【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种制备人表皮生长因子的工艺的方法研究。具体的说，就是以健康成年男性新鲜尿液为原料，经过超滤、等电点沉淀以及梯度洗脱法等现代蛋白质高端生化分离技术来制备人表皮生长因子，可以从10L尿液中，得到初步电泳纯的人表皮生长因子0.61mg。【专利说明】
本专利技术涉及生物
，具体地说用超滤浓缩方法，将原尿浓缩10倍以上。然后利用等电点法及饱和硫酸铵，沉淀出尿中蛋白的一种制备人表皮生长因子的方法研究。
技术介绍
表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)是最早发现的生长因子，对调节细胞生长、增殖和分化起着重要作用。在人类，表皮生长因子蛋白有53个氨基酸残基，三个二硫键，质量6千道耳顿。 在人体中，表皮生长因子是由53个氨基酸残基组成的单链多肽，多肽中没有丙氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸。它有三个二硫键，这些二硫键是它具有生物活性所必需的，如加入琉基试剂和尿素，则表皮生长因子失活，肽链上的巯基可在空气中自然氧化而完全恢复活性。 表皮生长因子是人体内分泌的一种重要的生长因子，极微量即能强烈促进...
【技术保护点】
一种人表皮生长因子的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）超滤浓缩工序:取10L尿液，用50%NaOH调pH，静置1.5h,虹吸上清液，用冰醋酸调节PH值，静置0.5h，将上清液进行超滤浓缩至2L，之后再用冰醋酸调节PH值，最后放于4℃的环境中过夜；（2）蛋白质等电点沉淀工序: 上清液加(NH4)2SO4至饱和，4 ℃静置,离心后沉淀；（3）梯度洗脱工艺：用洗脱液 A溶解沉淀，搅拌、离心，留取离心液；用洗脱液 B平衡阴离子交换柱，将上述离心液上柱；用洗脱液B溶液洗脱柱子；收集洗脱液；洗脱液经超滤膜，超滤，得超滤液；（4）沉淀超滤液中加入乙醇沉淀，离心，固体再用无水乙醇脱水...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘冠男，邓亚楠，孙延年，
申请(专利权)人：青岛康原药业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37
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