本实用新型专利技术公开了一种快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸，所述试纸包括支撑垫片(1)，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜(2)，所述硝酸纤维素膜的一端连接吸水垫(3)，另一端连接偶合物垫片(4)，所述偶合物垫片连接样本垫片(5)，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件(6)，上方设有第二固定部件(7)，其特征在于，所述硝酸纤维素膜(2)中间部位检测线(8)包被有可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗体，检测线两边分别设有控制线(9)，所述偶合物垫片(4)上涂布有金标记的可溶性生长刺激表达基因2蛋白单克隆抗体或多克隆抗体以及控制线偶合物。
【技术实现步骤摘要】
本技术属于临床医学诊断领域，具体涉及一种用于定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸。
技术介绍
可溶性生长刺激表达基因2蛋白(ST2)基因是1989年由Tominaga等首先在BALB/C-3T3细胞系中得到的，是I L-1(白细胞介素I)受体家族成员之一，该基因表达两种蛋白产物:一种带有跨膜结构，称为跨模型ST2(ST2L)，一种可以分泌到细胞外，称为分泌型ST2 (sST2)。研宄发现ST2可由心脏成纤维细胞和心肌细胞表达，是生物机械应力诱导产生的一种心肌蛋白。ST2基因表达于肥大细胞激活的辅助性T细胞2 (Th2)巨噬细胞和心肌细胞。人的ST2基因约40kb，位于人类染色体2ql2，可编码一种可溶性蛋白(sST2)和一种跨膜形式蛋白(ST2L)，两者的转录分别受到不同的启动子调控。研宄表明sST2是IL-33的诱骗受体，它可以与IL-33结合，从而阻断IL-33与ST2L结合，继而削弱IL-33/ST2L信号通路的心血管保护作用在心肌受到过度牵拉造成损伤的过程中，大量sST2生成使心肌缺乏足够的IL-33的保护，从而加速心肌重构和心室功能障碍，最终导致死亡风险增高。IL-33是IL-1家族成员，可以与靶细胞上的膜受体结合后介导下游信号通路，或者被运输到靶细胞的细胞核作为DNA结合因子行使功能。研宄表明，机械应力可刺激心脏成纤维细胞产生IL-33，与其受体复合物(由ST2L和IL-1RAcP组成)结合后，将活化信号传递至细胞内，经过下游的IL-1相关蛋白激酶髓样分化因子88和肿瘤坏死因子受体相关因子6等一系列信号分子，激活核转录因子K B (nuclear factor κ B，NF- κ B)和促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)，从而调节基因转录，导致Th2细胞效应分子IL-5 IL-4和IL-13等的释放。当心脏成纤维细胞和心肌细胞受到过大的压力负荷时，这些效应分子可以使心脏作出适应性反应，防止过度牵拉导致的心肌肥大和心肌纤维化发生。与此同时，心肌sST2大量生成，sST2与IL-33结合后竞争性抑制其与ST2L结合，阻断经ST2L的信号传导，最终抑制NF-B和MAPK激活，从而大大降低IL-33/ST2L信号通路的内源性心肌保护作用。ST2能够独立的诊断心力衰竭，结合NT-proBNP时，其对心衰的诊断的敏感性和特异性均高于ST2和NT-proBNP单独诊断的结果。基于ST2水平能够很好的预测病患在一年内的死亡率，所以其在指导病患是否进行心脏移植时提供数据支持，有利于提前干预提高病患的治愈率和成活率。目前，检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的方法目前主要是酶联免疫技术(ELISA)，ELISA技术存在以下缺点:检测设备要求高，成本高；干扰因素较多，重复性不好；检测时间长。因此酶联免疫技术检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白不适合临床快速诊断。鉴于目前尚无快速的定量检测方法，本技术的目的是提供一种可用于快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸以及一种可用于快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸盒，所述试纸和试纸盒具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点。
技术实现思路
