酯化红曲菌种及其生产工艺制造技术

技术编号:10278040 阅读:248 留言:0更新日期:2014-08-02 17:20
本发明专利技术公开了一种酯化红曲菌种,该菌种已于2011年2月23日保藏于湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC NO:M2011048。通过真空冷冻管、试管斜面菌种、三角摇瓶种子、种子罐种子、拌种、打堆、摊堆、发酵培养、烘干等方法制备而成。酯化红曲在白酒生产中的应用可有效提高大曲的酯化力,促进有机酸转化成相应的酯,且其对己酸和乙酸转化成己酸乙酯和乙酸乙酯具有很强的选择性,使有机酸转化成相应的酯,解除了酸对细胞的毒害作用;其产生的蛋白酶也可丰富酒的香味成分。在白酒生产应用中加快有机酸与醇的酯化反应,促进生成各种酯类,缩短白酒发酵周期,增加己酸乙酯等呈香类物质的合成能力,显著提高白酒的优质品率。

【技术实现步骤摘要】
酯化红曲菌种及其生产工艺
本专利技术涉及一种生物工程
,特别是一种高酯化力的红曲菌种。
技术介绍
酯化红曲是高酯化力曲霉为主的生物酶和活菌体的生态复合菌制剂。它是以从传统红心大曲中分离得到的红色红曲霉等为出发菌株,利用现代生物工程技术对其进行分离筛选、诱变选育、繁殖复壮、菌体组合等得到多个酯化活性很强的酯化红曲霉菌种,再运用液态纯种生物发酵和固态培养技术,生产出高酯化力的酯化红曲(酶)。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种高酯化力的红曲菌种制造方法。为解决上述技术问题,本专利技术是按如下方式实现的:一种酯化红曲菌种,该菌种已于2011年2月23日保藏于湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC N0:M2011048o分类命名:红色红曲霉JCZM-1,Monascus rubber JCZM-10一种酯化红曲菌种生产工艺,包括以下步骤:步骤一、真空冷冻管在4°C下,常温冰箱保藏;步骤二、试管斜面菌种制备:一、调制培养基:蛋白胨2%、可溶性淀粉2%、麦芽浸粉2%、(NH4)2SO40.1MgSO40.1 %、K2HPO40.1 %、琼脂2 %、自然pH ;以18X 180 (mm)试管,每管装培养基7~IOml (培养基应充分热熔),以棉塞封,10支试管包一捆,竖直放于铁丝框中,0.1lMPa灭菌30min,冷却至50~60°C,倾制斜面(要求斜面培养基长度为试管的3/4),冷凝后包扎成捆;30°C培养48hr,经检查无杂菌,方可使用;二、接种培养:1、真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种:以无菌毛细吸管将一管无菌生理盐水加入安瓿管中,搅动均匀,将菌液吸入毛细吸管,接入斜面试管中;30°c培养3~5天,转接活化2到3代,30°C培养8~10天,置冰箱4°C保存备用;2、斜面试管菌种转接:取一斜面试管种,以75%酒精溶液擦试干净,于超净台内、在酒精灯火焰上以无菌竹签接入20~30支试管斜面;培养与保存方法与所述真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种相同;步骤二、液体二角摇瓶菌种制备:一、培养基:葡萄糖 4%, NaNO30.2%, MgSO40.1 %、牛肉膏 0.3%、蛋白胨 0.8%、酵母膏0.5%,pH5.0 ;以500ml容量三角瓶装量为100ml,将米粉分别称量装,无机盐则统一配制溶解,再分装于各三角瓶,塞棉塞、以牛皮纸包裹。0.1謹?&,灭菌30!^11,冷却备用;二、接种、培养:取一试管斜面菌种,以无菌竹签,接入3~5个液体三角摇瓶培养基中,于30°C、200rpm摇床振荡培养约48h,交车间验收备用;步骤四、种子罐液体种子制备:1、培养液配方:大米粉 7.5%, NaNO30.4%, MgSO40.1 %, K2HPO40.1 %、豆油 0.1% ;用75%酒精清洗待打开的视镜口,在保证种子罐正压的情况下,松开种子罐视镜,在取下视镜同时用酒精火焰圈封住视镜口,然后在火焰圈内打开三角瓶口,迅速将三角瓶内种子倒入种子罐,移开火焰圈同时,盖上视镜,封严;2、培养条件及控制:转速:240rpm、温度:30~32°C、罐压:0.05~0.07MPa、空气流量:8~10m3/hr、培养时间:约48小时;步骤五、发酵培养:原料配方:麸皮:玉米粉:谷壳6: 3: 1,玉米使用前应先进行粉碎;将润水后的原料在125°C的温度下蒸30min ;步骤六、接种:将菌种打入已消毒的盛装菌种的容器,接原料量20%的菌种;在菌种中加入原料量0.1 的食品级冰醋酸或食品级乳酸混勾后开始接种。