一种多糖多酚植物组织总RNA提取方法技术

本发明专利技术公开了一种多糖多酚植物组织总RNA提取方法，其特征在于：配制100mlRNA提取液；往1.5ml RNase-free离心管中加入400μl-1ml的RNA提取液，加入终浓度为1％-10％的巯基乙醇，混匀；取约100mg植物材料于液氮中研磨成粉末，迅速转移至上述离心管中，震荡混匀；10000-12000r/min，冷冻离心10-15min；取上清液，加入700μl-1ml TRIzol试剂，混匀，立即加入200μl氯仿或氯仿和异戊醇的混合物，剧烈混匀，室温放置几分钟；10000-12000r/min，冷冻离心10-15min；取上清，加入等体积的异丙醇或2-2.5倍体积的无水乙醇，上下颠倒混匀后，室温静置10-20min；10000-12000r/min,冷冻离心10min；加入0.5-1ml70％-75％的乙醇溶液，上下颠倒，室温放置2-15分钟；7500-12000r/min，冷冻离心；重复清洗一次，弃上清后，短暂离心，吸出剩余乙醇；加入适量RNase-free水溶解，得到葡萄叶片总RNA。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种多糖多酚植物组织总RNA提取方法，其特征在于：其步骤为：1)配制100mlRNA提取液：其中包含：50mM三羟甲基氨基甲烷；200mM氯化钠；10mM乙二胺四乙酸；1.5％‑2％十二烷基硫酸钠；2％‑4％聚乙烯吡咯烷酮，溶液pH＝8.0；再加入0.1ml焦碳酸二乙酯，磁力搅拌器上搅拌过夜，高压灭菌；2)往1.5ml RNase‑free离心管中加入400μl‑1ml的RNA提取液，加入终浓度为1％‑10％的巯基乙醇，混匀；3)取约100mg植物材料于液氮中研磨成粉末，迅速转移至上述离心管中，震荡混匀；4)10000‑12000r/min，冷冻离心10‑15min；5)取上清液，加入700μl‑1ml TRIzol试剂，混匀，立即加入200μl氯仿或氯仿和异戊醇的混合物，剧烈混匀，室温放置几分钟；6)10000‑12000r/min，冷冻离心10‑15min；7)取上清，加入等体积的异丙醇或2‑2.5倍体积的无水乙醇，上下颠倒混匀后，室温静置10‑20min；8)10000‑12000r/min,冷冻离心10min；9)加入0.5‑1ml 70％‑75％的乙醇溶液，上下颠倒，室温放置2‑15分钟；10)7500‑12000r/min，冷冻离心；11)重复清洗一次，弃上清后，短暂离心，吸出剩余乙醇；12)加入适量RNase‑free水溶解，得到葡萄叶片总RNA。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙子奎，高文学，丁方美，王锋，刘艳艳，
申请(专利权)人：上海派森诺生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31