本技术的一个目的是提供一种快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸，本技术所述快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸具有方便快捷、操作简单、结果准确等优点，适于临床快速诊断。本技术的技术方案是:一种用于定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸，所述试纸包括支撑垫片1，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜2，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫3，另一端上方层叠连接偶合物垫片4，所述偶合物垫片上方层叠连接样本垫片5，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件6，上方设有第二固定部件7，其特征在于，所述硝酸纤维素膜2中间部位设有检测线8并包被有可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗体，检测线两边分别设有控制线9，所述偶合物垫片4上涂布有金标记的可溶性生长刺激表达基因2蛋白单克隆抗体或多克隆抗体以及控制线偶合物。进一步地，所述控制线9包被有抗DNP抗体，所述控制线偶合物为DNP-BSA标记的胶体金。进一步地，所述第一固定部件6为双面胶，第二固定部件7为单面胶。进一步地，所述试纸外还包括一外壳10，所述外壳包裹在所述试纸外，露出样本垫片5、硝酸纤维素膜2上的检测线8和两条控制线9、以及吸水垫3。所述外壳优选塑料外壳。进一步地，所述两条控制线9与检测线8为平行设置。本技术所述的试纸盒具有方便携带和贮存的优点。本技术所述的快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸或试纸盒的工作原理是:采用双向侧流免疫反应原理，通过双抗体夹心法制备而成。检验时样本中的可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗原首先与偶合垫上的可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗体偶合物发生免疫反应，形成免疫复合物。其后免疫复合物随着样本在硝基纤维素膜上层析流动，当免疫复合物层析至硝基纤维素膜上的检测区(ST2检测线)时，与预先包被在硝基纤维素膜上的抗可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗体发生反应从而被固定在硝基纤维素膜的检测线上。血液中的可溶性生长刺激表达基因2蛋白越多，检测线上的复合物越多，条带上的光密度值就越高。同时，在检测过程中，控制线偶合物(即DNP-BSA标记的胶体金)，也会随样本在硝基纤维素膜上层析，当层析至硝基纤维素膜的控制线时，DNP-BSA胶体金会与预先包被在硝基纤维素膜上的抗DNP抗体发生反应从而被固定在对照区(控制线)上。由于胶体金为红色，因而固定在硝基纤维素膜控制线上的抗DNP中的DNP-BSA胶体金免疫复合物将显示红色。当样本中不含可溶性生长刺激表达基因2蛋白时，则只显示两条控制线。当样本含可溶性生长刺激表达基因2蛋白时，检测线就会清晰的显示出来。当反应结束后，利用多功能免疫检测仪(瑞莱生物工程(深圳)有限公司)将控制线和检测线的光密度进行分析，并将所分析得到的结果进行运算，从而得到相对光密度值(RI)。然后检测仪根据已预先设置在检测仪内的标准曲线对可溶性生长刺激表达基因2蛋白的浓度进行计算并显示结果，以ng/mL为单位表示。【附图说明】图1是本技术所述快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸的一种优选实施方式的结构示意图。其中，1:支撑垫片，2:硝酸纤维素膜，3:吸水垫，4:偶合物垫片，5:样本垫片，6:第一固定部件，7:第二固定部件，8:检测线，9:控制线。图2是本技术所述快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸盒的一种优选实施方式的不图。其中，3:吸水垫，5:样本垫片，8:检测线，9:控制线，10:外壳。【具体实施方式】以下结合附图对本技术所述快速定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸或试纸盒进行详细说明，不能理解为是对本技术的限制。以下实施例中所使用的材料和试剂除特别说明外，当前第1页1 2 本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种用于定量检测可溶性生长刺激表达基因2蛋白的试纸，所述试纸包括支撑垫片(1)，位于所述支撑垫片上的硝酸纤维素膜(2)，所述硝酸纤维素膜的一端上方层叠连接吸水垫(3)，另一端上方层叠连接偶合物垫片(4)，所述偶合物垫片上方层叠连接样本垫片(5)，所述样本垫片另一端部的下方设有第一固定部件(6)，上方设有第二固定部件(7)，其特征在于，所述硝酸纤维素膜(2)中间部位设有检测线(8)并包被有可溶性生长刺激表达基因2蛋白抗体，检测线两边分别设有控制线(9)，所述偶合物垫片(4)上涂布有金标记的可溶性生长刺激表达基因2蛋白单克隆抗体或多克隆抗体以及控制线偶合物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：赵俊平，刘红剑，吴伟云，夏宣喜，
申请(专利权)人：瑞莱生物工程深圳有限公司，
类型：新型
国别省市：广东;44
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