定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法及检测试剂盒，本发明专利技术在原有肌氨酸氧化酶分光光度检测法的基础上，着重改善原有方法灵敏度不足以满足临床检测的缺点。选用目前检测灵敏度较高、稳定性较好的色原物质，使用双试剂检测法，合理分配各反应物质在整体反应体系中的浓度，检测吸光度数据读取时采用固定时间点读取法。使检测灵敏度较以往分光光度检测法大大提升。因此，使得本检测方法既保留了以往分光光度检测法成本低、可在全自动生化仪上使用的优点外，也改善其检测灵敏度低的缺点，使目前的检测灵敏度提升到10-7～10-6mol/L，已能满足临床检测的需求。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法及检测试剂盒。
技术介绍
目前用于检测肌氨酸的方法主要有液相色谱或气象色谱与质谱联用检测法、肌氨酸氧化酶荧光检测法、毛细管电泳电化学发光检测法、肌氨酸氧化酶分光光度检测法。色谱-质谱联用检测法虽然检测灵敏度、准确度、精密度均较高，但由于色谱-质谱设备昂贵，检测成本较高，检测速度慢，很难大批量检测，且操作复杂一般人很难掌握。因此，常应用于科研，很难应用临床大样本量诊断检测。 肌氨酸氧化酶荧光检测法、毛细管电泳电化学发光检测法其检测灵敏度、准确度、精密度略低于色谱-质谱联用检测法，但也可满足临床的需求。此两种方法的检测成本较色谱-质谱联用检测法已大大降低，但在检测时仍需购置专门的检测装置，如荧光检测器、毛细光电泳仪等专门设备。并且人工操作的部分很高，对应用于常规临床检测来讲仍有一定的难度。肌氨酸氧化酶分光光度检测法，其检测成本低、可应用于目前任何一种全自动生化分析仪，可应用于临床高速大样本量的检测需要。但由于以往的色原灵敏度低，造成该方法的灵敏度很难满足临床的需求。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于提供一种成本低、灵敏度高本文档来自技高网...

【技术保护点】
定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法，其特征在于，该方法具体为：1）2）反应结束后有醌亚胺类有色物质生成造成吸光度的变化，并且该吸光度的变化与肌氨酸的浓度成正比，以检测得到的样本吸光度值与校准曲线对比，得到相应的样本浓度数值；其中，一试剂R1浓度为：缓冲液50？100mmol/L，4？氨基安替比林2？4mmol/L，过氧化物酶>20KU/L；二试剂R2浓度为：缓冲液50？100mmol/L，色原3？5mmol/L，肌氨酸氧化酶5？10KU/L；R1/R2试剂比例为3/1？4/1，肌氨酸样本与总体试剂量的比例为1/25~1/20。FDA00002338318700011.jpg,FDA0000233...

【技术特征摘要】
1.定量检测肌氨酸的肌氨酸氧化酶方法，其特征在于，该方法具体为 1)肌氨酸+H20+02-aa8M··__ 甘氨酸 + 甲酸+H2O2; 2)H202+4-氨基安替比林+色原-獲·- 醌亚胺类有色物质+H2O; 反应结束后有醌亚胺类有色物质生成造成吸光度的变化，并且该吸光度的变化与肌氨酸的浓度成正比，以检测得到的样本吸光度值与校准曲线对比，得到相应的样本浓度数值； 其中，一试剂Rl浓度为缓冲液50-100mmol/L，4-氨基安替比林2-4mmol/L，过氧化物酶>20KU/L ;二试剂R2浓度为缓冲液50-1OOmmoI/L，色原3-5mmol/L，肌氨酸氧化酶5-10KU/L ;R1/R2试剂比例为3/1-4/1，肌氨酸样本与总体试剂量的比例为1/25 1/20。2.如权利要求I所述的非诊断性方法，其特征在于，所述缓冲液包括Tris-HCL缓冲液、磷酸盐缓冲液或N-三羟基代甲基-3-氨基丙磺酸缓冲液，缓冲液PH值为7. (T9. O。3.如权利要求I所述的方法，其特征在于，所述色原包括N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺钠盐(TOOS)或N，N-双(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二钠盐(TODB)或N-(2-羟基-3-磺丙基)_3’ 5- 二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)。4.如权利要求I所述的方法，其特征在于，不同所述色原所采用的检测主波长不同...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖飞，刘明，王萌，王大光，许宏涛，邹丽辉，黄薇，
申请(专利权)人：卫生部北京医院，
类型：发明
国别省市：