【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
利用pSUMO系统制备碱性成纤维细胞生长因子的方法,其特征在于包括以下步骤:1)工程菌构建:bFGF的原始基因序列如SEQ ID NO.1,氨基酸序列如SEQ ID NO.2,原始基因序列中存在Ncol酶切位点,故将其第6位的C突变成A,其氨基酸序列仍保持不变,全序列合成优化后的基因序列如SEQ ID NO.3;SUMO蛋白酶ULP1在SUMO C端Gly‑Gly后酶切,使用overlap PCR将SEQ ID NO.3序列与SUMO DNA序列拼接,并在拼接序列两端设计Ncol和Xhol酶切位点,拼接序列内部并无这两内切酶酶切位点,最终得到的序列为SEQ ID NO.4;使用Ncol和Xhol酶切拼接序列与质粒pRSFD连接;设计引物如下:Part A:模板:p SUMOUp primer for pSUMO‑Ncol:CATGCCATGGGCAGCAGCCATCATCAbFGF Down primer for A:CCGCCGCCATTGTGCCTCCACCAATCTGTTCTCPart B:模板:bFGF genebFGF Up Primer for B:AACAGATTGGTG ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:郑扶桑,张健,高伟,蒋妙婷,
申请(专利权)人:厦门欧瑞捷生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:福建;35
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