本发明专利技术提供了一种用于治疗牛皮癣的抗体药物，采用致病菌直接作为抗原进行免疫并获得了显著的抗体效果，所使用的致病菌为现有菌株，也可以从银屑病人患处取得皮屑标本，将标本在含有氯霉素的沙堡弱葡萄糖琼脂培养基上培养出真菌，划线分离培养出单菌落，经鉴定出菌种，挑取单菌落接种到液体培养基扩大培养，离心收集菌体获得，再采用甲醛灭活制备抗原，用此抗原直接免疫新西兰大白兔获得抗体，以此抗体为主制备药物用于银屑病人的治疗具有显著的缓解效果。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及牛皮癣治疗药物领域，尤其是一种用于治疗牛皮癣的抗体药物。
技术介绍
银肩病是人们所患的常见慢性炎症性皮肤病，病因尚无确切定论。银肩病分为四 型，其中寻常型银肩病最为常见。典型损害为境界清楚的红斑、丘疹，表面覆盖干燥的多层 鳞肩。该病病程长，病情反复发作，临床治疗较为棘手。目前银肩病的治疗药物很多，但是由 于其病因错综复杂，许多治疗药物的疗效并不能确定，仅以改善患者症状为主。传统的治疗 药物有较多不良反应，相比之下，抗银肩病的生物制剂有针对性强，疗效确切，不良反应少 的优势。近年来有不少针对银肩病免疫发病机制研制了不少具有靶位特异性的生物制剂， 多数显示出良好的应用前景。但从患者的患处取标本培养分离出治病真菌来做抗原再获得 的抗体未见研究。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种用于治疗牛皮癣的抗体药物。 为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是： -种用于治疗牛皮癣的抗体药物，为银肩病真菌（致病菌）作为抗原制备的多克 隆抗体，所述多克隆抗体是由下述方法获得的： (1)制备抗原，将致病菌分别按照以下方法进行操作，其中，所述致病菌为烟曲霉、 热带念珠菌、近平滑念珠菌和/或黑曲霉：A致病菌接种马铃薯葡萄糖培养基中，28°C，160rpm震荡培养，菌液离心，收集沉 淀，向沉淀中加入3. 7%甲醛，4°C过夜灭活； b离心收集灭活后的菌体，用生理盐水重悬，细胞超声粉碎仪粉碎，BCA法测定后 制备成总蛋白量0. 5mg/ml的溶液； c取蛋白溶液与等体积的弗氏完全佐剂混合制备首次免疫抗原，与等体积弗氏不 完全佐剂制备成加强免疫抗原备用； (2)抗体制备：首次免疫，1ml首次免疫抗原皮下注射新西兰大白兔后15、30、45天 分别用加抗原进一步免疫加强，免疫加强最后一次注射后的一周内采集抗血清，获得各种 分离鉴定出真菌的抗体血清。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物，所述步骤（1)中致病菌为热带念珠菌 和/或近平滑念珠菌。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物，还包含药学可接受的辅料、赋形剂。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物，为膏剂。 上述用于治疗牛皮癣的抗体药物的制备方法，具体制备步骤如下： (1)制备抗原，将致病菌分别按照以下方法进行操作，其中，所述致病菌为烟曲霉、 热带念珠菌、近平滑念珠菌和/或黑曲霉：A致病菌接种马铃薯葡萄糖培养基中，28°C，160rpm震荡培养，菌液离心，收集沉 淀，向沉淀中加入3. 7%甲醛，4°C过夜灭活； b离心收集灭活后的菌体，用生理盐水重悬，细胞超声粉碎仪粉碎，BCA法测定后 制备成总蛋白量0. 5mg/ml的溶液； c取蛋白溶液与等体积的弗氏完全佐剂混合制备首次免疫抗原，与等体积弗氏不 完全佐剂制备成加强免疫抗原备用； (2)抗体制备：首次免疫，1ml首次免疫抗原皮下注射新西兰大白兔后15、30、45天 分别用加抗原进一步免疫加强，免疫加强最后一次注射后的一周内采集抗血清，获得各种 分离鉴定出真菌的抗体血清。