保证20%的接种量与接种后物料的均匀性;接种后水分要求控制在40~45% ;步骤 七、打堆:用布料车将接好种的物料堆于曲池中部,扒成方堆,厚度为35~40cm,将四周的物料收拢,当环境温度低于25°C要注意物料的保温,将温度探头插入曲堆中部,注意校对仪表显示温度与标准温度计的差值;室温尽量控制在20~30°C;正常情况下,堆料温度在15~24小时升至48 °C ;步骤八、摊堆养花:当曲池物料中心部位品温升至48°C时将全池物料彻底翻拌一遍,再次打堆,堆厚20~30cm,当物料的中心部位品温再次升至45°C时,再将全池物料彻底翻拌一遍后,摊满全池堆,保持品温控制在35~38°C直至加一水。养花期间尽量少用鼓风机鼓风,可通过翻曲来保证物料温度。养花期间要求每间隔3~4小时彻底翻料一次;步骤九、加水:保持物料水分约35 %~48 %,室温在20~25°C,培养3天;步骤十、出池烘干:烘干过程要严格控制物料的烘干温度,要求不超过60°C。本专利技术的积极效果是:酯化红曲在白酒生产中的应用可有效提高大曲的酯化力,促进有机酸转化成相应的酯,且其对己酸和乙酸转化成己酸乙酯和乙酸乙酯具有很强的选择性,同时,因其耐酸性较强,使有机酸转化成相应的酯,解除了酸对细胞的毒害作用;其产生的蛋白酶也可丰富酒的香味成分。酯转化率在95%以上,酯化力≥35mg/g,在白酒生产应用中能加快有机酸与醇的酯化反应,促进生成各种酯类,缩短白酒发酵周期,增加己酸乙酯等呈香类物质的合成能力,显著提高白酒的优质品率。【附图说明】图1是本专利技术的一个实施方式示意图【具体实施方式】下面结合附图和【具体实施方式】对本专利技术作进一步详细的说明。一种酯化红曲菌种,该菌种已于2011年2月23日保藏于湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏号为=CCTCC NO:M2011048。如图1所示,本专利技术一个实施例所提供的一种高酯化力的红曲菌种制造方法,包括以下步骤:S1、真空冷冻管。_18°C,常温冰箱保藏。S2、试管斜面菌种制备。一、培养基:蛋白胨2 %、可溶性淀粉2 %、麦芽浸粉2 %、(NH4)2SO40.1MgSO40.1 %、K2HPO40.1 %、琼脂 2 %、自然 pH。方法:以18X 180 (mm)试管,每管装培养基7~IOml (培养基应充分热熔),以棉塞封,10支试管包一捆,竖直放于铁丝框中,0.1IMPa灭菌30min,冷却至50~60°C,倾制斜面(要求斜面培养基长度为试管的3/4),冷凝后包扎成捆;30°C培养48hr,经检查无杂菌,方可使用。二、接种培养:1、真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种。将安瓿管领出,于超净台内以75%酒精棉球擦试干净,在安瓿管偏顶部以砂轮划一圈轮痕,以灭菌报纸或牛皮纸包裹其两端,于酒精灯火焰上,将其折断。若折断较困难,可采取以下措施:A、于酒精灯火焰上 方用无菌镊子将其顶部敲碎;B、以酒精灯火焰 灼烧安瓿管顶部,以无菌毛细吸管滴一滴无菌水于灼烧处,使其炸裂。接着以无菌毛细吸管将一管无菌生理盐水加入安瓿管中,搅动均匀,将菌液吸入毛细吸管,接入斜面试管中。一般一支安瓿管菌种可接试管斜面3~5支。30°C培养3~5天,转接活化2到3代,30°C培养8~10天,置冰箱4°C保存备用。2、斜面试管菌种转接取一斜面试管种,以75%酒精溶液擦试干净,于超净台内、在酒精灯火焰上以无菌竹签接入20~30支试管斜面。培养与保存方法同真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种。S3、液体三角摇瓶菌种制备。一、培养基:葡萄糖 4%、NaNO30.2%、MgSO40.1%、牛肉膏 0.3%、蛋白胨 0.8%、酵母膏 0.5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酯化红曲菌种,其特征在于,该菌种已于2011年2月23日保藏于湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC NO:M2011048。

