相同，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；（4）喷雾干燥：将菌液利用喷雾干燥，采用8%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，喷雾干燥条件为：进风口温度130℃，出风口温度80℃，进料速度为8ml/min。菌液经喷雾干燥成为菌粉后采用无菌密封袋包装防止吸潮。实施例3：本专利技术的巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCCNo.1.223；（2）种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：葡萄糖11g/L,磷酸氢二钾5.5g/L，磷酸二氢钾3g/L，尿素1.5g/L，酵母粉5.5g/L，硫酸镁0.38g/L，PH7.0；（3）上罐发酵培养：将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照10%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为与上述种子培养基相同，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；（4）喷雾干燥：将菌液利用喷雾干燥，采用5%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，喷雾干燥条件为：进风口温度150℃，出风口温度90℃，进料速度为15ml/min。所述的菌液经喷雾干燥成为菌粉后采用无菌密封袋包装防止吸潮。以上所述，仅是本专利技术的较佳实施例而已，并非对本专利技术作任何形式上的限制，虽然本专利技术已以较佳本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：（1）菌种活化：将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCC No.1.223；（2）种子培养：挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：葡萄糖10‑12g/L,磷酸氢二钾5‑6 g/L，磷酸二氢钾2‑3 g/L，尿素1‑1.5 g/L，酵母粉5‑6 g/L，硫酸镁0.35‑0.41 g/L，PH7.0；（3）上罐发酵培养：将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照5‑10%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为上述种子培养基，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；（4）喷雾干燥：将菌液利用喷雾干燥，采用5‑10%脱脂奶粉作为保护剂干燥得粉末，喷雾干燥条件为：进风口温度110‑150℃，出风口温度60‑90℃，进料速度为8‑15ml/min。

【技术特征摘要】
1.一种巨大芽孢杆菌菌粉的制备方法，包括以下步骤：
（1）菌种活化：
将4℃斜面保存的巨大芽孢杆菌活化，将其分别划线于相应固体培养基上，37℃、培养24h；
菌种来源：巨大芽孢杆菌,购买于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，编号为CGMCCNo.1.223；
（2）种子培养：
挑取活化的菌落，将巨大芽孢杆菌接种于种子培养基进行种子培养，在37℃、200r/min摇床培养20h；
上述种子培养基中按质量浓度包括以下组分：
葡萄糖10-12g/L,磷酸氢二钾5-6g/L，磷酸二氢钾2-3g/L，尿素1-1.5g/L，酵母粉5-6g/L，硫酸镁0.35-0.41g/L，PH7.0；
（3）上罐发酵培养：
将上一步骤中取得的巨大芽孢杆菌种子液按照5-10%接种量接入发酵罐中，发酵培养基为上述种子培养基，通风比1:1，37℃，300r/min，培养21h后收集菌液；
（4）喷雾干燥：
将...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔长晟，任友花，李雪，王羿超，李洪，
申请(专利权)人：天津北洋百川生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12