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物的制备方法，所述步骤（1)中致病菌为 热带念珠菌和/或近平滑念珠菌。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物的制备方法，所述步骤（1)中致病菌是 由下述方法得到的： (1)取标本：常规75%酒精消毒后，刮取银肩病人的患处取表皮细胞（皮肩）及深 层表皮细胞，接种于含〇. 05%氯霉素的沙氏葡萄糖琼脂斜面上，置于28°C培养10-15天； (2)分离真菌：采用划线分离法于沙氏葡萄糖琼脂平板上接种，置于28°C温度下 培养，待培养出单菌落，鉴定真菌，用甘油冷冻法保存鉴定出菌种。 优选的，上述用于治疗牛皮癣的抗体药物的制备方法，将所述步骤（2)所得各种 抗体的血清，进行效价测定，用无菌生理盐水适当稀释后，按比例混合，加入3%水溶性氮 酮、以及乳膏基质制成膏剂。 本专利技术的有益效果是： 上述用于治疗牛皮癣的抗体药物，采用致病菌直接作为抗原进行免疫并获得了显 著的抗体效果，所使用的致病菌为现有菌株，也可以从银肩病人患处取得皮肩标本，将标本 在含有氯霉素的沙堡弱葡萄糖琼脂培养基上培养出真菌，划线分离培养出单菌落，经鉴定 出菌种，挑取单菌落接种到液体培养基扩大培养，离心收集菌体获得，再采用甲醛灭活制备 抗原，用此抗原直接免疫新西兰大白兔获得抗体，以此抗体为主制备药物用于银肩病人的 治疗具有显著的缓解效果；其制备方法简单，无毒副作用，可根据单个病人的致病菌制备出 针对性的药物进行有目的的靶向治疗。【具体实施方式】 下面结合具体实施例对本专利技术所述技术方案作进一步的说明。 实施例1 致病菌分离 1、银肩病人病患处常规75%酒精消毒后，刮取患处取表皮细胞（皮肩）及深层表 皮细胞（病人标本由世安门诊和海馨门诊部提供），共从11位病人病患处取得11种样本。 将11种样本分别接种于含〇. 05%氯霉素的沙氏葡萄糖琼脂斜面上，置于28°C培养2周。沙 氏葡萄糖琼脂按中国药典配制。 2、挑取培养出的真菌，采用划线分离法于沙氏葡萄糖琼脂平板上接种，置于28°C 温度下培养，待培养出单菌落。进行肉眼观察记录每种菌落状态，确定酵母样菌和霉菌，然 后将霉菌用棉兰染色后制成涂片光镜下观察孢子形态，结合菌落形态，通过真菌库对比确 定霉菌的类型；酵母样菌采用念珠菌显色培养基鉴定，挑酵母菌划线接种在念珠菌显色培 养基上，置于35°C培养48小时，观察记录颜色变化，根据不同颜色鉴定菌种。用甘油冷冻法 保存鉴定出的菌种。共培养出4种致病菌分别是烟曲霉，热带念珠菌，近平滑念珠菌和黑曲 霉。其中热带念珠菌，近平滑念珠菌是11种样当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于治疗牛皮癣的抗体药物，其特征在于：为银屑病真菌作为抗原制备的多克隆抗体，所述多克隆抗体是由下述方法获得的：(1)制备抗原，将致病菌分别按照以下方法进行操作，其中，所述致病菌为烟曲霉、热带念珠菌、近平滑念珠菌和/或黑曲霉：A致病菌接种马铃薯葡萄糖培养基中，28℃,160rpm震荡培养，菌液离心，收集沉淀，向沉淀中加入3.7％甲醛，4℃过夜灭活；b离心收集灭活后的菌体，用生理盐水重悬，细胞超声粉碎仪粉碎，BCA法测定后制备成总蛋白量0.5mg/ml的溶液；c取蛋白溶液与等体积的弗氏完全佐剂混合制备首次免疫抗原，与等体积弗氏不完全佐剂制备成加强免疫抗原备用；(2)抗体制备：首次免疫，1ml首次免疫抗原皮下注射新西兰大白兔后15、30、45天分别用加抗原进一步免疫加强，免疫加强最后一次注射后的一周内采集抗血清，获得各种分离鉴定出真菌的抗体血清。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：张耀洲，盖其静，赵娜，
申请(专利权)人：天津耀宇生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12
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