一种转氨酶的固定化方法技术

技术编号:11740574 阅读:245 留言:0更新日期:2015-07-16 00:38
本发明专利技术提供一种转氨酶的固定化方法。将聚乙烯醇海绵上的羟基氧化为羰基,加入转氨酶将羰基转化为氨基,絮凝后,再用多元醛交联固定化,得固定化转氨酶。该固定化方法,具有酶活单位为高,可纯化酶等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术设及。
技术介绍
转氨酶可将化合物中的幾基转化为氨基。可W高效生产手性胺,因其底物相对廉 价、产物纯度高、反应条件温和的特点,应用价值巨大。 固定化酶易于与产品分离并可回收重复使用,比游离酶具有更好的稳定性W及更 长的操作周期。酶或细胞的固定化方法很多,如物理吸附、亲和联结、共价交联、凝絮包埋 等。 CN201280031237使用树脂为载体固定转氨酶,但W树脂为载体,存在树脂价格昂 贵,载酶量低的缺点。W该专利实施例1~5为例,1克树脂载体仅能固载0. 125克转氨酶, 固定化转氨酶酶活单位低;且现有固定化方法无纯化过程,会将游离酶中的杂质蛋白也固 定于载体。 聚己締醇海绵是由聚己締醇缩醒化而得,具有优异的吸水和力学性能,比表面积 大,有作为转氨酶固定化载体的潜质,但聚己締醇海绵仅含有哲基活性基团,不利于采用化 学键固定转氨酶。
技术实现思路
为了解决上述技术问题,本专利技术提供了一种经济可行的,载酶量高、固定化酶酶活 高、有纯化作用的转氨酶的固定化方法。 本专利技术提供了,其特征包括如下步骤:[000引 a、氧化;取聚己締醇海绵,在双氧水溶液中,加入铁盐本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种转氨酶的固定化方法,其特征包括如下步骤:a、氧化:取聚乙烯醇海绵,在双氧水溶液中,加入铁盐为催化剂,20℃~70℃反应,将聚乙烯醇海绵上部分羟基氧化为羰基;氧化后的聚乙烯醇海绵离心或挤压去除氧化溶液,加水,再离心或挤压脱水;b、转氨:将脱水海绵与转氨酶水溶液混合,加入辅酶、氨基供体,将海绵上的羰基转化氨基;再离心或挤压去除海绵中溶液;c、交联固定:加入絮凝剂使酶沉淀于海绵孔壁内,再离心或挤压去除海绵中溶液;再将海绵与多元醛混合交联转氨酶,离心或挤压去除海绵中溶液;d、视需要重复步骤b至c步0~20次,以增加酶或细胞在载体上的载量,水洗涤固定化酶。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:黄清东张翔向世明
申请(专利权)人:成都百特万合医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:四川;51

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