【技术特征摘要】
1.一种酯化红曲菌种,其特征在于,该菌种已于2011年2月23日保藏于湖北武汉武昌珞珈山武汉大学中国典型培养物保藏中心,保藏号为=CCTCC NO:M2011048。2.根据权利要求1所述一种酯化红曲菌种的生产工艺,其特征在于:包括以下步骤: 步骤一、真空冷冻管在_18°C下,常温冰箱保藏; 步骤二、试管斜面菌种制备: 一、调制培养基:蛋白胨2%、可溶性淀粉2 %、麦芽浸粉2 %、(NH4)2SO40.1MgSO40.1 %、K2HPO40.1 %、琼脂2 %、自然pH ;以18X180 (mm)试管,每管装培养基7~IOml (培养基应充分热熔),以棉塞封,10支试管包一捆,竖直放于铁丝框中,0.1lMPa灭菌30min,冷却至50~60°C,倾制斜面(要求斜面培养基长度为试管的3/4),冷凝后包扎成捆;30°C培养48hr,经检查无杂菌,方可使用; 二、接种培养: 1、真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种:以无菌毛细吸管将一管无菌生理盐水加入安瓿管中,搅动均匀,将菌液吸入毛细吸管,接入斜面试管中;30°C培养3~5天,转接活化2到3代,30°C培养8~10天,置冰箱4°C保存备用; 2、斜面试管菌种转接:取一斜面试管种,以75%酒精溶液擦试干净,于超净台内、在酒精灯火焰上以无菌竹签接入20~30支试管斜面;培养与保存方法与所述真空冷冻安瓿管转试管斜面菌种相同; 步骤三、液体三角摇 瓶菌种制备: 一、培养基:葡萄糖4%、NaNO30.2%,MgSO40.1%、牛肉膏0.3%、蛋白胨0.8%、酵母膏0.5%,pH5.0 ;以500ml容量三角瓶装量为100ml,将米粉分别称量装,无机盐则统一配制溶解,再分装于各三角瓶,塞棉塞、以牛皮纸包裹。0.1謹?&,灭菌30!^11,冷却备用; 二、接种、培养:取一试管斜面菌种,以无菌竹签,接入3~5个液体三角摇瓶培养基中,于30°C、200rpm摇床振荡培养约48h,交车间验收备用; 步骤四、种子罐液体种子制备: 1、培养液配方:大米粉7.5%, NaNO30.4%, MgSO40.1 %、K2HPO40.1 %、豆油 0.1% ;用75 %酒精清洗待打开的视镜口,在保证种子罐正压的情况下,松开种子罐视镜,在取下视镜同时用酒精火焰圈封住视镜口,然后在火焰圈内打开三角瓶口,迅速将三角瓶内种子倒入种子罐,移开火焰圈同时,盖上视镜,封严; 2、培养条件及控制:转速:240rpm、温度:30~32°C、罐压:0.05~0.07MPa、空气流量:8~I OmVhr、培养时间:约48小时;...

【专利技术属性】
技术研发人员:姚继成
申请(专利权)人:武汉佳成生物制品有限公司
类型:发明
国别省市:湖北;42

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